云芝多糖、维生素e对小鼠ccl4肝损伤保护作用的研究

《云芝多糖、维生素e对小鼠ccl4肝损伤保护作用的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、云芝多糖、维生素E对小鼠CCl4肝损伤保护作用的研究作者：孙设宗唐微张红梅赵杰【摘要】目的观察云芝多糖(CVP)及CVP和VE联合应用对CCl4肝损伤的作用，探讨CVP抗肝损伤的作用机制。方法4月龄昆明种小鼠60只，随机分为正常对照组、造模组、CVP灌胃高低剂量保护组(300、150mg)、CVP和VE保护组(VE250mg+150mgCVP、VE250mg+300mgCVP)，每组10只。用CVP灌胃饲料中加VE，饲养7d，末次灌胃2h，正常对照组腹腔注射调和油溶液，其余各组腹腔注射0.15%CCl4调

2、和油溶液(10ml/kg体重)，24h眼球取血后处死小鼠，取出肝脏称重计算肝体指数后制备肝匀浆;测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)及肝匀浆超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)的含量。结果与模型组比较，CVP可降低肝体指数及血清中ALT和AST的含量(P<0.05，P<0.01);提高SOD活性和GSH的含量(P<0.01)，降低MDA的含量(P<0.001)，与VE联合应用有协同效应。结论CVP可减轻实验性肝损伤所致炎性浸润，提

3、高SOD的活性和GSH的含量，加速自由基的清除，对实验性肝损伤有保护作用，与VE联合应用有协同效应。【关键词】云芝多糖;维生素E;肝损伤;保护作用8云芝多糖(CoriolusversciclorpolysaccharidesCVP)具有多种生物活性，可提高抗氧化酶活性、清除自由基以及对氧化应激有抑制和拮抗作用〔1，2〕;维生素E(VE)是经典的抗氧化物质〔3〕。各种原因的肝损伤与氧化应激密切相关，但CVP对肝损伤保护作用及机制的研究报道较少，CVP、VE联合应用对实验性肝损伤保护作用尚未见报道。本文以CC

4、l4制备肝损伤模型，研究CVP单独应用及CVP和VE联合应用抗实验性肝损伤的作用及机制，为拓展CVP和VE的临床应用提供实验依据。　　1材料和方法　　1.1动物昆明种4月龄雌性小鼠60只，体重32～38g/只，本院动物中心提供。　　1.2药品、试剂与仪器丙二醛(MDA)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)，超氧化物岐化酶(SOD)，谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所，其余为国产分析纯生化试剂。ZS831型内切式组织匀浆机(浙西机械厂)，MDF382E型超低温冰箱(日本

5、Sony公司)，722S型分光光度计(上海第二光学仪器厂)，RA50半自动生化分析仪(美国Technicon公司)。　　1.3给药方法860只小鼠随机分为正常对照组(常规饲料，饮自来水)、病理造模组(常规饲料，饮自来水)、CVP保护组(高、低二组，常规饲料，自由饮水，每天按体重300、150mg/kgCVP灌胃1次)、CVP+VE保护组(每天按体重150、300mg/kgCVP灌胃，同时给予饲料中加VE250mg/kg饲料，自由饮水)，每组10只。饲养7d，末次灌胃2h，正常对照组腹腔注射调和油溶液，其

6、余各组腹腔注射0.15%CCl4调和油溶液(10ml/kg体重)，24h后眼球取血，分离血清，用速率法测ALT、AST。　　1.4检测指标处死小鼠，取出肝脏置冰生理盐水中洗净血液，用滤纸吸去水分称重，计算肝体指数;用pH7.4的PBS按1∶10稀释冰浴下制备肝匀浆，4000r/min离心5min，取上清液用双缩脲法测肝匀浆中蛋白质含量，用PBS稀释成4mg/ml蛋白，按试剂盒要求测MDA、GSH、SOD的含量。取上述各组肝匀浆按文献〔4〕报道方法略作改进，进行体外抗氧化实验，用722S分光光度计检测波长为

7、532nm处的吸光度值，以A532nm反映MDA的含量。计算CVP对MDA产生的抑制率。　　1.5统计学处理用SPSS10.0软件进行方差分析，数据用x±s表示。　　2结果8　　2.1CVP、VE对小鼠CCl4肝损伤模型鼠血清ALT和AST的影响与对照组比较，模型组CCl4肝损伤小鼠血清ALT和AST活性显著升高(P<0.01)，说明制备小鼠损伤模型是成功的。CVP可降低血清ALT活性，与模型组比较无统计学意义;但是CVP可明显的降低小鼠血清中AST的活性(P<0.05);VE和CVP联合应用

8、对膜损伤的保护作用加强，与模型组比较ALT、AST显著降低(P<0.05，P<0.01)。见表1。表1CVP、VE对小鼠CCl4肝损伤模型血清ALT和AST的影响与模型组比较：1)P<0.05，2)P<0.01　　2.2CVP、VE对小鼠CCl4肝损伤模型鼠肝体指数及肝匀浆MDA的影响小鼠CCl4肝损伤模型组肝体指数增大，说明CCl4肝损伤可导致肝细胞肿胀及炎性浸润，CVP保护组可降低肝体指数，与模型组