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时间:2018-08-03
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1、CDC实验【实验原理】:细胞表面抗原与相应抗体特异结合所形成的免疫复合物,通过经典途径激活补体而导致细胞膜穿孔。因此水溶性染料如台盼蓝进入受损细胞,染成蓝色,为阳性反应;不带相应抗原的细胞。未受伤,不染色,为阴性反应。【实验结果】:①CDC阳性阴性如下表所示:分组第①组第②组第③组第④组结果+--- ②.第①组结果图如下图示: (CDC实验阳性结果图)
2、 【实验分析】:①.第①组成阳性的原因:实验中加入抗原、抗体、补体、LC。抗原抗体能形成抗原抗体免疫复合物,
3、通过经典途径激活补体,形成攻膜复合物,从而导致细胞膜穿孔,细胞受损,台盼蓝进入细胞,染成蓝色,呈阳性反应。说明CDC实验必须要有抗原、抗体、补体共同参与。②.第②组成阴性的原因:实验中加入抗体、LC。因为无抗原和补体,不能形成抗原抗体免疫复合物,也无补体,因此不能形成攻膜复合物,不能使细胞膜穿孔,细胞无损伤,台盼蓝无法进入细胞,不能被染成蓝色,呈阴性反应。说明CDC实验必须要有补体的参与。 ③.第③组呈阴性的原因:试验中加入LC和补体,因为无抗原抗体,所以没有抗原抗体免疫复合物的形成,补体不能被激活,不能形成攻膜复合物,细胞无受损,台盼蓝不能进入而
4、不被染色,呈阴性反应。说明CDC实验必须要有抗原、抗体的参与。④.第④组呈阴性的原因:实验中只加入LC,既无抗原抗体免疫复合物的形成,也无补体,细胞无受损,台盼蓝不能进入而不被染色,呈阴性反应。说明CDC实验必须要有抗原、抗体、补体的共同参与。E玫瑰花环试验【实验原理】:人T细胞膜上具有能与绵羊红细胞(SRBC)上LFA-3(淋巴细胞功能相关抗原-3)结合的受体(E受体,即CD2)。SRBC与T细胞结合,形成以T细胞为中心,四周环绕SRBC,形状如玫瑰花环细胞集团,故称E花环试验。CD2分子是粘附分子,与LFA-3结合可增强细胞间的粘附作用;此外,CD2分子还能活化T细胞。
5、本实验采用E花环实验测验人T细胞表面的CD2分子。【实验结果】: 如下图所示: (E花环实验结果图) 【讨论分析】:①.有的细胞能形成玫瑰花环的原因:人T细胞膜上具有CD2分子,能够与SRBC上的LFA-3结合,从而形成以人T细胞为中心,SRBC环绕四周,形状如玫瑰花环的细胞集团,即E玫瑰花环。此外,NK细胞膜上也有CD2分子,也能形成玫瑰花环,但是NK细胞的量非常少,形成玫瑰花环的数量也少。 ②.有的细胞不能形成玫瑰花环的原因:a.人血液中含有单核巨噬细胞,其表面没有CD2
6、分子,不能与SRBC表面的LFA-3结合,因此不能形成玫瑰花环。b.实验中所用血液不够新鲜,也可能导致不能够形成玫瑰花环。c.时间不够长,导致T细胞表面的CD2分子不能够与SRBC上的LFA-3充分结合,因此只有一部分SRBC与人T细胞结合,其余SRBC没能够与人T细胞结合形成玫瑰花环。
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