全自动发酵罐枯草芽孢杆菌产淀粉酶实验报告

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1、20L全自动发酵罐枯草芽孢杆菌产淀粉酶实验实验时间：2012年6月17日—2012年6月28日学生姓名：xxxxxx学号：院系：生命学院专业：生物技术指导教师：2012年6月30日第25页目录一.实验目的要求……………………………………………4二、实验试剂和仪器…………………………………………41、种子培养基：57＃培养基………………………………52、发酵培养基………………………………………………53、发酵过程中相关参数的测定………………………………6三、实验步骤与方法………………………………………61、了解发酵罐系统的结构……………

2、……………………62、种子培养…………………………………………………63、发酵罐空消………………………………………………64.PH电极与DO电极的首次校正………………………………85、发酵培养基的配置………………………………………95.1培养基摇瓶试验………………………………………95.2种子的摇瓶…………………………………………96.装料……………………………………………………107、实消…………………………………………………108.PH电极与DO电极的再次校正………………………………109、接种………………………………………………

3、…1110、设定发酵参数，运行发酵指令……………………………1111、发酵过程中相关参数的记录………………………………1112、发酵过程中取样及相关参数的测定…………………………12（1）参数测定所需的溶液的配置………………………………12第25页（2）取样…………………………………………………13（3）样品处理………………………………………………13（4）残糖含量测定（DNS法）………………………………13（5）生物量的测定（比浊法）………………………………14（6）淀粉酶发酵活力的测定…………………………………14（7）葡萄糖标准

4、曲线的制作…………………………………15（8）麦芽糖标准曲线的制作…………………………………1513.放料,清洗罐体，空消，保养………………………………16四、实验结果与讨论………………………………………17五.实验心得体会…………………………………………26第25页一、实验目的要求：1.掌握机械搅拌通风发酵罐的基本结构(1)发酵罐主体(2)蒸汽灭菌系统：正确把握各阀门的操作(3)通气系统(4)加热冷却循环系统：各管道联络关系(5)搅拌动力系统(6)智能控制系统2.掌握发酵罐小试的基本操作，包括：培养基配制，灭菌，接种，参数设定3.掌

5、握发酵过程中的参数测定和在线控制，包括：pH，DO，温度，搅拌速度，生物量，残糖含量，产物生成量，消泡，CO2。4.运用所学发酵工程基本理论分析发酵过程中的实验数据，讨论某一特定菌株的发酵规律。二、实验试剂和仪器1、种子培养基：57＃培养基试剂及药品：麸皮50g豆饼粉（牛肉浸膏/粉）30gNaCl2g蒸馏水、斜面培养的枯草芽孢杆菌第25页器材：1000ml烧杯、玻璃棒、100ml锥形瓶（20个）、天平、粉碎机、电热炉、高压灭菌锅、灭菌枪头、1000移液枪、酒精灯、75%酒精、棉球、无菌操作台、封口膜、橡皮筋、恒温摇床、1000ml锥形

6、瓶、标签纸2、发酵培养基：试剂及药品：麸皮（3％）320g12水磷酸氢二钠（0.2％）70.55g硝酸钾（0.2％）28g消泡剂（植物油）（0.3％）42g蒸馏水器材：1000ml烧杯、玻璃棒、75%酒精、棉花、一次性口罩、打火机、厚手套、天平3、发酵过程中相关参数的测定的药品、仪器：试剂及药品：无水葡萄糖0.1gNaOH4g3水乙酸钠0.6804g淀粉1g乙酸、蒸馏水、DNS、PH标准缓冲液、亚硫酸钠器材：10mL具塞刻度试管（30个）、100ml容量瓶（2个）、200ml容量瓶（2个）、100ml烧杯、100ml试剂瓶（4个）、1

7、00ml锥形瓶（2个）、玻璃棒、1000ml烧杯、标签纸、电热炉、木夹、试管架、PH标准试纸、PH计、枪头、1000移液枪、恒温水浴锅、分光光度计、电子天平、烘箱、冰箱、上海高机SY-3000发酵系统第25页三、实验步骤与方法1、了解发酵罐系统的结构（1）．罐体（2）．发酵罐的搅拌系统（3）．空气供给系统（4）．温度控制系统（5）．pH控制系统（6）．过程变量的测量（7）．灭菌系统（8）测量及控制系统：下位机、上位机、网络通讯2、种子培养（1）称取麸皮50g、豆饼粉（牛肉浸膏/粉）30g（用粉碎机搅碎为粉末）,上述成分混合于1000m

8、l烧杯中，加NaCl2g、蒸馏水1.0L置于电热炉上煮沸1小时，将pH自然，待温度下降后分装入20个100ml锥形瓶中，每瓶30ml。将装有培养基的锥形瓶与备好的枪头、玻璃棒一起放入高温灭菌锅灭菌2小时后取出待用。（2）