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1、毕业论文2014届快速测定半胱氨酸含量方法的研究学生姓名卓芸芸学号10114339系别化学化工学院专业班级药学102指导教师边可君完成日期2014年5月16日locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomisse
2、dfatal,whennightcame17快速测定半胱氨酸的含量方法研究摘要钙黄绿素是一种具有荧光性的物质，在pH8.0的KH2PO4-NaOH缓冲液中，Cu(Ⅱ)与钙黄绿素配位引起荧光猝灭。由于半胱氨酸与Cu(Ⅱ)的亲和力较强，可从钙黄绿素-Cu(Ⅱ)的络合物中夺取Cu(Ⅱ)而使钙黄绿素游离出来，从而使体系的荧光得以恢复，并且荧光恢复的程度与加入半胱氨酸的量在一定范围内呈线性，从而可以测定半胱氨酸的含量。本实验在钙黄绿素与铜离子1:1，体系时间30min后，激发光谱493nm，发射光谱510nm下进行测定，该
3、法的回归线性方程为：y=22.475x-64.1r为：0.34%回收率为：101.9%。关键词半胱氨酸；钙黄绿素-铜配合物；荧光光度分析方法locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,wh
4、ennightcame17StudyonthemethodofrapiddeterminationofcysteinecontentABSTRACTCalceinisafluorescentsubstance,KH2PO4-NaOHinpH8.0buffer,Cu(Ⅱ)andcalceinligandfluorescencequenching.DuetocysteineandCu(Ⅱ)affinityisverystrong,canfromthecalcein-Cu(Ⅱ)winCucomplex(Ⅱ)andmak
5、ethecalceinfreed,Sothatthesystemoffluorescencewasrestored,andthedegreeoffluorescencerestorationandthequantityofaddingcysteineinacertainrangeislinear.Sothatitcandeterminethecontentofcysteine.Thisexperimentinthecalceinwithcopperions1:1,Systemtimeafter30min,Exci
6、tationspectrum493nm,Emissionspectrumdeterminationunder510nm,Themethodforthereturnofthelinearequation:y=22.45x-63.6,r:0.34%,Therecoveryrateof:101.9%.KEYWORDScysteine;Calcein-coppercomplexes;FluorescentphotometricanalysismethodlocatedintheTomb,DongShenJiabang,d
7、eferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame17目录摘要IABSTRACTII目录III1绪论11.1常见的测定方法11.1.1HPLC法测定半胱氨酸的含量11.1.2分光光度法测定半胱氨酸的含量12实验部分52.1仪器、药品、试
8、剂52.2实验步骤52.2.1储备溶液配制52.2.2体系的激发和发射光谱52.2.3.钙黄绿素及铜离子浓度比对荧光强度的影响62.2.4缓冲溶液pH对荧光强度的影响62.2.5反应时间对荧光强度的影响62.2.6标准曲线的绘制及线性关系考察62.2.7精密度实验72.2.7回收率实验72.2.8样品半胱氨酸含量的测定73实验结果与讨论73.1磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液
