大鼠局灶性脑缺血脑组织的比较蛋白质组学研究

大鼠局灶性脑缺血脑组织的比较蛋白质组学研究

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1、大鼠局灶性脑缺血脑组织的比较蛋白质组学研究王继生1,邱宗荫**绵阳市科委资助课题(编号:06S042-7)作者简介:王继生(1974~),男,药理学博士,研究方向:新药开发的药理学研究及蛋白质组学,Email:wjs327@sina.com2,夏永鹏2,李惠芝2(1绵阳市第三人民医院绵阳621000;2重庆医科大学药学院重庆400016)[摘要]目的建立局灶性脑缺血模型,从蛋白质整体水平探讨脑缺血/再灌注的保护作用机制。方法雄性、健康大鼠SD,随机分为正常组、脑缺血模型组参照Koizumi法并加以改进

2、,建立MCAO大鼠脑缺血2h再灌注24h的模型;裂解液提取总蛋白质,以双向电泳技术进行蛋白质分离,考马斯亮蓝染色,获得双向电泳图谱,利用专门的软件筛选出差异蛋白质,用MALDI-TOF-MS获得肽指纹图谱,MS-Fit数据库进行搜索,获得有关的蛋白质信息。结果:局灶性脑缺血模型组与正常组脑组织的比较蛋白质组学研究。与模型组比较,从正常组筛选到23个差异表达蛋白斑点,其中13个低表达,10个高表达,鉴定其中6个蛋白质,发现白细胞三烯A-4水解酶、促甲状腺激素释放激素降解胞外酶等与脑缺血相关的蛋白质。结论

3、:从蛋白质组学角度发现了一些与脑缺血相关的蛋白,有助于今后进一步研究脑缺血性损伤的保护机制。[关键词]脑缺血蛋白质组学ACOMPARATIVEPROTEOMESTUDYONFOCALCEREBRALISCHEMICTISSUEOFRATBRAINWangJi-Sheng1,QiuZong-Yin2,XiaYong-Peng2,LiHui-Zhi2(1.Thethirdhospitalofmianyang,mianyang621000;2DepartmentofPharmacy,ChongQingUni

4、versityofMedicalScience.ChongQing400016)[ABSTRACT]Objective:Toestablishamodeloffocalcerebralischemictissueofratbrainandexploretheprotectivemechanismoffocalcerebralischemiareperfusioninwholelevelofproteins.Method:MaleandhealthySDrats,wereclassifiedthemin

5、tonormal,Modelatrandom.EstablishedtheMCAOmodelwithsuturemethodbyreperfusion24hafterischemic2haccordingtoKoizumi,smethod,extractedtotalproteinswithLysisbuffer,separatedproteinsbytwo-dimensionalelectrophoresis(2-DE),stainedproteinsbyCoomassiebrilliantblue

6、,gotthepatterns,foundoutdifferentialproteins,andobtainedPMSbyMALDI-TOF-MS,gainedrelatedtheinformationofproteinsbyMS-Fitdatabase.Result:.Acomparativeproteomestudyofmodelandnormalgroup.Comparedwithmodelgroup,thenormalgroupgained23differentialproteinspots,

7、13spotsexpressedlowly,and10spotshigh,identified6proteinspots,foundouttherelativecerebralischemicproteinssuchasLeukotrieneA-4hydrolase,Thyrotropin-releasinghormone-degradingectoenzymeetc.Conclusion:Establishinga2-DEtechnologywasappliedtoproteinanalysisof

8、braintissue,andfoundouttherelativeproteinsoffromproteomeaspect.Thiswouldprofitfromtheprotectivemechanismofcerebralischemictissue.[KEYWORDS]:cerebralischemic;Proteomics;脑血管病是危害人类生命与健康的常见病和多发病,以其高发病率、高复发率、高致残率、高死亡率严重危害人类的健康。脑血管病中尤以

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