HPV16 E6和E7慢病毒稳定感染HaCaT细胞系的建立-论文.pdf

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5、132．turedneonatalcardiomyocytes[J]．ClinExpPharmacolPhysiol，(收稿日期：2014一叭一1O编辑：祝华)HPV16E6和E7慢病毒稳定感染HaCaT细胞系的建立术沈青丽，叶明，何耀娟，郭凯敏广东省广州市妇女儿童医疗中心妇产科(510623)【摘要】目的建立稳定表达HPV16E6和E7基因的HaCaT细胞，为进一步研究HPV16E6和E7基因在宫颈鳞癌的发生和发展中与其他基因的相互关系打下基础。方法分别构建HPV16E6和E7基因的表达载体pSin—EF2一Puro—HPV16／E6和pSin—EF2一Puro—H

6、PV16／E7，在293FT细胞内包装产生HPV16E6和E7慢病毒，感染HaCaT细胞后，嘌呤霉素筛选，建立稳定感染的细胞株，Westernblot对稳定感染细胞株进行鉴定。结果经West．ernblot实验证实，在稳定感染HPV16E6和E7慢病毒的HacaT细胞中，分别能够高水平表达HPV16E6和E7的蛋白。结论稳定表达HPV16E6和E7的HaCaT细胞系建立成功。【关键词】子宫颈癌；HPV16；HaCaT；慢病毒虽然在过去的50年里，由于筛查的系统开展，西稳定表达HPV16E6和E7基因的人角质形成HaCaT方世界的宫颈癌的发生率和病死率已经下降了70％，

7、细胞系，为进一步研究HPV16的癌基因在宫颈鳞癌的但是仍然居女性恶性肿瘤的第2位，并且在发展中地发生和发展中的作用，为探索基因治疗宫颈癌的新途区，居女性恶性肿瘤的第1位。预防性的HPV疫径打下基础。苗在全世界范围内的覆盖率还很不均匀J，相当大部1材料与方法分的妇女仍有发生宫颈癌的风险。所以对宫颈癌的发1．1细胞株和实验材料293FT细胞和人永生化角生机制的深入研究还很有必要。HPV感染是宫颈癌的质形成细胞HaCaT细胞购自美国标准生物品收藏中主要危险因素，所有区域中占主导地位的致癌基因型心(Americantypeculturecollection，