心衰1号方、心衰2号方对慢性心衰模型大鼠的干预作用

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1、心衰1号方、心衰2号方对慢性心衰模型大鼠的干预作用作者：周文斌，王大伟，陈力，尹克春，严夏【摘要】【目的】观察心衰1号方、心衰2号方对慢性充血性心力衰竭(CHF)模型大鼠的影响。【方法】选用SD大鼠，随机分为假手术组、模型组、心衰1号方组、心衰2号方组，后3组大鼠采用腹主动脉缩窄及冰柜冷冻法复制阳虚心衰复合模型。造模成功后，后2组大鼠按324g·kg-1·d-1剂量灌胃给药，连续4周。采用酶联免疫吸附法检测血清脑钠肽(BNP)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、白介素6(IL6)含量，并行心肌组织病理学检查。【结果】模型组大鼠血清BN

2、P、AngⅡ、IL6含量均显著升高(P<005或P<001)，心肌组织出现明显的病理改变;心衰1号方组、心衰2号方组血清BNP、AngⅡ、IL6含量均显著降低，与模型组比较差异有显著性意义(P<005或P<001)，心肌细胞断裂、变性明显改善，炎症细胞浸润减少，间质出血明显减少，心肌细胞呈修复性改变，且心衰1号方组作用优于心衰2号方组。【结论】心衰1号方、心衰2号方治疗CHF的作用与其能调控模型大鼠的神经内分泌和炎症因子水平及改善心肌结构有关，且治疗阳虚型CHF温阳活血法作用优于行气活血法。【关

3、键词】充血性心力衰竭，慢性/中药疗法;心衰1号方/药理学;心衰2号方/药理学;心肌/病理学;　疾病模型，动物;大鼠10　慢性充血性心力衰竭(congestiveheartfailure，CHF)是临床上常见的危重病症，以神经内分泌激活和外周血流分布异常为特征，是心脏疾患的最终结局及主要死因。全国名老中医颜德馨教授在临床上运用自拟心衰1号方[1]、心衰2号方[2]治疗心衰，临床效果满意，本实验通过复制慢性心衰大鼠模型，观察心衰1号方、心衰2号方对大鼠死亡率、血清脑钠肽(brainnatriureticpeptide，BNP)、血管紧

4、张素Ⅱ(AngⅡ)、白介素6(IL6)及心肌病理形态学的影响，比较温阳活血法与行气活血法治疗CHF的差异，并探讨其作用机制。现将结果报道如下。　　1材料与方法　　11动物SpragueDawley(SD)大鼠，SPF级，体质量200～250g，雌雄各半，3～4周龄，共36只，购于广州中医药大学实验动物中心，合格证号：0019429。　　12主要试剂与与仪器BNP、AngⅡ、IL6酶联免疫试剂盒均由USCNLIFESCIENCE&TECHNOLOGY公司提供。ADVIACentaur全自动化学发光免疫分析仪(Bay

5、er公司)，VECTORX5多功能免疫分析仪(PE公司)，E600生物显微镜(日本Nikon公司)。10　　13药物心衰1号方组成：炙麻黄16%，熟附子16%，细辛10%，蒲黄16%，丹参26%，葛根16%;心衰2号方组成：桃仁7%，红花7%，当归7%，生地黄10%，川芎7%，赤芍7%，牛膝7%，桔梗5%，柴胡5%，枳壳7%，黄芪25%，降香4%，甘草2%。以上为100g药中所含的质量比例，采用中药免煎颗粒配制，药物由江阴天江药业有限公司提供，生产批号：0611132。按处方比例称取纯药后，加入蒸馏水，配成浓度为1g/mL的药

6、液。　　14模型复制随机取26只SD大鼠，雌雄各半，参考文献[3-4]造模方法改良，首先采用腹主动脉缩窄法复制CHF模型：100mg/L水合氯醛按35mL/kg腹腔注射麻醉，于剑突下腹正中切口，分层打开腹腔，在肾动脉分支以上钝性游离腹主动脉，将8号注射器针头平行置于腹主动脉上，用4号手术丝线将腹主动脉和注射器一同结扎，使大鼠腹主动脉直径缩窄为08mm，然后缓慢将注射器撤出，关腹，分层缝合。术后给予青霉素4×105U/只腹腔注射3d，预防感染。正常喂养1周后进行阳虚造模，将大鼠每天置于-2℃～-4℃冰柜中2h，持续4周，即可完

7、成阳虚心衰的模型复制。其中有2只大鼠造模失败。另设假手术组10只，100mg/L水合氯醛按35mL/kg腹腔注射麻醉，于剑突下腹正中切口，分层打开腹腔，再分层缝合。　　1105分组及给药将造模成功的34只大鼠分为4组：假手术组(10只)、模型组(8只)、心衰1号方组(8只)、心衰2号方组(8只)，后2组大鼠于成功完成动物模型复制后，分别给予心衰1号方、心衰2号方灌胃治疗，共4周。具体给药剂量根据“人和动物体表面积折算的等效剂量比率表”[5]计算，确定为324g·kg-1·d-1。　　16标本采集与检测于各组大鼠心脏穿刺抽血

8、约5mL，用高速离心机离心，取血清约1～2mL，-20℃保存，采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清BNP、AngⅡ、IL6含量。将各组大鼠处死后，立即在左室冠状面中部切取环状心肌组织块，用40g/L多聚甲醛固定，常规石蜡包埋切片，苏木素—伊红