人参二醇组皂苷抗动脉粥样硬化的作用及机制

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1、人参二醇组皂苷抗动脉粥样硬化的作用及机制作者：李凤娥孔繁利孙新王冬梅赵雪俭李玉林李威【摘要】目的探讨人参二醇组皂苷（PDS）的抗动脉粥样硬化作用及机制。方法Wistar大鼠45只，随机分为对照组、模型组、PDS组，每组15只。对照组大鼠喂饲普通饲料，模型组及PDS组大鼠采用高脂饮食加维生素D3（总量7×105U/kg，分别于第1周和第6周腹腔注射）建立大鼠动脉粥样硬化模型。PDS组大鼠高脂喂养同时每日1次PDS（100mg·kg-1·d-1）灌胃，每周称重1次并根据体重变化调整给药量；对照组及模型组大鼠以相应生理盐水灌胃。11w后颈动脉采血检测血脂水平，光镜下观察主动脉弓形态学变

2、化，免疫组化染色法检测胸主动脉细胞间黏附分子1（ICAM1）的表达。结果与模型组比较，PDS给药组TC、LDLC和AI明显降低（P＜0.01，P＜0.05），血清甘油三酯、高密度脂蛋白水平无明显差异。光镜下模型组血管壁多处可见典型粥样硬化斑块，药物组血管壁结构变化轻微，局部仅见内皮脱落；对照组血管壁光滑完整，未发生病理变化。免疫组织化学染色结果显示，模型组阳性细胞率与对照组比较明显升高（P＜0.01）；与模型组比较，PDS组阳性细胞率明显降低（P＜0.01）；而PDS组阳性细胞率与对照组无明显差异。结论PDS具有预防动脉粥样硬化形成的作用，通过下调主动脉ICAM1的表达量

3、，抑制AS的形成。9【关键词】人参二醇组皂苷；动脉粥样硬化；细胞间黏附分子1　　动脉粥样硬化(AS)是许多心脑血管疾病的病理基础，其形成原因相当复杂，目前关于AS的病因认为是由损伤、炎症、免疫功能障碍三者相结合作用的结果〔1〕。近年来传统中药在抗AS中仍发挥着独特的优势，体现出中医整体观念，具有灵活组方、因人制宜、副作用小的治疗特色。人参是五加科植物的根茎，有强健身体、益智明目、安神止惊、延年益寿的作用〔2〕。现代研究表明，人参的主要活性成分为人参皂苷(PDS)，具有降血脂、抗脂质过氧化反应、提高机体免疫力、预防感染等作用〔3〕。目前有关PDS对预防AS形成的研究报道甚少。本研究

4、采用食饵法建立大鼠AS模型，观察PDS对血脂及细胞间黏附分子1（ICAM1）表达的影响，旨在为AS及冠心病的预防提供新的思路，同时也为开发抗AS新药提供有价值的理论依据。　　1材料与方法　　1.1动物　　选用Wistar健康大鼠45只，体重180～230g，雌雄不限，由吉林大学实验动物中心提供。随机分为对照组、模型组、PDS组，每组15只。在动物房普通清洁环境下分笼饲养，温度18℃～22℃，湿度55%±5%，每日光照/黑暗各12h。9　　1.2方法　　1.2.1药品及试剂　　PDS苷由吉林大学病理生理学教研室馈赠，胆固醇、猪胆盐（北京化学试剂公司产品），维生素D3（苏州第六制

5、药厂），丙基硫氧嘧啶（上海复星朝晖药业有限公司产品），兔抗鼠ICAM1多克隆抗体（北京博奥森生物技术有限公司产品），免疫组化检测试剂盒（北京博奥森生物技术有限公司产品），7020型全自动生化分析仪（日本日立公司），WC/0905恒温箱（重庆实验设备厂），石蜡切片机（德国来斯），BS21OS电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司），-80℃超低温冰箱（MDFU4086S，日本三洋集团股份有限公司）。　　1.2.2模型制备　　采用维生素D3与高脂饲料相结合制备大鼠高脂血症与AS模型〔4〕。模型组与PDS组每日饲喂高脂饲料（高脂饲料配方：82.5%普通饲料，2%胆固醇，0.5%猪

6、油，5%白糖），同时于第1、6周分别腹腔注射VD37×105U/kg，共2次，丙基硫氧嘧啶每日50、0.4ml/kg灌胃1次。对照组饲喂普通标准饲料，每只20～259g/d。通过大鼠血清TC、LDL水平及动脉粥样硬化指数（AI）及主动脉壁的病理组织学变化判定动脉粥样硬化模型制备是否成功。　　1.2.3给药方法　　PDS组在造模同时每日预防性给予PDS灌胃1次(100mg/kg体重)，每周根据体重增长及时调整给药剂量；正常组、模型组以等量生理盐水灌胃。连续11w。　　1.2.4标本采集　　于实验第11周末颈动脉取血，每只大鼠取血清约2ml分装于4个EP管，置-80℃冰箱冷冻备用；主

7、动脉血管取材做病理石蜡切片；免疫组织化学染色方法检测ICAM1的表达。免疫组化染色阳性结果判断标准：胞浆、核膜出现棕黄色细颗粒为阳性，提示有ICAM1表达。阳性细胞率的计算：在400倍光镜下观察动脉组织免疫组化染色结果，每张切片随机选取10个视野作为观察区，每个区域计数100个细胞，计数阳性细胞总数，与1000相比，比值为阳性细胞率。　　1.3统计方法　　数据采用SPSS12.0软件分析，分类变量资料采用χ2检验；双变量等级资料采用Spearman等级相关分析。9　　2结果