GB 15981-1995 消毒与灭菌效果的评价方法与标准

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1、中华人民共和国国家标准之山日邑卜二二下丁-AWSP&住1内人言布石人任二:+七二f=".&泪每勺火困双未tf91拼力达勺你淮GB15981一1995Evaluatingmethodandstandardfortheefficacyofdisinfectionandsterilization第一篇压力蒸汽灭菌效果评价方法与标准1主题内容与适用范围本方法规定了压力蒸汽灭菌技术标准及其评价灭菌效果的检测方法。本方法适用于对压力蒸汽灭菌设备灭菌效果的评价。2试剂本标准所用试剂,凡未说明规格者,均为分析纯(AR),水为蒸馏水。2.1蛋白陈。2.2葡萄糖。2.3嗅甲酚紫酒精溶液:取澳甲酚紫2.Og,

2、溶于100mL95%乙醇中。2.4澳甲酚紫蛋白陈水培养基配制:蛋白脏10.Og,葡萄糖5.Og,溶于1000mL蒸馏水中,调pH值至7.0-7.2,然后再加2%澳甲酚紫酒精溶液0.6mL,摇匀后,按5mL/管,分装包口,置压力蒸汽灭菌器中,于115C灭菌40min后备用。3指示菌嗜热脂肪杆菌芽胞(ATCC7953或SSIK31)菌片,含菌量为5X10'-5X106cfu/片,121C下,杀灭90%微生物所需时间D12,值为1.3-l.9min,杀灭时间(KT值)为夏19min,存活时间(ST值)为)3.9mino4化学指示剂需用卫生部批准的化学指示剂。5技术要求压力蒸汽灭菌器压力,MPa

3、/cm2温度,C灭菌时间,mm下排气式0.070115400.10512130预真空式0.2101344^"66一07一01实施Gs15981一19956检测方法6.1生物学指标(用作压力蒸汽灭菌设备灭菌效果的依据)。6.1.1将嗜热脂肪杆菌芽胞菌片两个分别放入灭菌小纸袋内,置于标准试验包中心部位。6.1.2灭菌柜室内,上、中层中央和排气口处各放置一个标准试验包(由3件平纹长袖手术衣,4块小手术巾,2块中手术巾,1块大手术巾,30块l0cmXl0cm,8层纱布敷料包裹成25cmX30cmX30cm大小)。手提压力蒸汽灭菌器用通气贮物盒(22cmX13cmX6cm)代替标准试验包,盒内盛满

4、中试管,指示菌片放于中心部位两只灭菌试管内(试管口用灭菌牛皮纸包封),将盒平放于手提压力蒸汽灭菌器底部。6.1.3经一个灭菌周期后,在无菌条件下,取出标准试验包或通气贮物盒中的指示菌片,投入澳甲酚紫葡萄糖蛋白陈水培养基中,56'C培养48h,观察培养基颜色变化。6_2化学指标在物品包外用化学指示胶带,可作为物品是否经过灭菌的处理标志。在物品包内中心部位用化学指示剂,可作为物品是否灭菌的参考标志。7结果判定及评价7.1同次检测中,标准试验包或通气贮物盒内,每个指示菌片接种的澳甲酚紫蛋白陈水培养基全部不变色,判定为灭菌合格。指示菌片之一接种的澳甲酚紫蛋白陈水培养基由紫色变为黄色时,判定为灭菌

5、不合格。7.2化学指示剂的颜色变为与灭菌合格标准色相同时,或熔化时作为灭菌合格的参考标准。第二篇紫外线表面消毒效果评价方法与标准8主题内容与适用范围本方法规定了物体表面消毒用紫外线的波长、强度及评价其消毒效果的物理学指标和生物学检测方法。本方法适用于紫外线直接照射到的物体表面消毒效果评价。9指示菌9.1大肠杆菌(8099或ATCC25922).9.2枯草杆菌黑色变种芽胞(ATCC9372).10物理学指标10.1在电压220V时,普通30W直管型紫外线灯,在室温为20^-25℃的使用情况下,253.7nm紫外线辐射强度(垂直lm处)应)70IIW/cm2010.2在电压220V时,高强度

6、紫外线灯,在室温为20^-25℃的使用情况下,253.7nm紫外线辐射强度(垂直lm处)应》200tW/cm2010.3照射剂量按式(1)计算:剂量妞W"s/cm2)二强度印W/cm2)X时间(s)·····················⋯⋯(1)11检测方法11.1物理学检测方法11.1.1灯管的紫外线强度(rLW/cm2)用中心波长为253.7nm的紫外线强度测定仪(标定有效期内),在灯管垂直位置lm处测定GB15981一199511-1.2在实际应用中消毒表面的照射强度应以灯管与消毒对象的实际距离测定。11-1.3表面消毒接受的照射剂量,应达杀灭目标微生物所需。对大肠杆菌,照射剂

7、量应达到20000KW·s/cmz,对枯草杆菌黑色变种芽胞应达到100OOOJAW·s/cm2,11.2生物学检测方法11.2.1采用载体定量消毒试验。载体制备按本标准附录C进行。11.2.2开启紫外线灯5min后,将8个染菌玻片平放于灭菌器皿中,水平放于适当距离照射,于4个不同间隔时间各取出2个染菌玻片,分别投入2个盛有5mL洗脱液((1%吐温80,1%蛋白陈生理盐水)试管中,振打80次。11.2.3经适当稀释后,取。.5mL洗脱

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