三七虫草混合粉抗小鼠乳腺肿瘤及其新生血管效应研究

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1、三七虫草混合粉抗小鼠乳腺肿瘤及其新生血管效应研究作者:张燕明,李晓明,陈信义,徐力【摘要】目的观察三七虫草混合粉抗移植性小鼠乳腺肿瘤(EMT6)及其新生血管形成效应。方法应用小鼠可移植性EMT6细胞株,经培养传代后,以纯系BALB/C小鼠为荷瘤动物进行移植,并以三七虫草混合粉进行干预,在观察肿瘤抑制率基础上,将肿瘤组织以常规石腊包埋、切片,应用免疫组化法观察肿瘤组织微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)、金属蛋白酶组织抑制因子Ⅱ(TIMP-2)表达。结果所设计两个实验剂量组的肿瘤抑制率分别为48.95%、37.64%;实验两组肿瘤组织MVD、VEGF阳性表达明显降低,TIMP-

2、2表达水平明显增加。结论三七虫草混合粉能够抑制小鼠乳腺肿瘤生长,抑制肿瘤新生血管形成可能是其作用机制之一。【关键词】三七虫草混合粉;乳腺肿瘤;肿瘤组织微血管密度;血管内皮生长因子;金属蛋白酶组织抑制因子ⅡAbstract:ObjectiveToobserveinhibitionrateofmousemammaryadenocarcinoma(EMT6)andinhibitioneffectontumorangiogenesisofPanaxnotoginsengF.H.ChenandCordyecpssinensisSacc.powder.MethodsBALB/Cmiceasbearin

3、gcancer10animalswithsubculturedmouse-transplantableEMT6celltrainhadacceptedinterventiontreatmentbyPanaxnotoginsengF.H.ChenandCordycepssinensisSacc.powder.Inthisway,inhibitionrateofthemouse-transplantedEMT6bythepowderwasrecordedandtheexpressionofmicrovesseldensity(MVD),vascularendothelialgrowthfact

4、or(VEGF)andtissueinhibitorofmetalloproteinase-2(TIMP-2)inthetumortissueafterparaffinimbeddingandsectionweredetectedthroughimmunohistochemistrytechnique.ResultsThetumorinhibitionratesoftwodesigneddosegroupswereseparately48.95%and37.64%.MVDandVEGFexpressionsoftumortissueinthetwogroupweresignificantl

5、ysuppressedwhiletheTIMP-2expressionincreased.ConclusionsPanaxnotoginsengF.H.ChenandCordycepssinensisSacc.powdercanrestrainthegrowthofEMT6,andthepathwayofthisfunctionislikelyrelatedtoinhibitingtumorangiogenesis.  Keywords:PanaxnotoginsengF.H.ChenandCordycepssinensisSacc.powder;mousemammaryadenocarc

6、inoma(EMT6);MVD;VEGF;TIMP-2近年来,以三七中主要活性成分“三七总皂苷”制备的“10血塞通”、“血栓通”已在心脑血管疾病的治疗中得到了广泛应用,并显示了较为理想的临床疗效。以冬虫夏草制备的药物“百令胶囊”、“金水宝胶囊”、“至灵胶囊”也已应用于临床,并在免疫性疾病、多种慢性病中发挥着治疗效应。依据上述两味中药主治功能,结合现代研究进展,推测三七虫草混合粉对恶性肿瘤有一定的治疗效果。因此,该项研究是在建立移植性小鼠乳腺肿瘤(EMT6)模型基础上,观察三七虫草混合粉对EMT6生长抑制作用以及对肿瘤血管生成因子的影响,从而为临床应用提供实验参考依据。  1实验材料  1.

7、1动物与细胞系雌性BALB/C小鼠36只,体重(20±2)g,购于上海斯克莱实验动物有限公司[许可证号:SCXK(沪)2003-0003],在南京中医药大学动物中心屏障系统SPF环境下饲养;小鼠乳腺癌细胞系(EMT6)购于第四军医大学实验动物中心。  1.2药物与试剂  三七虫草混合粉为三七精提粉与冬虫夏草精提混合而成,由云南天秀植物科技开发有限公司提供。兔抗人八因子相关抗原(Ⅷ10-RAg)多克隆抗体购自北京中山生物技

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