蛙心搏的观察与描记期外收缩与代偿间歇和蛙类离体心脏灌流.

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1、蛙心搏的观察与描记期外收缩与代偿间歇和蛙类离体心脏灌流实验日期：5月7号室温：28℃一、实验对象与实验材料1.蛙3只2.常规手术器械、蛙板、蛙心夹、毁髓针、棉球、滴管、纱布、棉线、任氏液、小烧杯（或培养皿）、污物缸3.秒表（手机秒表）、两个针头（针灸针）、双针形露丝刺激电极、张力换能器、支架、滑轮、双凹夹、PowerLab生理实验系统、蛙心插管（斯氏套管）、套管夹4.0.65%NaCl溶液，5%NaCl溶液，2%CaCl2溶液，1%KCl溶液，1:5000肾上腺素，1:10000乙酰胆碱溶液，300U/ml

2、肝素溶液二、实验方法与步骤(一）蛙的心搏观察1.双毁髓，暴露蛙心脏：小心剪去心包膜。2.观察蛙心脏结构3.观察心搏过程，记录正常心跳次数4.斯氏第一结扎，观察记录静脉窦、心房和心室5.斯氏第二结扎，观察记录静脉窦、心房和心室6.重复步骤1制备另一个蛙心暴露，用于下面的心搏曲线实验（二）蛙的心搏曲线与心电图记录1.连接实验装置：PowerLab刺激输出线接双针形刺激电极，张力换能器接通道2，通道3生物电输入线接针形电极2.用蛙心夹轻夹心尖连接张力换能器，可用滑轮，棉线适当延长点，角度放低3.开机，打开char

3、t软件，分别设置ch2和ch3放大参数，设置刺激为单脉冲。4.针形电极插入蛙上下肢皮肤，连接通道35.观察正常的蛙心搏曲线和心电图记录（三）期外收缩与代偿间歇实验1.在方法二的基础上，将刺激电极放到心室部位，注意尽量不影响心脏的收缩舒张2.分别在心室的收缩期，舒张早期、中期和晚期给予适当强度单脉冲（阈上刺激），观察期外收缩和代偿间歇的发生。3.保存数据4.进入方法四，制备蛙的离体心脏灌流装置（四）蛙离体心脏灌流装置1.7双毁髓，暴露蛙的心脏，分辨连接蛙心脏的血管：动脉圆锥、左主动脉和右主动脉，静脉与静脉窦1

4、.用斯氏蛙心插管法制备离体蛙心。（五）离体心脏灌流实验项目1.记录正常心搏曲线，准备好加药标记，以下实验过程中保持chart连续不停的记录2.滴加0.65%NaCl溶液并标记，观察到心搏明显变化后，吸去套管内溶液并同时做冲洗标记，用新鲜的任氏液清洗2~3次，待心搏曲线恢复正常。注意，换液时切勿碰套管，保持灌流液面一致。（以下实验同）。保持Chart连续采样直到实验结束。3.滴加5%NaCl2~6滴4.滴加2%CaCl2溶液1~3滴实验5.滴加1%KCl溶液1~2滴实验6.滴加1~2滴肾上腺素溶液（1:500

5、0）实验7.滴加1~2滴1:10000乙酰胆碱溶液实验8.实验结束，保存数据，回放记录，卸下实验装置，清理仪器、桌面卫生，并关PowerLab和电脑电源三、实验结果：（1）蛙心搏的观察与描记表1.斯氏结扎记录表实验项目频率/次*min-1静脉窦心房心室对照605555第一结扎604242第二结扎604237实行斯丹尼氏第一结扎后，静脉窦收缩的频率为60次·min-1，而心房和心室的收缩频率相同均为42次·min-1；实行斯丹尼氏第二结扎后，静脉窦收缩的频率为60次·min-1，心房的收缩频率为42次·min

6、-1，心室的收缩频率为37次·min-1。（2）期外收缩与代偿间歇的观测7图一、刺激收缩期及舒张期早期蛙心室肌的期外收缩及代偿间歇代偿间隙期外收缩图二、刺激舒张期中期蛙心室肌的期外收缩及代偿间歇图三、刺激舒张期后期蛙心室肌的期外收缩及代偿间歇7（1）蛙类斯氏离体心脏灌流图四、正常的蛙心搏曲线图五、5%NaCl2对蛙离体心脏活动的影响图六、肾上腺素对蛙离体心脏活动的影响7图七、2%CaCl2对蛙离体心脏活动的影响图八、1%KCl对蛙离体心脏活动的影响四、分析讨论：(1)关于蛙心搏过程的分析:①斯氏第一次结扎：

7、实验过程中观察到房室沟结扎后，静脉窦的收缩基本不变，心室先停止收缩，隔一段时间之后又恢复收缩，但收缩的频率比原来为慢。其主要原因是从静脉窦传导至心房、心室的电信号被阻断，分离了静脉窦与心房、心室之间的传递。心脏的自律性完全靠静脉窦来提供，如果截断静脉窦与心脏之间的传递，因为静脉窦对异位起博点有超速抑制作用，所以心脏会停止跳动一段时间。而后房室交界处开始搏动，因为房室交界的自动频率与比静脉窦的频率慢，所以心房、心室的跳动减慢。由于心房节律高于心室，因此心室的节律服从于心房的节律。②斯氏第二次结扎：实验过程中观

8、察到斯氏第二次结扎后，静脉窦的收缩基本不变，心室先停止收缩，隔一段时间之后又恢复收缩，但收缩的频率极慢7。而心房的收缩节律与第一结扎基本相同。其主要原因是斯氏第二次结扎是阻断房室交界处，截断了心房与心室之间的传递，那心室的搏动则由浦肯野纤维进行异位起博。因为静脉窦对异位起博点有超速抑制作用，所以心房、心室会停止跳动一段时间。当浦肯野纤维开始搏动，由于它的搏动频率比房室交界更慢，所以心室的跳动会更加缓慢。所以实验出