资源描述：
《二仙汤疗效与细胞色素p450 1a2酶基因多态性关系的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、二仙汤疗效与细胞色素P4501A2酶基因多态性关系的研究作者：杨明,丁春燕,张娴,陈经宝,卢运田,唐波,朱首伦,曾星【摘要】目的探讨二仙汤治疗男性更年期综合征临床疗效的个体差异与细胞色素P4501A2(CYP1A2)酶基因单核苷酸多态性的相关性。方法48例肾阴阳两虚证男性更年期综合征患者使用二仙汤治疗3个月,采用伊斯坦布尔Bosphorus大学心理系症状量化评分法并参考《中药新药临床研究指导原则》,对肾阴阳两虚证量化评分,用聚合酶链反应(PCR)扩增CYP1A2G2964A基因,分析二仙汤的临床疗效与CYP1A2G2964A酶基因单核苷酸多态性的
2、关系。结果治疗组与正常对照组之间基因型及等位基因分布无显著性差异,有效组32例受试者中有16例的CYP1A2G2964A基因型为G/G(56.25%),无效组16例受试者中有11例的CYP1A2G2964A基因型为G/A(68.75%)。基因组间治疗前、治疗后的症状、体征评分无明显差异；基因组间肾阴阳两虚证主证、次症评分也无明显差异。结论二仙汤治疗男性更年期综合征个体含CYP1A2G2964A基因型为G/G有效率较高,个体含CYP1A2G2964A基因型为G/A无效率较高。【关键词】二仙汤；男性更年期综合征；细胞色素P4501A211二仙汤是张伯
3、讷教授20世纪50年代创建的治疗更年期综合征的方剂,经过几十年的临床观察,已经成为治疗更年期综合征的专方[1]。在临床上应用一组中药治疗同种症候相同的疾病时,对一些患者有效,但对另一些患者效果较差或无效,这是临床经常遇到的问题。为了进一步探讨这一问题,我们选用二仙汤在治疗男性更年期综合征中出现的疗效差异,结合患者个体差异与细胞色素P4501A2(cytochromeP4501A2,CYP1A2)酶基因单核苷酸多态性的相关性,初步探讨中药治疗中出现的不同疗效个体对药物敏感性与药物代谢酶基因多态性的关系。1临床研究1.1病例选择治疗组患者均来自本院男
4、科门诊,共48例肾阴阳两虚证患者,年龄35～61岁,平均53岁；对照组来自本院自愿者,共55例,年龄32～49岁,平均41岁。 1.2入选标准为了使患者症状诊断性筛查具有客观性,采用伊斯坦布尔Bosphorus大学心理系将症状量化的方法,对男性更年期综合征症状评分,体能症状＋血管舒缩症状≥5分、精神心理症状≥4分、性功能症状≥8分者可诊断为男性更年期综合征[2]。11男性更年期综合征肾阴阳两虚证中医诊断：根据《中药新药临床研究指导原则》,参考“肾阳虚证及肾阴虚证的临床研究指导原则”[3]明确中医诊断。主证：腰膝酸痛,畏寒肢冷,性欲减退,舌质淡黯
5、,苔白干,脉沉细无力。次证：精神不振,头目眩晕,耳鸣,梦多易醒,脱发,夜尿频多,大便时秘时泄。按症状轻重分级,分为4级。 1.3排除标准①有急、慢性肝肾功能损害者和心功能损害者；②有睡眠呼吸暂停综合征者；③有红细胞增多症者；④前列腺癌、良性前列腺增生伴排尿障碍者；⑤有严重心血管疾病及脑卒中病史者。 1.4治疗方法使用二仙汤治疗：仙茅15g,淫羊藿15g,巴戟天10g,当归10g,知母10g,黄柏10g。每日1剂,水煎至150～200mL,分2次服,12周为1个疗程。 1.5疗效观测总分值＝中医肾阴阳两虚证相关症状及体征分值＋男性更年期综合征
6、相关症状及体征分值。疗效指数＝(治疗前症状评分总分值－治疗后症状评分总分值)/治疗前症状评分总分值。11 1.6疗效判定标准有效：男性更年期综合征症状、体征好转；疗效指数≥30%。无效：男性更年期综合征症状、体征无改善；疗效指数<30%。 2实验研究 2.1试剂QIAampDNABloodMiniKits,SuperMixHighFidelity,英韦创津生物有限公司。内切酶Bsp120I,内切酶DdeI,内切酶RsaI,英韦创津生物有限公司。Tris/AceticAcid/EDTABuffer50×1LBio-RadLaborato
7、ries。DNALadders(50bp),晶美生物工程有限公司。 2.2方法 2.2.1DNA提取 取静脉血2mL,经溶膜液/蛋白酶K消化,常规提取基因组DNA。11 2.2.2PCR扩增 ①在各个反应管中分别加入PCRSuperMixHighFidelity45μL,1F、1R(10μmol/μL)各1μL,DNA模板各2μL。②1000r/min,离心1min,混匀。③放到PCR仪上进行PCR反应。④将1F、1R为引物扩增的PCR产物酶切。⑤DdeI酶切片段电泳,判断基因型。一次性凝胶系统下拍照,根据条带判断其基因型：若出现了4
8、64bp、132bp两个条带,则其为突变基因型A/A；若出现了596bp、464bp、132bp三个条带,则其为杂合基因型G/A；若仅出
