应用金标法检测抗

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1、应用金标法检测抗【关键词】丙型肝炎病毒；金标法；酶联免疫法；假阴性；假阳性　　［摘要］目的：对金标法快速检测抗HCV的假阴性和假阳性原因进行分析。方法：以酶联免疫法(ELISA)为标准，与胶体金法进行比较及倍比稀释试验。结果：检测我院门诊患者13400例,ELISA法阳性320例，阳性率2.4％；胶体金法阳性330例，阳性率2.5％；金标法假阴性率6.2％，假阳性率为0.2％。结论：胶体金法检测抗HCV，具有操作简便，观察直观、快速、省时的特点，但有一定的假阴性和假阳性率，其原因可能由人为因素及环境因素以及本身试剂原因造成的，但金标法可为筛查健康人员丙型肝炎病毒

2、抗体的重要手段，对丙型肝炎的早期发现，预防及控制有重要价值和意义。　　［关键词］丙型肝炎病毒；金标法；酶联免疫法；假阴性；假阳性5　　丙型肝炎病毒(HCV)是世界范围内引起慢性肝脏疾病的主要病原，我国平均感染率为3.2%［1］，由于HCV感染后极易慢性化，大约75％以上的感染者将演变为慢性感染，并可引起肝硬化、肝癌等终末期肝病［1］，目前尚无有效的疫苗预防HCV感染及特效的治疗药物，因此，对健康人群进行筛选及早期临床诊断是有效控制丙型肝炎发生的重要手段。金标法快速检测技术是近年来发展起来的一种新技术［3］，1989年金标法诞生至今，已广泛应用于免疫检测各个领域。

3、金标法虽具有快速、简便、标本用量少、可用全血测定、不需仪器设备等优点，但金标法与ELISA检测结果存在不相符现象，据统计不符合率在1％左右。应用金标法和酶联免疫法(ELISA)同时检测我院(2004年1月至2006年1月)13400例门诊就诊患者，统计有关数据结果，分析金标法测定的假阳性及假阴性情况如下。　　1材料与方法　　1.1材料　　1.1.1酶标仪芬兰Thermo公司MULTISKANMK3V；洗板机：芬兰Thermo公司WELLWASH4MK2。　　1.1.2试剂抗HCVELISA试剂由上海荣盛公司、3V公司提供。抗HCV金标试纸条由新创公司、艾康生物技

4、术公司提供。所有试剂均在有效期内使用。定值HCV血清由卫生部临检中心提供。　　1.1.3标本我院2004年1月至2006年1月门诊就诊患者13400例。5　　1.2方法常规经脉采血，采用金标抗HCV快速试纸条对就诊患者初筛。采集后的血液再用初、复检抗HCVELISA试剂(两个厂家)进行检测。结果判断ELISA法比色采用双波长450nm/630nm(参考波长为630nm)，s/co值≥1者为阳性．金标试纸条在检测线和对照线位置处各出现一条紫红色线条为阳性，未出现紫红色线条为阴性，未出现紫红色线未金标试纸条失效，以ELISA法结果为标准对金标法进行对照,ELISA法

5、两种试剂检测结果均为阳性的按阳性统计。对20例初、复检抗HCV都为阳性，而一种金标法试纸检测均为阴性的标本进行分析，寻找假阴性原因。用两个厂家的金标试纸检测20例假阴性标本，分析不同厂家试纸条之间的灵敏度差异。20例假阴性标本分别稀释2倍、10倍、50倍、100倍、200倍、500倍后，用两个厂家的金标抗HCV试纸检测，分析是否存在“前带”现象。对两个厂家的金标试纸条进行灵敏度检测，并与ELISA法比较。　　2结果与讨论　　2.1统计13400例患者的抗HCV检测结果见表1。　　表113400例患者的抗HCV检测结果（略）　　统计20例假阴性标本ELISA法检测

6、结果，显示S/CO均值为3.56(1.16～12.9)。对以上20例假阴性标5本用两个厂家的金标抗HCV试纸检测，一种为18例阴性，2例弱阳性；一种为15例阴性，4例弱阳性，1例阳性。表明不同厂家抗HCV试纸的灵敏度存在差异。对20例假阴性标本进行了2倍、10倍、50倍、100倍、200倍、500倍稀释，再分别用两个厂家的金标抗HCV试纸测定，一种为18例阴性，2例弱阳性(2倍、10倍稀释)，高倍稀释均为阴性；一种为15例阴性，5例弱阳性(2倍、10倍稀释)，高倍稀释均为阴性。表明这些标本不存在“前带”现象。应用两个厂家金标试纸分别对1ng/ml抗HCV定值血清

7、检测5次，有1个厂家抗HCV试纸检测结果为阴性；反映不同试纸之间的灵敏度存在差异；两个厂家试纸分别测定0.5ng/ml抗HCV定值血清，结果均为阴性；ELISA法检测1ng/ml和0.5ng/ml抗HCV定值血清结果均为阳性(S/CO＞1)，表明金标法灵敏度明显低于ELISA法。因此，从目前抗HCV试纸的灵敏度看，抗HCV试纸只能作为初筛试剂，初检、复检试剂采用ELISA法，以防止HCV漏检的发生，保证临床诊断和避免丙型肝炎传播的发生。金标抗HCV快检的假阴性也可能由人为因素及环境因素造成［4］：如判断结果时间不够、反应不充分、气温低(克服方法是冬天注意保温或延

8、长反应时间)；加血量不足