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1、COX-2在子宫内膜癌组织中的表达及其意义【摘要】目的检测环氧化酶-2（Cyclooxygenase-2,COX-2）在子宫内膜癌组织中的表达,并探讨其意义。方法利用半定量RT-PCR法检测52例子宫内膜癌组织及23例正常子宫内膜组织中COX-2的表达。结果（1）COX-2在正常子宫内膜组织中均不表达，其在子宫内膜癌组织中的表达阳性率分别为65.4%；（2）COX-2表达量与肿瘤的分化程度有关，分化程度越低，表达量越高，高分化子宫内膜癌与低分化子宫内膜癌间差异有显著性（P<0.05）。结论COX-2在子宫内膜癌中的表达与肿瘤的分化程度有关且高于正常组织，提示COX-2与子宫内膜癌的形成
2、有关，且可作为判断预后及分化程度的指标。【关键词】子宫内膜癌；Cyclooxygenase-2；半定量RT-PCR【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheexpressionofcyclooxygenase-2（COX-2）inendometrialcarcinoma.MethodsExpressionofCOX-2wasassayedbysemiquantitativeRT-PCRin52casesofendometrialcarcinomaand23casesofnormalendometrialtissues.Results（1）Thepositivera
3、teandexpressionquantityofCOX-2incancertissueswerehigherthaninnormaltissues.（2）TheexpressionquantityofCOX-2wascorrelatedwithhistologicalgrade,theexpressionquantityofCOX-2waslowerinwell-differentiatedendometrial9carcinomathaninpoorlydifferentiatedendometrialcarcinoma.ConclusionCOX-2mayafunctionimport
4、antlyintumorproductionandmaybeagoodindextoassessthedifferentiationdegreeandprognosisofendometrialcarcinoma.【Keywords】endometrialcarcinoma;cyclooxygenase-2;semiquantitativeRT-PCR环氧化酶-2（Cyclooxygenase-2,COX-2）是催化花生四烯酸（AA）生成前列腺素（PG）过程中重要的限速酶，参与多种肿瘤的细胞增殖、抗凋亡和血管生成，与肿瘤的发生、发展和预后密切相关〖1〗狙芯恳园攵縍T-PCR的方法检测和
5、分析子宫内膜癌组织及正常子宫内膜组织中COX-2mRNA的表达情况,探讨其表达与子宫内膜癌的关系。1材料与方法1.1组织标本收集2005年6月～2006年6月在我院及南通大学附属医院住院手术治疗的52例子宫内膜癌患者手术切除的肿瘤组织,切下的标本分两份,一份立即置液氮速冻后，保存于-80℃9保存备用。另一份做病理检查。患者年龄36～77岁,中位年龄为53岁,采用国际妇产科联盟（FIGO）2000年手术-病理分期标准，其中高分化腺癌19例,中分化腺癌15例,低分化腺癌18例。正常子宫内膜组织为全切除的良性子宫疾病,其中增生期内膜11例,分泌期内膜12例，年龄在32～52岁,中位年龄为41岁。1
6、.2器材TRIZOL及DEPC购自上海华舜生物工程有限公司。RT-PCR一步法试剂盒购自晶美生物工程公司，其中逆转录酶AMVRT、Taq酶及dNTP均为FINNZYMES公司产品。凝胶电泳摄像仪为Panasonic公司产品，凝胶定量分析软件捷达801为江苏省捷达科技公司产品。1.3引物设计与合成从GenBank查取基因序列，以Primer5软件设计COX-2及内参β-actin的引物各一对，其序列分别为，COX-2：上游5’-TTACAATGCTGACTATGGCTAC-3’，下游5’-CTGATGCGTGAAGTGCTG-3’；β-actin：上游5’-AAGTACTCCGTGTGGATC
7、GG-3’，下游5’-ATGCTATCACCTCCCCTGTG-3’。扩增片段大小分别为238bp和495bp。上述引物均由上海生工生物技术服务有限公司合成。1.4RNA样品的提取（1）称取从-80℃冰箱中取出解冻后的子宫内膜癌组织及正常子宫内膜组织20～30mg置入匀浆器,加入1ml9TRIZOL,室温下充分匀浆后倒入1.5ml离心管,静置5min;（2）加入0.2ml氯仿,振荡15s,室温静置5min;（
