大叶千斤拔与蔓性千斤拔的高效液相色谱指纹图谱鉴别研究

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1、大叶千斤拔与蔓性千斤拔的高效液相色谱指纹图谱鉴别研究【摘要】目的鉴别大叶千斤拔、蔓性千斤拔。方法采用HPLC法,KrosmasilC18柱(250mm×4.6mm,5μm),乙腈-水梯度洗脱,检测波长为274nm,流速为1ml/min,柱温为30℃。结果在选定色谱条件下,建立了稳定可控的高效液相色谱图;应用主成分分析法、系统聚类分析法将药材分成两类,并计算相似度。结论应用高效液相色谱法鉴别大叶千斤拔、蔓性千斤拔是可行的。【关键词】高效液相色谱指纹图谱法;大叶千斤拔;蔓性千斤拔;系统聚类法;主成分分析 Abstract:ObjectiveToidentifyMoghaniamacrophyll

2、a(Willd.)O.KuntzeandMoghaniaphilippinensis(Merr.etRolfe)Li.MethodsThefingerprintswereobtainedfromWaters2695instrument;theseparationofHPLCfingerprintswasperformedonaKrosmasilC18analyticalcolumnandgradient-elutedwithacetonitrile-waterattheflowrateof1ml/min.Thetemperatureofcolumnwas30℃.TheUVdetectionw

3、avelengthwas274nm.ResultsPrincipalcomponentsanalysisandclusteringanalysiswereusedintheidentificationofthesamplesandthesimilitudewascalculatedbycomputer.ConclusionThemethodcan8identifyMoghaniamacrophylla(Willd.)O.KuntzeandMoghaniaphilippinensis(Merr.etRolfe)Li..  Keywords:HPLCFingerprint;Moghaniamac

4、rophylla(Willd.)O.Kuntze;Moghaniaphilippinensis(Merr.etRolfe)Li.;Clusteringanalysis;Principalcomponentsanalysis  《中国药典》2005版Ⅰ部中收载千斤拔为豆科植物蔓性千斤拔M.ghaniaphilippinensis(Merr.etRolfe)Li,大叶千斤拔M.ghaniamacrophylla(Willd.)O.Kuntze或绣毛千斤拔Moghaniaferruginea(Wall.exBenth.)Li.的干燥根[1],为目前市面上治疗效果和销量较好的妇科千金片的君药,具有镇

5、痛、抗炎作用,可治疗妇科病[2]。蔓性千斤拔、大叶千斤拔分布较广,主产于江西、福建、湖北、湖南、广西、广东、四川及中国台湾等省区[3]。由于千斤拔类药材称谓比较复杂,在药材商品流通和临床使用时很容易混淆,有关大叶千斤拔和蔓性千斤拔的鉴别有报道[3],但目前未查阅到用高效液相色谱指纹图谱法鉴别该类药材的报道[4~6]。为了更好地指导临床正确、有效和科学地使用该类药材,本实验拟采用高效液相色谱法结合主成分分析法、系统聚类分析法鉴别2005版《中国药典》收载的大叶千斤拔和蔓性千斤拔2种药材,为千斤拔类药材的鉴别提供新方法。  1仪器与试药8  1.1仪器与试剂Waters2695高效液相色谱仪,W

6、aters2696检测器,EmpowerPro色谱工作站,KQ-250B型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司),METTLERAE240电子分析天平[梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司],乙腈为色谱纯,水为二次蒸馏水,其他试剂均为分析纯。  1.2药品大叶千斤拔、蔓性千斤拔药材均经本校民族药物研究所刘圆副教授鉴定,其来源见表1。表1药材来源  1.3数据处理软件中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版用于对14批样品进行相似度评价,DPSv2.00统计软件用于主成分分析与系统聚类分析。  2方法与结果  2.1色谱条件与系统适应性色谱柱为KrosmasilC18柱(250mm×4.6mm,5μm

7、),以乙腈为流动相A,以水为流动相B进行梯度洗脱,梯度洗脱程序表见表2,检测波长274nm;流速1ml/min,柱温30℃;进样量10μl;所有组分均在110min内被检测完。  2.2样品溶液的制备取以上各样品(过40目筛)约0.58g,精密称定,置具塞锥型瓶中,精密加入甲醇25ml,密塞,称定重量,放置12h,超声处理(功率250W,频率50kHz)30min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀

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