二对半e抗原假阳性原因分析

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1、二对半e抗原假阳性原因分析【摘要】目的：探讨导致二对半e抗原假阳性的原因。方法：用ELISA法测定45份离心与不离心抗凝标本的HBeAg。结果：不离心标本的HBeAg单独阳性很高，离心标本基本无此情况。结论：假阳性与不离心有关，全血中有许多与HBeAg有共同抗原颗粒物质，在酶免过程中出现非特异性结合，而造成假阳性，洗板不清，可能也是造成假阳性的原因之一。故要求对单HBeAg阳性标本进行离心，以提高测定结果的准确性。【关键词】HBeAg；ELISA;假阳性【ABSTRACT】Objective:Toinvesti

2、gatethereasonofcausinge-antigenfalsepositive.Methods:UseELISAmethodtomeasureHBeAgof45centrifugeandcentrifugelessuncoagulatesamples.Results:ThepercentageofthesinglepositiveforHBeAgishighinthecentrifugelesssamples.Buttheresultisquitedifferentforcentrifugesampl

3、es.Conclusion:Thefalsepositvehassomethingtodowithcentrifugelessness.Intheblood,therearelotsofparticularmattersthathavecommonantigenfunctionwithHBeAg.Duringtheenzymaticmethodthereareunspecialcombinations,whichcausesthefalsepositive.Maybeuntidinessisoneofthere

4、asonswhichcausesthefalse6positive.SocentrifugeisneededforHBeAgsinglepositivesampletoimprovetheaccuracyofmeasuringresults.【KEYWORDS】HBeAg；ELISA；thefalsepositive检测HBV的血清学方法有很多，目前,ELISA操作最简单，易于推广。近几年来，我们在工作中遇到几例单HBeAg阳性或HBeAg、抗—HBe同时阳性的特殊模式，将标本作如下处理后：重新离心，冰箱保存，

5、复查，发现结果均为阴性。另外也有研究者报道HBeAg、抗—HBe同时阳性的特殊模式[1]，以及溶血及脂浊样品对ELISA检测的影响[2]，基于上述这些现象，我们进行如下探讨。1材料和方法1.1实验仪器BIORADModel550酶标仪,BIORADModel1575洗板机，北京医用离心机厂LDZ5—2型离心机,美国PE公司PE480DNA扩增仪。1.2标本枸橼酸抗凝标本。1.3试剂科华公司和华美公司HBeAg试剂盒，新创HDVIgM试剂盒,HBVDNA试剂盒。61.4方法严格按照试剂盒说明书操作。1.4

6、.1枸橼酸抗凝标本45份混匀不离心和3000离心5min、10min，分别用科华和华美试剂同时进行检测。1.4.2结果判断样品OD值/阴性对照，OD值＞2.1为阳性，否则为阴性。1.4.345例标本作HDVIgM检测，同时作HBVDNA检测。2结果表145份枸橼酸抗凝标本两种试剂离心与不离心检测结果2.1对45例标本作HDVIgM检测，结果为阴性。2.2对45例标本作HBVDNA检测，结果为阴性。3讨论3.1HDV是缺陷病毒，当HDV和HBV重叠感染,HBV为HDV复制提供HBsAg[3],故能表现HB

7、sAg阴性而HBeAg阳性的情况。通过对HDV6IgM测定结果表明，单独HBeAg阳性与HDV重叠感染无关。3.2HBeAg存在于乙肝病毒Danna颗粒的核心部分，HBeAg存在表明HBV处于增殖和复制状态，具有强烈的传染性。通过对HBVDNA的检测结果为阴性，表明体内并无HBVDNA[4]，故我们认为出现的HBeAg为假阳性。3.3HBeAg是前C区基因区表达，同时HBcAg在C区基因区表达[5]，HBeAg的纯化是产生纯抗-HBe的前提，故在包被过程所用抗—HBe不纯可能是造成假阳性的原因之一。3.4

8、全血中有许多HBeAg的共同抗原类的颗粒物质，在不离心的情况下悬浮在血浆中，故在酶免过程中出现非特异性结合而造成假阳性［6］；另外可能血中存在许多SOD酶，在洗涤过程中不清而在显色过程中出现非特异性反应造成假阳性，同行也有类似报道[7]。3.5HBeAg阳性是反应HBV增殖、有传染性的一种有意义的指标之一，在排除HBsAg勾带反应，HDVIgM阳性，HBVDNA阳性情况下，单独出现