骨外科学专业优秀论文 纳米羟基磷灰石海藻酸钙胶原复合物骨修复材料的生物相容性及动物实验研究

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1、【精品】毕业论文优秀毕业论文本科论文专业学术论文参考文献资料骨外科学专业优秀论文纳米羟基磷灰石海藻酸钙胶原复合物骨修复材料的生物相容性及动物实验研究关键词：纳米羟基磷灰石海藻酸钙骨髓干细胞生物相容性生物材料动物实验骨缺损修复摘要：各种因素所致的骨缺损修复是临床上的难题之一。传统的修复方法包括自体骨移植和同种异体骨移植，但这两种方法均存在一定的缺陷。自体骨组织材料来源有限，供骨的形状和结构与植骨区难相配匹，且有增大手术创伤和并发症的风险，使用受到一定限制。同种异体骨移植有不可避免的免疫排斥反应，同时也存在个体差异、骨

2、源受限、传播疾病等问题。随着医学（尤其是组织工程科学）的发展，组织工程骨在修复骨缺损方面起着重要的作用。传统组织工程骨一般需在体外预制成型，经手术植入体内，往往带来额外创伤和并发症。随着外科微创化的发展，对可注射可塑性人工骨修复材料的研究日益受到人们的重视。本课题将海藻酸钙、纳米羟基磷灰石及胶原按一定比例复合，制成一种可注射、可任意塑形并且具有良好骨传导、骨诱导性的复合骨修复材料。前期的实验证明该复合材料具有良好的理学性能，能满足临床用骨的要求；但是，骨修复材料仅仅能满足临床应用时所需的理化性能是不够，还需有良好的

3、生物相容性及骨修复能力，确保其临床应用的安全性和有效性。本研究通过海藻酸钙纳米羟基磷灰石胶原复合物与兔骨髓间充质干细胞共培养实验和海藻酸钙纳米羟基磷灰石胶原复合物修复兔桡骨缺损实验，来了解其生物相容性及骨修复能力。第一部分纳米羟基磷灰石海藻酸钙胶原复合物材料与兔骨髓基质细胞的体外生物相容性的研究。目的：检验纳米相羟基磷灰石海藻酸钙胶原复合材料（nano-Hydroxyapatite/Collagen/CalciumAlginate，n-HACCA）与兔骨髓基质干细胞（BMSCs）的相容性。材料及方法：（一）材料2周

4、龄健康新西兰大白兔，DMEM/F12、D-Hank's，胰蛋白酶，胎牛血清，双抗，山羊抗小鼠-Cy3，山羊抗小鼠-FITC，CCK-8试剂盒，CO2培养箱，荧光显微镜，流式细胞仪，扫描电镜，WellScanMK22型酶标仪。纳米羟基磷灰石海藻酸钙胶原复合材料。（二）采用从兔骨髓提取骨髓间充质干细胞进行原代培养及传代培养，通过大体观察及流式细胞仪检测来鉴定所培养的细胞。（三）通过倒置显微镜、电镜扫描来观察细胞在n-HACCA材料上的生长情况，并且通过CCK-8试剂盒来比较A组（对照组，纯细胞培养）与B

5、组（实验组，n-HACCA材料与细胞共培养）细胞的生长情况。结果：（一）兔骨髓间充质干细胞（BMSCs）的培养与鉴定1．原代培养的BMSCs细胞48h内大部分贴壁，细胞呈形态较一致的短梭形、多边形，5～7d时可见明显集落形成，增殖速度快，2周左右细胞互相融合，细胞呈成纤维细胞样，排列呈螺旋状、鱼群状或漩涡状。传代培养的BMSCs贴壁很快（12h内大多数细胞已贴壁），呈长梭形，形态更加均匀，生长旺盛，7d左右即可达到90％融合，10d左右生长逐渐缓慢。2．BMSCs表面抗原：发现在绝大多数细胞中，骨髓基质细胞特征标志

6、的CD29和CD44阳性，而作为造血干细胞特征标志的CD34和CD45阴性，提示BMSCs经上述方法分离传代至第5代时，已经基本纯化。具体结果：CD29阳性率为99．62％，CD44阳性率为94．28％；CD34阴性率为99．80％，CD45阴性率为99．57％。【精品】毕业论文优秀毕业论文本科论文专业学术论文参考文献资料骨外科学专业优秀论文纳米羟基磷灰石海藻酸钙胶原复合物骨修复材料的生物相容性及动物实验研究关键词：纳米羟基磷灰石海藻酸钙骨髓干细胞生物相容性生物材料动物实验骨缺损修复摘要：各种因素所致的骨缺损修复是

7、临床上的难题之一。传统的修复方法包括自体骨移植和同种异体骨移植，但这两种方法均存在一定的缺陷。自体骨组织材料来源有限，供骨的形状和结构与植骨区难相配匹，且有增大手术创伤和并发症的风险，使用受到一定限制。同种异体骨移植有不可避免的免疫排斥反应，同时也存在个体差异、骨源受限、传播疾病等问题。随着医学（尤其是组织工程科学）的发展，组织工程骨在修复骨缺损方面起着重要的作用。传统组织工程骨一般需在体外预制成型，经手术植入体内，往往带来额外创伤和并发症。随着外科微创化的发展，对可注射可塑性人工骨修复材料的研究日益受到人们的重视

8、。本课题将海藻酸钙、纳米羟基磷灰石及胶原按一定比例复合，制成一种可注射、可任意塑形并且具有良好骨传导、骨诱导性的复合骨修复材料。前期的实验证明该复合材料具有良好的理学性能，能满足临床用骨的要求；但是，骨修复材料仅仅能满足临床应用时所需的理化性能是不够，还需有良好的生物相容性及骨修复能力，确保其临床应用的安全性和有效性。本研究通过海藻酸钙纳米羟基磷灰石胶原复合