转基因动物用微生物安全性评价

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1、生物安全Biosafety动、植物用转基因微生物的安全性红河学院生命科学与技术学院微生物的特点个体小繁殖快数量大易变异分布广泛生命力强容易扩散内容提要（1）动、植物用转基因微生物的发展概况；（2）动物用转基因微生物的安全性评价（受体微生物的安全性评价、转基因操作的安全性评价、动物用转基因微生物的安全性评价、动物用转基因微生物产品的安全性评价）；（3）植物用转基因微生物的安全性评价（受体微生物的安全性评价、转基因操作的安全性评价、植物用转基因微生物的安全性评价、植物用转基因微生物产品的安全性评价）；（4）动、植物用转基因微生物的安全管理（国外、国内）。动、植物用转基因微生物的定义动物用转

2、基因微生物主要包括动物用转基因活疫苗和动物用转基因活微生物饲料添加剂；植物用转基因微生物是指通过重组DNA技术研制的，直接应用于植物上具有杀虫、防病、固氮、调节生长等作用的微生物。（一）转基因微生物概况转基因动物用微生物的研究与开发起步于20世纪80年代初口蹄疫病毒是最早研究的对象国际上发达国家对基因工程疫苗的研究与开发十分重视已相继研制成功一些用于动物疫病免疫预防用的基因工程亚单位疫苗、基因工程重组活载体疫苗、基因缺失疫苗、DNA疫苗等1.转基因微生物饲料添加剂酶制剂以基因工程研制能高效表达植酸酶的重组毕氏酵母。抗菌肽减少或完全替代抗生素药物。重组生长激素2.基因工程亚单位疫苗利用体

3、外表达系统（如大肠杆菌，酵母，动物细胞，杆状病毒-昆虫细胞等）表达病毒的主要保护性抗原蛋白作为亚单位疫苗不仅具有优良的安全性，而且便于规模化生产利用非疫苗用蛋白作为抗原建立的诊断方法将可以区分亚单位疫苗免疫的动物和自然感染的动物涉及动物病原大多数禽、猪、牛等动物的病原体免疫原性蛋白（保护性抗原）FMDVVP1、狂犬病病毒的囊膜蛋白G，AIVHA蛋白，伪狂犬病病毒的囊膜糖蛋白gP50，新城疫病毒F和HN蛋白,传染性法氏囊病毒VP2蛋白，传染性胃肠炎病毒的纤突蛋白，鸡传染性贫血病病毒的衣壳蛋白（VP1）……….2.基因工程重组活载体疫苗痘病毒、疱疹病毒、腺病毒或细菌作为载体具有常规弱毒疫苗

4、的所有优点便于构建多价疫苗利用非疫苗用基因或其表达产物可以建立鉴别诊断方法利用痘病毒作为载体痘苗病毒数十种病原的基因在痘苗病毒中进行了表达，都显示出不同程度的免疫保护性。比较成功的有表达狂犬病病毒G蛋白的重组痘苗病毒和表达牛瘟病毒F和HA蛋白的重组痘苗病毒疫苗禽痘病毒（鸡痘病毒、金丝雀痘病毒、鸽痘病毒）新城疫病毒F和HN蛋白禽流感病毒的HA和NP蛋白马立克氏病毒gB糖蛋白禽白血病囊膜蛋白传染性法氏囊病病毒VP2蛋白禽网状内皮增生症病毒囊膜蛋白火鸡出血性肠炎病毒Hexon蛋白利用腺病毒作为载体目前已有许多外源基因被插入腺病毒并得到表达SIV水疱性口炎病毒狂犬病病毒牛副粘病毒3型牛疱疹病毒

5、I型牛冠状病毒猪传染性胃肠炎病毒利用疱疹病毒作为载体火鸡疱疹病毒、伪狂犬病病毒、牛疱疹病毒I型和鸡传染性喉气管炎病毒已完成动物试验并显示出良好前景的重组疱疹病毒疫苗：口蹄疫病毒VP1基因，猪瘟病毒E2基因，猪繁殖与呼吸综合症病毒GP5基因，猪流感病毒HA基因的重组伪狂犬病毒疫苗表达传染性法氏囊病毒VP2基因的重组马立克氏病毒疫苗表达禽流感病毒HA基因的重组传染性喉气管炎病毒疫苗利用细菌作为载体大肠杆菌沙门氏菌李氏杆菌目前国际上基因工程疫苗研究与开发的热点之一3.基因缺失疫苗一类发展前景很好的基因工程疫苗伪狂犬病基因缺失疫苗(双基因和三基因缺失疫苗，如TK-/gG-、TK-/gE-、TK

6、-/gC-和TK-/gE-/gI-等，并已商品化生产牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）TK基因缺失疫苗4.DNA疫苗DNA疫苗可诱导机体同时产生体液免疫和细胞免疫已发现DNA接种对许多病毒、细菌、寄生虫感染以及肿瘤的预防均有一定的效果其他疫苗可食性疫苗(利用转基因植物)多表位疫苗T细胞疫苗RNA复制子疫苗基因工程疫苗的产业化与应用是目前和今后的发展趋势含狂犬病毒gB基因的重组牛痘病毒疫苗，已在北美和欧洲广泛应用于预防野生动物的狂犬病TK和gE双基因缺失的伪狂犬病疫苗已在美国和大部分欧盟国家广泛应用于预防猪伪狂犬病和猪伪狂犬病根除计划TK和gE双基因缺失的牛传染性鼻气管炎病毒疫苗也在许多国

7、家使用，荷兰于1998年5月在全国范围内推广使用TK和gE双基因缺失的疫苗以便根除此病表达禽流感病毒HA基因的重组鸡痘病毒疫苗和表达新城疫病毒F基因的重组鸡痘病毒疫苗也已获得美国农业部注册，开始产业化生产2、国内研发情况我国动物用基因工程疫苗的研究与发达国家之间没有实质性差距，而且取得了巨大进展十五期间，国家863计划在动物用基因工程疫苗与诊断试剂的研究与开发方面的投入有所加强近几年，我国动物用基因工程疫苗研究呈现出加速发展的态势，已有多种基因