col1a1、col3a1在发育性髋脱位患儿圆韧带的表达

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1、COL1a1、COL3a1在发育性髋脱位患儿圆韧带的表达作者：王恩波，赵群，李连永，史立伟，李建军，高红【摘要】［目的］探求发育性髋脱位(developmentaldislocationofthehip,DDH)患儿与正常儿圆韧带中Ⅰ、Ⅲ型胶原在mRNA及蛋白水平的表达差异。［方法］选取性别相同年龄相近的6对发育性髋脱位患者及正常儿配对比较。采用半定量RT-PCR及Western-Blot法检测COL1a1、COL3a1在mRNA及蛋白水平的表达。图像分析软件进行量化分析，并经统计学处理。［结果］COL1a1在DDH组mRNA及蛋白水平表达

2、均较正常对照组降低(P<0.01)；COL3a1在DDH组mRNA及蛋白水平表达与正常对照组无显著差异(P>0.05)。［结论］DDH患儿圆韧带中I型胶原在mRNA及蛋白水平表达较正常同性同龄儿降低，可能是导致DDH患儿髋关节松弛的原因。DDH患儿髋关节松弛可能与Ⅲ型胶原含量无关。【关键词】发育性髋脱位；圆韧带；关节松弛；胶原Abstract:［Objective］ToinvestigatetheexpressionofcollagentypeIandIIIatmRNAandproteinlevelintheligamentum

3、teresofdevelopmentaldislocationofthehip(DDH)andthenormalhip.［Method］Therewere6pairsjointlaxity15ofpatientsofDDHgroupandnormalcontrolgroupwithpairedcontrolofsamesexandage.SemiquantityRT-PCRmethodwasusedtodetecttheCOLlalandCOL3alintheligamentumteresatmRNAlevel.Western-Blotme

4、thodwasusedtodetecttheCOLlalandCOL3alintheligamentumteresatproteinlevel.ThequantitativeanalysisoftheCOLlalandCOL3alwereperformedbyprofessionalimagesoftwareandtheresultswereanalyzedwithstandardstatisticalmethods.［Result］AtbothmRNAandproteinlevelCOLlalexpressionweredecreased

5、intheDDHgroupcomparedtothecontrolgroup(P<0.01).TherewasnosignificantdifferenceforCOL3albetweenDDHandcontrolgroupateithermRNAorproteinlevel(P>0.05).［Conclusion］ThedecreasedcollagenIexpressionatmRNAandproteinlevelintheligamentumteresofthechildrenwithDDHmayleadtohipjoin

6、tlaxity.HipjointlaxityinDDHmaybeindependenttothecontentofcollagenIII.Keywords：developmentaldislocationofthehip;jointlaxity;ligamentumteres;collagen关节囊与韧带松弛是导致发育性髋脱位(developmentaldislocationofthe15hip,DDH)的主要因素之一。胶原纤维是构成圆韧带中细胞外基质的主要成分，并使其保持一定的强度和韧性。各型胶原结构和(或)含量的变化可能会导致其拉伸增强

7、作用下降，发生关节松弛。目前关于DDH圆韧带内胶原蛋白的研究国内外报道较少。本研究应用分子生物学检测技术比较Ⅰ、Ⅲ型胶原在转录水平和蛋白水平的表达差异。试图从分子水平揭示DDH患儿髋关节松弛的机理。1材料和方法1.1标本来源及制备DDH组髋圆韧带标本6例，均无家族史，不合并其他畸形。来源方式：手术复位中切除的患髋圆韧带。与DDH组性别相同年龄相近(<6个月)正常儿童髋关节圆韧带6例。来源方式：4例来源于股骨颈肿瘤手术切除之圆韧带，2例来源于意外死亡后尸检。取材部位及方法同DDH组。以上标本获取均获得监护人书面授权，并获得医院伦理委员会

8、书面认可。剪取原韧带中间1／3部分深低温保存。1.2半定量RT-PCR151.2.1组织总RNA提取圆韧带组织总RNA提取按照Invitrogen公司(美国)提取试剂盒说明书进行