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时间:2018-08-03
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1、东湖水样PH的测定一、实验目的1.掌握用PH计测定溶液PH的操作。2.检测东湖湖水样的酸碱度二、实验原理直接电位法测定溶液PH常需组成以下原电池:Ag▕AgCl(S),内标液▕玻璃膜▕试液┆┆KCl(饱和),Hg2Cl2(S)▕Hg(+)原电池的电动势与溶液pH呈线性关系,斜率为2.303RT/F,指溶液pH变化一个单位,电池的电动势变化2.303RT/F(V)。为了直接读出溶液的pH,pH计上相邻两个读数间隔相当于2.303RT/F(V)的电位,此值随温度的改变而变化,因此pH计上都设有温度调节纽来调节温度。K¢既不能准确测定,又不易由理论计算求得。在实际工作中,常
2、采用“两次测量法”进行测定,首先用标准缓冲液校准pH,叫“定位”。三、仪器和试剂仪器:pHS-3C数显pH计试剂:标准缓冲溶液,待测湖水四、实验步骤1.打开仪器预热,检查并安装甘汞电极和pH玻璃电极,搭建实验装置,清洗电极并用滤纸吸干,待仪器稳定后即可进行测定。2.把功能钮按到“pH”档,调节“温度”钮至当时溶液的温度,把斜率调节旋钮调到100%位置。3.把清洗过的电极插入pH为6.86的标准缓冲溶液中,振摇均匀,调节“定位”钮,使仪器显示读数与该缓冲溶液当时温度下的pH一致。4.用蒸馏水清洗电极,再插入pH=4.00的标准缓冲液中,调节斜率旋钮是仪器显示读数与该缓冲
3、溶液当时温度下的pH一致。5.重复3、4直至不用再调节定位或斜率两调节旋钮为止。6.校正完毕后,用蒸馏水清洗电极并擦干,插入待测湖水中,此时屏幕显示的数值即为待测液的pH。平行测定三次。五、实验数据及结果处理样品ⅠⅡⅢPH值7.847.837.83PH平均值7.83偏差0.0100相对平均偏差1‰乙酰甲胺磷的测定(HPLC法)一、实验原理液-液色谱是根据物质在固定相和流动相中的相对溶解度不同从而进行分离的,因而溶质在两相间同时分配达到平衡时:K=Cs/Cm式中: K――分配系数 Cs――溶质在固定相中的浓度 Cm――溶质在流动相中的浓度K大的组分,它的保留
4、时间就长。定量方法:色谱测定的定量方法有归一化法、内标法及外标法。本实验采用外标法。外标法的标准物与待测物是同一化合物,先用纯化合物配置成已知浓度的标样,在相同的色谱条件下,当进样量一定时,物质的浓度与相应峰面积呈线性关系:ci=Aicis/Ais式中 ci——样品中组分i的浓度; cis——标样中组分i的浓度; Ai――样品中组分i的峰面积; Ais――标样中组分i的峰面积。二、主要仪器及试剂1.仪器 Agilent1100HPLC(四元泵),UV检测器,C18柱,移液管(2mL),小试管(5mL),吸耳球。2.色谱分离条件流动相:乙腈:水=4
5、:96(v/v);流速:1mL/min柱温:室温进样量:10μL3.试剂 乙腈(色谱纯),水(新蒸二次蒸馏水),乙酰甲胺磷标样:99.6%三、实验步骤1、试样预处理取250mL水样,用50mLCH2Cl2在分液漏斗中分两次萃取,收集下层液体于250mL锥形瓶中,加入适量的MgCl2粉末干燥,静置过滤,将萃取液60°C下加热处理,待CH2Cl2挥发完后,加入配制好的乙腈:水=1:9的溶液,将剩余油状物溶解加热即为待测溶液;2、进样检测。准确吸取待测溶液10μL,注入进样器,等待工作站的绿色Ready灯亮时,便可以把进样器由Load旋转到Inject状态,进行检测分析。
6、四、实验结果处理标样/试样时间峰面积峰高峰宽对称因子峰面积%标样Ⅰ1.54285.78.70.14090.6233.237标样Ⅱ1.8849.81.70.08040.8970.370标样Ⅲ2.12664.79.80.08870.4142.444标样Ⅳ2.6282487780.41730.20493.949试样Ⅰ1.42616594.8142.21.39020.62899.716试样Ⅱ3.66347.22.20.26781.2330.284双击Instrument1Offline图标,进入离线工作站软件。在离线状态下,建立二级校正表,用外标法对待测乙酰甲胺磷进行定量和定
7、性分析,给出结论。查阅资料得:1一乙酰胺的峰,保留时间3.150;2一甲胺磷的峰,保留时间4.832;3一乙酰甲胺磷的峰,保留时间6.125试验结果:在对应乙酰甲胺磷保留时间内未出现吸收峰,水样中没有乙酰甲胺磷存在。叶绿素含量的测定一、实验原理叶绿素浮游植物细胞叶绿体中,经过充分研磨可使叶绿素游离出来,游离的叶绿素很不稳定,见光受热易分解,故本实验应在较短的时间(一般不超过12小时)内完成。叶绿素易溶于乙醇、乙醚和丙酮等有机溶剂。本实验采用丙酮作为提取剂,离心后,利用分光光度法测量叶绿素含量。测量不同波长下的吸光度然后代入公式计算出叶绿素含量。二、实
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