自制乙肝表面抗原室内质控

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1、自制乙肝表面抗原室内质控六盘水市人民医院检验科　　孙乾敏杨敏彭莹[摘要]　目的：自制实验室乙肝表面抗原（HbsAg）室内质控。方法：将HbsAg阴性血清和阳性血清按一定比例混合，找出弱阳性倍数。该弱阳性OD值取该试剂盒CUT－OFF的2-3倍。同时与临检中心提供的HbsAg质控品作比较。结果：找出的质控品的S/CO值均值为2.345，该值在半年之内无明显变化。结论：自制HbsAg弱阳性标本可以作为室内质控。目前，国内基本上采用ELISA法检测乙肝表面抗原，该方法操作方便，快捷，但由于此方法学特点，批内，批间的CV值较大

2、。为了防止结果出现偏差，仅靠商品试剂盒配带的阴阳性质控对照，达不到控制各种因素造成的误差，给HBV感染者的临床诊断和治疗带来了混乱，因此建立室内质控非常重要[1]。本文将参照卫生部临床检验中心的标准和要求，研制出稳定符合质控品要求的医院自用的HbsAg室内质控标准品[2]。现就本室开展室内质控的措施和体会报告如下：1材料和方法：1.1仪器酶标仪：深圳雷杜RT－2100C　　　　　　洗板机：上海新波Egage23101.1试剂：夏门英科新创，批号：20100161031.2方法：1.2.1分别收集乙肝表面抗原阳性和阴性标

3、本血清，要求血清无黄疸，无溶血，无脂血。将血清56Cº，30min灭活，3000r/min,离心15min.1.2.2用HBsAg阴性血清梯度稀释HbsAg阳性血清，找出该试剂盒CUT－OFF的2-3倍的稀释倍数。该稀释后的血清定为弱阳性血清。将弱阳性血清按半年使用量统一配制，然后再按一周实验用量子弹头分装，标记，-20Cº冻存。1.2.3将稀释后的弱阳性血清进行二个批次的检测，每次不少于10个测试，建立质控图参数。然后从第21次测试开始，记录并监控质控状态。同时每次测试均带有临床检验中心配制的室内质控作比较，以便监控

4、实验的重复性和稳定性，同时可以了解孔间差异。2结果：根据两个批次做出的S/CO值算出质控参数：1）算术平均值：X＝2.3452）标准差:S=0.4653）变异系数：CV＝19.83%绘制质控图：最常用的质控图是Levery-Jennings质控图，以S/CO值作纵座标（Y轴），每天试验作横座标（X标），从21次起，将每次质控血清的检测结果依次点入质控框图中，检验进入质控状态。自制的室内质控在半年的使用中，共做质控120次，失控12次。分析失控原因，有5次洗板机不通畅，标本之间交叉污染，有3次质控室温放置时间过长，导致结

5、果偏低。终上所述，排出实验室交叉污染，条件改变等外界因素引起失控外，失控率为3.3%，在控率为96.7%。结论：弱阳性标本结果基本在控。说明自制的弱阳性标本含量未有太大的差异，可作为室内质控使用。1讨论：3.1乙肝病毒的慢性携带者占我国人口的10%－20%，乙肝病毒可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化，部份患者可转化为肝硬化甚至肝癌，已成为严重的社会和公共卫生问题。HbsAg是诊断乙肝的主要手段，但是由于ELISA定性法受反应温度，反应时间，交叉污染等多种因素影响，特别是低值弱阳性常漏判，自制简便，经济，重复性好的HbsAg

6、室内质控，提高检验质量。1.1质控规则的使用应检出随机误差和系统误差，即具有高的检出分析误差的能力，同时应具有较低的假失控概率。考察试验系统的可靠性应采用多标准质控方案，多规则质控方法能提高误差，并具有低的假失控概率。其要点为：出现一次2S范围的变化时，系统处于告警状态，应注意，是否可以继续检测需要进一步观察。出现下列情况时，应暂停查找原因：出现一次3S范围的变化，连续两次出现同一方向2S范围的变化，连续四次出现出现同一方向的1S范围的变化，连续10次结果都在1S范围内，但均值的同一侧。当出现失控时进行如重复质控测定或

7、重新分析新质控物不是最的效的方法，必需找出问题原因，找出解除故障的方法，并削除原因，防止还会出现同样的问题。1.1影响ELISA法实验精密度的因素除方法学本身的误差外，日常实验中酶标仪的性能，洗板机的质量，操作者的质量控制意识等都是很重要。酶标仪和洗板机要注意维修和保养，尤其是洗板机在使用后一定要用蒸馏冲洗管道，否则时间长了管道会出现絮状沉淀而堵孔，导致样品孔清洗不净或孔间交叉污染，出现假阳性。检验人员在分析前，分析中和分析后都要严格把关，做到眼到手到心到。因此，实验中，有效控制各种可能发生的影响因素，为实验结果提供了

8、强有力的保障，也是室内质控的最终目的。[1]范秀芹，林凌云，岳志蹦等。室内质控问题的探讨[J]。中国煤炭工业医学杂志，2002.1：89-92[2]王露楠，吴健民，李金明等。丙型肝火病毒核试验酸检测的国家标准物质的研制[J].中华检验医学杂志，2006.4：354-355