固态发酵论文：果胶裂解酶超滤不饱和低聚半乳糖醛酸

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1、固态发酵论文：果胶裂解酶超滤不饱和低聚半乳糖醛酸【提示】本文仅提供摘要、关键词、篇名、目录等题录内容。为中国学术资源库知识代理，不涉版权。作者如有疑义，请联系版权单位或学校。【摘要】本论文对Aspergillusnigerwz003的产酶条件，果胶裂解酶酶学性质，不饱和低聚糖的制备条件以及不饱和低聚糖的分离纯化进行了研究。首先对Aspergillusnigerwz003固态发酵制备高活性果胶裂解酶的生理生化参数进行了优化。试验结果表明：当Aspergillusnigerwz003以12％（v／w，106个／ml）接种量，在最佳产酶培养基麸皮40.0g／L、桔皮粉20.0g／L、NaNO312

2、.8g／L、KH2PO41.2g／L、含水量60％（w／w），在起始pH6.6，40℃发酵培养72h，每克鲜曲中果胶裂解酶酶活可达2607.82U／g，比基础培养条件下提高了近56倍；而聚半乳糖醛酸酶的合成得到了有效控制，酶活为462.12U／g。用硫酸铵盐析法对酶液进行了初步分离纯化，确定了果胶裂解酶的硫酸铵饱和度范围为40-85％。经过实验得出果胶裂解酶最适反应温度为40℃，最适作用pH6.8；pH稳定范围6.4-8.0，温度稳定范围为25-55℃；Ca2+和Zn2+对果胶裂解酶活性有一定的激活作用，而Mg2+、Na+、Mn2+、Ba2+和Cu2对果胶裂解酶活性无明显作用。通过单因素实验

3、优化制备不饱和果胶低聚糖的较佳水解工艺为底物果胶浓度1.76％，果胶的酯化度为65.8，粗酶液2％，反应的最适pH6.8，反应的最适温度40℃，反应时间20h。采用超滤法分离果胶水解液，研究了超滤操作压力、溶液浓度和溶液pH对聚醚砜膜（PES-10）渗透通量的影响，结果表明：超滤分离浓度1.76％的果胶水解液，压力为0.14MPa，pH为6.4，膜渗透通量相对较高。然后将滤过液依次通过截留分子量为5000Da的聚醚砜膜和截留分子量为1000Da的再生纤维素膜，并采用HPLC法对滤过液进行了检测分析。最后通过质谱分析果胶水解液U0，得到水解液中含有4种分子量2000Da以下不饱和果胶低聚糖。【

4、关键词】固态发酵；果胶裂解酶；超滤；不饱和低聚半乳糖醛酸；【篇名】果胶裂解酶的发酵及其在制备不饱和低聚糖方面的应用【目录】果胶裂解酶的发酵及其在制备不饱和低聚糖方面的应用摘要3-5ABSTRACT5-6第一章综述11-261.1果胶酶的分类与作用机制11-141.1.1聚半乳糖醛酸酶11-131.1.2裂解酶13-141.2产果胶酶的微生物来源14-151.2.1真菌类果胶酶产生菌14-151.2.2细菌类果胶酶产生菌151.3果胶酶活力测定方法15-181.4微生物发酵法生产果胶酶18-211.4.1发酵方式对微生物产果胶酶的影响18-191.4.2营养条件对微生物产果胶酶的影响19-20

5、1.4.3发酵条件对微生物产果胶酶的影响20-211.5果胶酶在制备功能性果胶低聚糖方面的应用21-251.5.1果胶低聚糖的生理活性21-221.5.2果胶酶制备的功能性果胶低聚糖22-231.5.3低聚糖(oligosaccharide)的分离纯化方法23-251.6本课题的研究内容和意义25-261.6.1课题的研究意义251.6.2研究内容25-26第二章果胶裂解酶培养基及发酵条件的优化26-412.1材料与方法26-292.1.1实验材料26-272.1.2主要仪器27-292.2结果与讨论29-402.2.1不同碳源对产酶的影响29-312.2.2不同氮源对产酶的影响31-322

6、.2.3吐温80对产酶的影响32-332.2.4无机盐对PL和PG合成的影响33-342.2.5培养基含水量对PL和PG的影响342.2.6温度对PL和PG合成的影响34-352.2.7接种量对产酶的影响35-362.2.8培养基起始pH值对产酶的影响362.2.9正交优化PL培养基36-382.2.10固体发酵产酶进程38-402.3小结40-41第三章果胶裂解酶酶学性质及不饱和果胶低聚糖制备条件的优化41-563.1材料与方法41-453.1.1主要实验材料41-423.1.2主要仪器423.1.3相关溶液配置423.1.4方法42-453.2结果与讨论45-543.2.1硫酸铵盐析法对

7、果胶裂解酶的初步纯化46-473.2.2果胶裂解酶的酶学性质47-513.2.3不饱和果胶低聚糖制备条件的优化51-543.3讨论与小结54-56第四章不饱和果胶低聚糖的制备和初步分离56-684.1材料与方法56-584.1.1实验材料56-574.1.2主要仪器574.1.3方法57-584.2结果和讨论58-674.2.1超滤条件的优化58-614.2.2不饱和果胶低聚糖的分离614.2.3不饱和果胶低