应用正交设计法筛选天麻钩藤饮优化处方研究

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1、应用正交设计法筛选天麻钩藤饮优化处方研究作者：杨清华孙博郭艳艳方显明【摘要】目的：筛选中药复方天麻钩藤饮的优化处方，分析探讨其最佳配伍关系和配伍剂量。方法：SD大鼠采用钳夹左肾动脉加灌服附子汤制备大鼠高血压肝阳上亢证模型，根据中医理论并通过正交设计选择两个天麻钩藤饮正交组方，与原方、卡托普利进行降压作用对照研究，筛选出天麻钩藤饮优化处方，再应用正交设计观察优化处方不同配伍剂量的降压效果，找出最佳剂量配比。结果：天麻钩藤饮及其优化处方均有明显的降压作用(P<0.05)。结论：天麻钩藤饮及其优化处方均有明显的降压作用，天麻钩藤饮优化处方的最佳配伍剂量为天麻6g、钩藤15g、石决明18

2、g、桑寄生9g、川牛膝9g。【关键词】高血压肝阳上亢证大鼠天麻钩藤饮正交试验7天麻钩藤饮出自清代胡光慈《杂病证治新义》一书，是具有平肝潜阳功效的经典古方，临床应用证实该方对高血压病肝阳上亢证患者血压明显改善。但其原方共有11味中药，并且每味中药没有剂量记载，多数临床及动物实验都是按照各自临床经验进行，没有统一标准，使实验难以重复。笔者采用正交试验设计法，以高血压肝阳上亢证大鼠血压为评价指标，对天麻钩藤饮进行优化处方及寻找其最佳剂量配比，并探索其配伍规律，现报道如下。　　1天麻钩藤饮优化处方筛选　　1.1优化处方筛选方案天麻钩藤饮由11味中药组成，将每一味中药作为一个因素，每个因素设“有

3、”和“无”两个水平(即有此药和无此药)，选择L12(211)正交表设计配方，共得12个配方。根据中医理论结合笔者临床经验，选取天麻钩藤饮正交1方、正交2方与天麻钩藤饮原方进行降压作用比较研究。　　1.2实验动物清洁级SD大鼠90只，雌雄各半，体质重180～220g，湖南长沙市开福区东创实验动物技术服务部提供。动物许可证号：scxk(湘)20060001。　　1.3药物制备7附子汤(造模用)，制附子20g，煎煮90min，浓缩至200ml(含生药0.10g/ml);天麻钩藤饮原方:天麻10g，钩藤15g(后下)，石决明20g(先煎)，山栀、黄芩各6g，川牛膝10g，杜仲、益母草、夜交藤

4、、茯苓各12g，桑寄生9g，水煎取200ml(含生药0.67g/ml);天麻钩藤饮正交1方：天麻10g，钩藤15g(后下)，石决明20g(先煎)，川牛膝10g，桑寄生9g，水煎取200ml(含生药0.36g/ml);天麻钩藤饮正交2方：天麻10g，钩藤15g(后下)，杜仲12g，山栀、黄芩各6g，水煎取200ml(含生药0.25g/ml)。以上药材均由南宁市一心药业有限公司提供。卡多普利(江苏常州制药厂生产)，磨粉后双蒸水溶解配制成200ml(0.16mg/ml)。　　1.4仪器ALCNIBP无创尾动脉血压测定仪(上海奥尔科特生物科技有限公司)　　1.5肝阳上亢证高血压模型按文献方法

5、[1,2]，采用钳夹左肾动脉加灌服附子汤制作大鼠肝阳上亢证高血压模型。钳夹左肾动脉以血管结扎后有血液回流，并结合顾德官等[3]报道的标准及国外较多采用的血压标准[4]：手术后凡血压比术前增高20mmHg(大于正常血压3个标准差值)且高于150mmHg者确定为高血压大鼠模型成功。术后2周加灌服附子汤4周，制备肝阳上亢证高血压大鼠模型。根据形为学改变，包括外观毛色光泽度降低、双眼结膜颜色加深变红、性情易激惹、饮水量增加及旋转时间缩短等，确定为模型成功。造模时间共6周。　　1.6分组与给药将90只大鼠，随机分为六组，每组15只。正常组给予蒸馏水灌胃8周;其余五组造模后，模型组给予蒸馏水灌胃;

6、卡多普利组按3.31mg/(kg·d)，给予卡多普利溶液灌胃;天麻钩藤饮组按13.4g/(kg·d)，给予天麻钩藤饮溶液灌胃;天麻钩藤饮正交1方组按7.2g/(kg·d)，给予天麻钩藤饮正交1方溶液灌胃;天麻钩藤饮正交2方按5g/(kg·7d)，给予天麻钩藤饮正交2方溶液灌胃。以上剂量均按动物体表面积系数折算，相当60kg成人临床剂量的5.36倍。灌胃容量均为每次20ml/(kg·d)，从第7周开始每天上午8时给药，1天1次，连续给药2周。分笼饲养，正常饮食，自由饮水。　　1.7实验结果与模型组比较，第8周末各用药组血压均有降低(P<0.05);与卡托普利组比较，天麻钩藤饮组及天

7、麻钩藤饮正交2方降压疗效不及卡托普利(P<0.05);天麻钩藤饮正交1方降压疗效与西药卡托普利相当(P>0.05)，见表1。表1各组大鼠血压动态变化比较与造模前比较，*P<0.05;与第2周末比较，△P<0.05;与第6周末比较，▲P<0.05;与模型组比较，#P<0.05，##P<0.01;与卡托普利组比较，◇P<0.052天麻钩藤饮优化处方最佳剂量筛选　　2.1优化处方不同剂量配比方案根据以上