多糖生物膜在骨组织工程中应用的实验研究

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1、多糖生物膜在骨组织工程中应用的实验研究作者:倪建光,刘丹平,韩宝芹【摘要】  目的在骨组织工程的载体外包裹多糖生物膜(PSBM),减少种子细胞在复合载体时的外溢逃出,验证其在组织工程中应用的可行性。方法用全骨髓法获得骨髓基质干细胞,体外扩增后,取第三代细胞种植于支架材料载体多孔纳米磷灰石-硅灰石生物活性玻璃陶瓷/壳聚糖复合支架材料(A-W-MGC/CS)上,分2组,实验组载体外用多糖生物膜物理包裹,对照组不包裹多糖生物膜,观察载体外培养皿上的细胞生长数量;MTT检测细胞活力;电镜观察载体上细胞粘附生长情况。结果实验组培养板上载体外漏细胞较少,对照外漏细

2、胞较多:MTT检测两组细胞活力差别无显著性(P>0.05);电镜观察实验组载体上细胞粘附生长较对照组稍优。结论多糖生物膜在骨组织工程中具有应用前景。【关键词】多糖生物膜骨髓基质干细胞(BMSCs)支架材料组织工程  Abstract:ObjectiveTopackbonetissueengineeringcarrierwithpolysaccharidebiomembranetodecreaseseed-cellsleaking,andtoauthenticatethefeasibilityofapplyingpolysaccharidebiomem

3、braneinbonetissueengineering.Methods11Bonemarrowstromalcellswerederivedthroughwhole-bone-marrowmethod,and,afteramplificationinvitro,thecellsofthethirdgenerationwereimplantedinA-W-MGC/CS.Thenthecellsweredividedintotwogroups-anexperimentalgroupwithcarrierpackedwithPSBMandacontrolg

4、roupwithcarrierun-packed.Thenumberofcellgrowinginculturedishoutofthecarrierwasobserved,thestateofcellvigorwasdetectedwithMTT,andthestateofcelladhesionwasobservedwithelectronmicroscope.ResultsThenumberofleakingcellintheexperimentalgroupwaslessthanthatinthecontrolgroup.Theresultof

5、MTTdetectionshowedthatdifferenceofcellvigorbetweentwogroupswasun-significant(P<0.05).Thegrowingstateofcellintheexperimentalgroupwasbetterthanthatinthecontrolgroupunderelectronmicroscope.ConclusionsPolysaccharidebiomembranehasanappliedprospectinBonetissueengineering.  Keywords:po

6、lysaccharidebiomembrane;bonemarrowstromalstemcell;bracketmaterial;tissueengineering11  骨组织工程的核心是在体外培养细胞,然后将细胞种植到具有一定结构的三维支架上,再将这种细胞生物材料复合体植入骨缺损部位,通过生物过程使细胞长入多孔支架中,即经过细胞间相互粘附、增殖、分化,分泌细胞外基质最终形成具有一定结构和功能的组织或器官,从而达到骨修复的目的。细胞和支架材料的相互作用又起到关键的作用,减少细胞复合材料又未贴附在支架材料这段时间的外漏,可以有效的减少种子细胞的损失,

7、增加细胞与支架材料之间的作用时间,更利于细胞粘附。由中国海洋大学生命学院研制的多糖生物膜(polysaccharidebiomembrane,PSBM)是一种安全无毒,具有很好生物相容性的细胞培养移植载体。多糖生物膜是由壳聚糖衍生物(羧甲基壳聚糖)、透明质酸及明胶按特定比例混合制成的膜型制剂。其分子量约为2000Da,透水率为10μL/(min·cm2)。为了提高载体内外液体中大分子物质的流通,我们用显微穿刺的方法在多糖生物膜上增加孔隙(直径约为20μm、孔间距为100~150μm)。耿燕、王晓莉[1,2]等将其应用于眼科的研究。本实验研究将多糖生物膜

8、应用于骨组织工程的可行性。  1材料与方法  1.1实验动物  2~3月龄清洁级日本大耳白兔1

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