hplc 测定复方丹参方中三七皂苷类成分的含量

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1、HPLC测定复方丹参方中三七皂苷类成分的含量潘桂湘基金项目：国家重点基础研究规划项目(G199944054403)作者简介：潘桂湘(1976-)，男，硕士，研究方向为药物分析。Tel：022-23051076Email：guixiangp@163.com，高秀梅，张伯礼(天津中医学院，天津300193)摘要:目的建立复方丹参方中三七皂苷类成分的含量测定方法，并初步考察复方丹参方溶液的稳定性。方法采用高效液相色谱法，分别以乙腈-0.05%磷酸（19：81）为流动相，于203nm处检测三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re；以乙腈-水（

2、33：67）为流动相，于203nm处检测人参皂苷Rb1。结果三七皂苷R1进样量在0.24～3.6μg范围时，相关系数r=0.9997；人参皂苷Rg1进样量在1.2～18μg范围时，相关系数r=0.9994；人参皂苷Re进样量在0.08～1.2μg范围时，相关系数r=0.9997；人参皂苷Rb1进样量在0.25～3.72μg范围时，相关系数r=0.9998。复方丹参方溶液于4℃放置4个月后三七皂苷类成分的含量无明显变化。结论本法简便，快速，准确，重现性好，可作为复方丹参方的质量控制标准；复方丹参方中三七皂苷类成分的稳定性良好。关键词三七；

3、三七皂苷R1；人参皂苷Rg1；人参皂苷Re；人参皂苷Rb1；HPLClocatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame2复方丹参方由丹参、三七及冰片组成，具有活血化瘀，理气止痛之功效，是临床治

4、疗冠心病、心绞痛的常用中药处方[1]。《中国药典》2000年版收载的该方剂型为复方丹参片和复方丹参滴丸[2]，在其含量测定项下，只对丹参中丹参酮ⅡA或丹参素作出要求，而对三七皂苷成分则没有相应的规定。为了较全面评价复方丹参方的质量，我们同时制定复方中三大物质群——丹参水溶性成分、丹参脂溶性成分和三七皂苷类成分的质量控制方法。该文报道的是复方丹参方中三七皂苷类成分的HPLC测定方法。三七的主要成分是三七皂苷[3]，有很多与人参皂苷相同（如人参皂苷Rg1、Rb1、Re），还有些是三七本身独有的成分（如三七皂苷R1）。现有大部分三七及其相关制

5、剂（如复方丹参片、复方丹参口服液）的质量标准[4～7]大多仅对三七中的1～2个成分进行定量，《中国药典》三七药材的含量测定项下[2]，也只采用TLC法测定人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1两个成分。本文采用HPLC法，选择20(S)-原人参二醇型人参皂苷Rb1、20(S)-原人参三醇型人参皂苷Rg1、人参皂苷Re，及三七独有成分三七皂苷R1作为指标，建立了复方丹参方中三七皂苷类成分的含量测定方法。1实验部分1.1仪器与试药HP1100高效液相色谱仪，G1311A-四元泵，G1322A-脱气机，G1316A-柱温箱，1314A-UV可变波长检

6、测器，HPRev.A.0501化学工作站；乙腈为色谱纯，水为超纯水，磷酸为分析纯，三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1对照品（中国药品生物制品检定所）；丹参提取物和三七提取物（自制）。1.2色谱条件HypersilC18色谱柱（5μm，4.6mm×250mm），Sep-PakC18固相萃取小柱(60μm，6cc/500mg)，三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Re以乙腈-0.05%磷酸（19：81）为流动相，流速为1.0mL/min，检测波长为203nm，色谱图见图1；人参皂苷Rb1以乙腈-水（33：67）为流

7、动相，流速为1.0mL/min，检测波长203nm，色谱图见图2。1.3标准曲线的绘制1.3.1标准贮备液配制精密称取三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和人参皂苷Re适量，用甲醇制成系列浓度的对照品混合溶液，进样10μL。locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whog

8、otAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame21.3.2线性关系考察以峰面积（Y）为纵坐标，进样量（X）为横坐标作图，得三七皂苷R1的回归方程为Y=92.054