实验室消毒与灭菌效果评价标准1.4

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1、ADICONClinicalLaboratories,Inc.艾迪康医学检验中心StandardOperatingProcedure标准操作程序ADNo.编号:SOP-LAB025-GVersion/Revision版次:1.4Page页码6of6Writtenby编制人：guojunzhang张国君Date日期:20100121EffectiveDate生效日期:DistributionScope发放范围：LAB实验室Reviewedby审核者：Approvedby批准人：DocumentAnnuallyReviewing文件年度审核Reviewedby审核者：R

2、eviewedby审核者：Reviewedby审核者：Date日期：Date日期：Date日期：Reviewedby审核者：Reviewedby审核者：Reviewedby审核者：Date日期：Date日期：Date日期：实验室消毒与灭菌效果评价标准操作程序1目的消毒和灭菌对于实验室生物安全是至关重要的.感染性物质的消毒和灭菌效果评价,是对实验室生物危害的有效监控。2适用范围中华人民共和国国家标准《消毒与灭菌效果的评价方法与标准》GB15981-1995。3职责适用于压力蒸汽灭菌设备灭菌效果、紫外线表面消毒效果评价以及消毒剂浓度测定。4工作程序4.1试剂和仪器4.1

3、.1试剂：嗜热脂肪杆菌芽胞菌片，压力蒸汽灭菌化学指示卡，紫外线强度指示卡，G-1型消毒剂浓度试纸，以上材料均购自北京四环卫生药械厂。4.1.2仪器：SartoriusBaa3s型电子天平（上海），TD型电子天平，GNX-9080型隔水式恒温培养箱（上海），GNP-9080型隔水式恒温培养箱，超净工作台，LDZH-100KBS立式压力蒸汽灭菌器（上海），手提式压力蒸汽灭菌器。4.2标准操作程序4.2.1压力蒸汽灭菌效果评价4.2.1.1生物学检测方法（商品化嗜热芽胞杆菌生物指示剂）1）将嗜热芽胞杆菌生物指示剂放入待灭菌物品中，置于压力蒸汽灭菌器经过一个灭菌周期（121

4、℃，20min/121℃，30min）后，从压力蒸汽灭菌器中取出嗜热芽胞杆菌生物指示剂，击碎生物指示剂中玻璃管让溴甲酚紫蛋白胨水培养基浸润沾有嗜热芽胞杆菌的纸片，置培养箱中56℃培养7天，观察培养基颜色变化，并记录结果。ADICONClinicalLaboratories,Inc.艾迪康医学检验中心StandardOperatingProcedure标准操作程序ADNo.编号:SOP-LAB025-GVersion/Revision版次:1.4Page页码6of62）结果判定：溴甲酚紫蛋白胨水培养基不变色，判定为灭菌合格；溴甲酚紫蛋白胨水培养基由紫色变为黄色时，判定

5、为灭菌不合格。4.2.1.2生物学检测方法（非商品化嗜热脂肪芽胞杆菌生物指示剂）1）2%溴甲酚紫酒精溶液的配制：取溴甲酚紫2.0g，溶于100ml95%乙醇中。2）溴甲酚紫蛋白胨水培养基的配制：蛋白胨5g，葡萄糖2.5g，溶于500ml蒸馏水中，调PH值至7.0~7.2，然后再加入2%溴甲酚紫酒精溶液0.3ml，摇匀后，按5ml/管分装入中号试管、包口，并置压力蒸汽灭菌器中，于121℃（0.105Mpa/cm2）灭菌30min备用。3）将中号试管、橡皮塞、牛皮纸置压力蒸汽灭菌器中，于121℃灭菌30min备用。4）将嗜热脂肪杆菌芽胞指示菌片分别放于两只经过灭菌的中号

6、试管中，用灭菌橡皮塞塞住试管口，然后用灭菌牛皮纸包封后置于金属试管架中间部位，一同放入压力蒸汽灭菌器中进行灭菌。在压力灭菌的过程中，将超净工作台紫外线灯开启，照射30分钟后，关闭紫外线灯，打开超净工作台风机和照明灯，备用。5）经过一个灭菌周期（121℃，30min）后，从压力蒸汽灭菌器中取出试管架，在工作台内将试管中经过灭菌的菌片取出，投入经灭菌的溴甲酚紫蛋白胨水培养基中，并用灭菌橡皮塞塞住试管口，置培养箱中56℃培养48小时，观察培养基颜色变化，并记录结果。6）结果判定：同次检测中，每个指示菌片接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基全部不变色，判定为灭菌合格，若有其中之一指

7、示菌片接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基由紫色变为黄色时，判定为灭菌不合格。4.2.1.3压力蒸汽灭菌效果评价生物学检测每个月检测一次。4.2.1.4化学检测方法1）将3份化学指示卡片放入待灭菌物品包内上、中、下三个部位，置于压力蒸汽灭菌器中。2）经过一个灭菌周期（121℃，20min/121℃，30min）后取出指示卡片，观察卡片上指示色块颜色变化，并与标准色块进行对比，并记录结果3）结果判定：灭菌后，指示色块颜色的深度达到或超过指示卡上标准色块的颜色，表示灭菌合格，若浅于标准色块，表示灭菌不合格。4）注意事项：压力灭菌时，待温度（压力）升至121℃（0.105Mp