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《慢病毒高效感染皮肤人永生化表皮细胞株hacat细胞的分化状态》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、慢病毒高效感染皮肤人永生化表皮细胞株HaCaT细胞的分化状态侯 娜1,侯彬彬2,王秀丽3,刘玉芳1,郭 昕4,林 茂2,许雪珠21大连大学附属中山医院皮肤科,辽宁省大连市 116001;2大连医科大学附属第二医院皮肤科,辽宁省大连市 116027;3大连医科大学基础医学院,辽宁省大连市 116044;4中科院大连化学物理研究所生物技术部1802组,辽宁省大连市 116021DifferentiationofHaCaTcellsinfectedwithlentivirusHouNa1,HouBin-bin2,W
2、angXiu-li3,LiuYu-fang1,GuoXin4,LinMao2,XuXue-zhu21DepartmentofDermatology,ZhongshanHospitalAffiliatedtoDalianUniversity,Dalian116001,LiaoningProvince,China;2DepartmentofDermatology,SecondAffiliatedHospitalofDalianMedicalUniversity,Dalian116027,LiaoningProvi
3、nce,China;3CollegeofBasicMedicalScience,DalianMedicalUniversity,Dalian116044,LiaoningProvince,China;4Group1802,DepartmentofBiotechnology,DalianInstituteofChemicalPhysics,ChineseAcademyofSciences,Dalian116021,LiaoningProvince,China摘要 背景:研究证实YY1主要在小鼠基底层未分化表皮细
4、胞中表达,且随着表皮细胞向基底上层分化其表达逐渐下降,这种差异性表达方式说明YY1可能是表皮细胞分化过程中重要的调节因子之一。目的:采用慢病毒-YY1感染HaCaT细胞观察YY1过表达对细胞分化的影响。方法:将慢病毒-YY1感染至HaCaT细胞,经puromycin筛选,建立单克隆稳定细胞株,设对照组为慢病毒感染的HaCaT细胞和未感染的HaCaT细胞,Westernblot检测分析YY1蛋白的表达水平;将慢病毒-YY1-HaCaT组和HaCaT-YY1组细胞各分成2组,一组在低钙(0.12mmol/L)培养
5、基条件下培养48h,另一组在低钙 (0.12mmol/L)培养基条件下培养24h后在高钙(0.35mmol/L)培养基条件下再培养24h,用Westernblot法检测YY1过表达对HaCaT细胞分化中的表皮细胞特异性分化角蛋白K1、K10、K14和晚期分化产物外皮蛋白、中间丝相关蛋白、兜甲蛋白的影响。结果与结论:慢病毒-YY1成功感染HaCaT细胞,高钙条件下获得的单克隆细胞株过表达YY1蛋白,可抑制K1、外皮蛋白和兜甲蛋白的合成,从而阻止表皮细胞角质化进程并使细胞处于未分化状态。结果说明慢病毒可高效感染
6、皮肤人永生化表皮细胞株HaCaT细胞,YY1可能是抑制基底表皮细胞分化并维持其未分化增殖状态的重要因子之一。locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame中国组
7、织工程研究杂志出版内容重点:组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程全文链接:窗体顶端关键词:组织构建;组织工程;HaCaT细胞;YY1;慢病毒;角蛋白;感染;国家自然科学基金; Abstract:BACKGROUND:YY1ismainlyexpressedintheundifferentiatedepidermiccellsinmousebasallamina,andtheexpressionlevelisgraduallydown-regulatedasthe
8、differentiationtowardssuprabasallamina.Thedifferentialexpressionindicatesthat,YY1isoneoftheregulatorsintheprocessofepidermiccellsdifferentiation.OBJECTIVE:ToobservetheeffectsofYY1over-expressiononthedi