survivin在宫颈鳞癌中的表达及与 dna倍体关系的研究

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1、Survivin在宫颈鳞癌中的表达及与DNA倍体关系的研究作者：马俊华段祥林汪必成【关键词】宫颈鳞状细胞癌　　摘要:为了研究细胞凋亡抑制基因Survivind在宫颈鳞状细胞癌中的表达及其与肿瘤细胞增殖潜能的关系，探讨两者对肿瘤患者预后的影响，应用免疫组化SP法检测65例颈鳞癌中Survivin的表达，同时用图像分析技术对其DNA含量指数（DI值）进行检测。结果显示，Survivin表达、DI值与宫颈鳞癌的临床分析、分化程度及淋巴结转移均有关（P<0.05或P<0.01）;Survivin的表达与DI呈正

2、相关（P<0.05）。提示高的Survivin的表达率（高的肿瘤细胞凋亡抑制能力）及高的DI值（高的肿瘤细胞增殖能力）常提示宫颈鳞癌的低分化和高转移能力，两者均可以作为肿瘤判断患者预后不良的指标。　　关键词:宫颈鳞状细胞癌;Survivin;DNA含量宫颈鳞状细胞癌是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一，在女性恶性肿瘤中死亡率仅次于乳腺癌，因此寻找评估患者预后的指标在临床肿研究中具有重要意义。本实验对65例原发性宫颈鳞癌的Survivin的表达及DNA含量进行研究，5旨在探讨宫颈鳞癌肿瘤细胞的增殖能力与凋亡的关系

3、，同时探讨其对肿瘤预后的影响。　　1材料和方法　　1.1材料65例宫颈鳞癌标本均来自于武汉大学中南医院病理科近年来送检的手术标本，年龄最小者26岁，最大者84岁，中位年龄56岁。按1985年FIGO临床分期，Ⅰ期27例，Ⅱ期38例;高、中、低分化者分别为21、23、21例;有淋巴结转移者45例，无转移者20例。　　1.2方法标本经10%Formalin固定，常规脱水，石蜡包埋，连续4μm厚切片，分别作HE、免疫组化染色及FeulgenDNA染色。Survivin染色采用SP法。Survivin抗血清及SP试剂盒购于

4、福建迈新生物技术公司，操作步骤按说明书进行。以已知阳性片作阳性对照，以PBS代替一抗作阴性对照。背景清亮、以肿瘤细胞胞浆或/和胞核染棕黄色为阳性染色。DNA倍体分析采用Feulgen染色法。用北京航空航天工业大学CMIBAS图像分析系统对DNA含量进行检测，每例检测约100个癌细胞核积分光密度（ID），同时检测同切片中约30个淋巴细胞ID为正常二倍体对照值，计算每例的DNA含量指数（DI值）。　　1.3统计学处理采用SPSS10.0软件对相关资料进行统计学处理。2结果5　　65例鳞癌中，Survivin阳性表达者4

5、3例，阳性表达率为66.15%。DNA倍体DI值范围为1.58～6.64，均值为3.14±0.67。随着宫颈鳞癌临床分期进展、分化程度的降低及发生淋巴结转移，Survivin的表达逐渐增强（P<0.01），其DI值也逐渐升高（P<0.05或P<0.01），见表1。同时DI值在Survivin阳性表达者中明显高于其阴性表达者（P<0.05），见表2。但两者均与患者年龄无关（P>0.05）。表1宫颈鳞癌Survivin表达及DNA含量（DI值）与临床病理因素的关系注:*高、中分化组与低分化

6、组相比较。表2宫颈鳞癌中Survivin的表达与DNA含量（DI值）的关系3讨论　　Survivin是一个新近克隆的细胞凋亡抑制蛋白（IAP）家族的成员，其选择性的表达于多种恶性肿瘤组织中，癌旁正常组织和成熟组织中几乎不表达。肿瘤细胞凋亡是在众多IAP成员及其它基因调控下的细胞自杀行为，其中Survivin抗凋亡作用是最强的。Survivin的抗凋亡功能具有细胞周期依赖性，在G2/M期表达，通过与细胞有丝分裂中纺锤体的微管结合，参与对细胞基因转录的调节［1］。经研究发现，Survivin与大多数恶性肿瘤发生、发展、

7、肿瘤的预后密切相关［2，3］。本组宫颈鳞癌中Survivin阳性表达率一方面随着癌临床分期的进展、分化程度的降低而明显增高，同时在其有淋巴结转移病例中显著高于无淋巴结转移者，这与大多数文献报道基本一致5［4，5］。提示Survivin的表达状态能较好地反映宫颈鳞癌的转移能力。我们认为，PCNA可以作为宫颈鳞癌患者的预后评估指标之一。肿瘤细胞核DNA含量及倍体变化是反映瘤细胞生长繁殖能力的重要生物学指标，肿瘤的染色体倍性程度与增殖程度呈正相关。高的DNA含是数总是和高的细胞增殖率相关联的。大量的文献资料证明，DNA倍

8、体和DNA含量指数对判断肿瘤的恶性程度、分化、分级及预后的推测均具有重要意义，已成为肿瘤研究的热点之一［6］。本研究65例宫颈鳞癌中的DI值检测的结果发现，DI值范围为1.58～6.64，均值为3.14±0.67，说明宫颈鳞癌中绝大多数癌细胞具有超出正常二倍体DNA含量的异常值。癌细胞DNA含量（DI值）与癌临床分期、分化程度和淋巴结转移均密切相关。我们的研