大鼠原位肝移植模型的手术技巧

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1、大鼠原位肝移植模型的手术技巧作者：王振猛，唐乙，宋少华，陆智杰，王全兴，俞卫锋【摘要】目的探讨建立稳定的大鼠原位肝移植模型的外科手术技巧，为研究肝脏缺血再灌注损伤提供技术支持。方法110只雄性SD大鼠随机配对后分别作为供体和受体，通过改良Kamada“二袖套”法施行大鼠原位肝移植。结果改良Kamada法建立大鼠原位肝移植模型共52例，7d生存率88.5%，7例长期存活大于100d。结论大鼠原位肝移植模型的建立需要极度的耐心和娴熟的手术技巧，模型的建立有助于研究肝脏缺血再灌注损伤，移植免疫及器官保存。【关键词】原位肝移植；动物模型；大鼠Abstract：ObjectiveToimp

2、rovetheoperationtechniquefororthotopiclivertransplantationinrats,andillustratethehepaticischemia-reperfusioninjuryinfuturestudy.MethodsOnehundredandtenmaleSDratwererandomlypairedasdonorandreceptorandwereperformedwithorthotopiclivertransplantationbymodifiedKamada’stwocuffstechnique.ResultsAsar

3、esult,88.5%ofthe52ratswithorthotopiclivertransplantationsurvivedmorethan7daysand7onessurvivedlongerthan100days.ConclusionExtreme11patienceandskillfulsurgicaltechniquesarenecessaryforratorthotopiclivertransplantationmodel,whichishelpfultothestudyonhepaticischemia-reperfusioninjury,transplantat

4、ionimmunityandorganpreservation.Keywords：orthotopiclivertransplantation;animalmodel;ratStarzl于1963年首先为一先天性胆道闭锁的儿童施行肝脏移植手术后，肝移植术已逐渐成为各种急慢性肝功能衰竭的有效的治疗手段，但肝脏缺血再灌注损伤仍不可避免，并已成为移植肝功能不佳或原发性无功能的主要原因，在术后1周内需再次行肝移植的患者中移植肝无功能约占81%［1］。大鼠肝脏移植模型是研究肝脏缺血再灌注损伤、移植免疫、器官保存等基础理论的理想模型，对于进一步探讨围术期肝脏缺血再灌注损伤具有重要的意义。目前

5、国内关于大鼠肝移植模型建立的文章已比较多，本文主要从手术细节方面具体讨论手术技巧和需要注意的问题。1材料与方法1.1材料11供受体均采用封闭群SD雄性大鼠，购自第二军医大学实验动物中心，重200~250g，实验室清洁级饲养，随机配对后以体重较轻者为供体。门静脉袖套采用内径2.2mm，外径2.6mm的套管鞘，袖套长约3mm，下腔静脉袖套使用内径3.0mm，外径3.6mm的聚乙烯奶品吸管，袖套长3mm，袖套均留2mm柄部供夹持，以刻槽器在管壁上刻槽以防止打结时丝线滑脱。胆总管套管应用外径1mm的一次性硬膜外麻醉导管，长6mm，两端修剪成斜面。显微器械购自上海手术器械厂。结扎线用5－0

6、普通丝线，血管缝合线用7－0号丝线，均购自上海金环医疗用品厂。灌注及保存液均为4℃乳酸钠林格液，其中每ml灌注液中含肝素25U，地塞米松20μg；肝素化液为4℃生理盐水，每ml含肝素50U。1.2手术方法1.2.1供体按照改良Kamada法［2］行大鼠原位肝移植术。乙醚吸入麻醉成功后，腹腔内迅速注射苯巴比妥（50mg/kg），大鼠取仰卧位，腹部大十字切口，剑突牵引，置腰垫，将肠袢移至腹腔外左侧，覆盖湿纱布，远离肝脏剪断肝镰状韧带、冠状韧带，游离并双结扎离断左膈下静脉。游离肝盘状乳头突表面韧带以充分暴露盘状乳头突。双结扎离断食管静脉，离断肝胃韧带，游离肝动脉并挂线待灌注后打结。分离

7、胆道，距离左右肝管汇合部1.5cm11处插管，结扎后远端剪断，留牵引线一根备用。暴露幽门静脉并挂线待灌注后打结。剪开肝尾状叶的韧带和下腔静脉以及肾静脉表面的后腹膜及结缔组织膜，暴露肾静脉并双重结扎离断。将左肾静脉至肝尾叶之间的下腔静脉完全游离，肝尾状叶后部穿线结扎右肾上腺静脉，然后剪开右侧肝食管韧带。暴露右腰静脉，注入4℃肝素生理盐水2ml，棉球按压止血；将后腹膜分离至腹主动脉分叉处，约肝素化后2min由腹主动脉分叉处穿刺置入套管针。剪开膈肌，夹闭胸主动脉，剪开心脏及下腔静脉胸内