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1、CD44v6、nm23在胃癌中的表达及意义作者：陈文习蔡丽马华玲 徐惠森【关键词】CD44v6；,,nm23；,,胃癌；,,浸润；,,转移,,,,,, 摘要：目的：探讨CD44v6和nm23在原发性胃癌中的表达及与胃癌浸润和转移的关系。方法：应用免疫组织化学SP法对69例胃癌及20例伴异型增生的慢性萎缩性胃炎组织进行研究。结果：CD44v6在不同分化程度及有无淋巴结转移癌组织中的表达差异有显著性（P＜0.05）；nm23在不同分化程度及有无淋巴结转移、浆膜有无浸润的癌组织中的表达差异具有显著性（P＜0.05）；CD44v6与nm23在胃
2、癌中的表达呈负相关关系γa=-0.0229。结论：检测CD44v6及nm23在胃癌中的表达对判断胃癌的恶性程度、浸润深度及淋巴结转移有一定临床价值。 关键词：CD44v6；nm23；胃癌；浸润；转移12 胃癌是我国消化道肿瘤中最常见的一种，其治疗仍是以肿瘤根治性胃次全或全切除术为主，辅以放疗、化疗，病人预后如何与肿瘤侵犯的深度、有无淋巴结转移及手术彻底与否关系密切。但术前即对肿瘤分期及有无淋巴结转移的特异性诊断方法尚未找到。近几年来的研究发现，在恶性肿瘤转移过程中，肿瘤细胞表达的多种粘附分子与该肿瘤的淋巴结转移有一定的相关性，其中对C
3、D44v6［1］、nm23［2］、P53、PCNA等研究日益受到人们的重视。 CD44是分布极为广泛的细胞表面跨膜糖蛋白，在淋巴细胞、成纤维细胞和上皮细胞表面均可检测到它的表达。CD44v6是CD44蛋白变异体，含人类变异体外显子6，研究表明，CD44v6基因与许多恶性肿瘤的淋巴结转移有一定关系。 nm23是1988年Steeg等分离出一种与恶性肿瘤转移有关的基因，该基因位于人类染色体17q22，编码区为533Bp，产物为152个氨基酸组成的17kD核内及胞浆蛋白，与二磷酸核氨酶（nucleotidediphosphatekinase
4、,NDPK）的氨基酸序列具有高度的同源性，参与微管聚合酸的活化和G蛋白的信号传递，其活化与肿瘤产生过程及转移有关。一般认为，nm23表达在人类多种肿瘤与淋巴结转移有相关性，而与组织学分级和预后关系的报道不一。许多研究表明［3］,CD44v6的高表达及nm23的低表达与某些恶性肿瘤的浸润转移有关，但在胃癌中表达的研究较少，结果不一，且多为单因素研究，联合表达的研究较少。本研究旨在探讨CD44v6、nm23在胃癌中联合表达的特点及与浸润和转移的关系。 1材料与方法12 11标本来源 收集武汉大学中南医院自2000年~2004年胃癌根治之
5、手术标本，经病理医师诊断为胃癌的石蜡包埋组织块69例，其中男性为45例，女性为24例，年龄25~71岁，中位年龄48.7岁。根据WHO组织学分型标准，高分化胃癌19例，中分化23，低分化胃癌27例；胃癌侵及浆膜者37例，未浸润浆膜者32例；伴有淋巴结转移者41例，无淋巴结转移者28例。另选伴异性增生慢性萎缩性胃炎病例20例作为对照，男16例，女4例，年龄26~62岁，平均42.3岁。 12主要试剂与实验方法 兔抗人nm23多克隆抗体、鼠抗人CD44v6单克隆抗体（克隆号2F10）以及即用型免疫组化超敏SP试剂盒均购自福州迈新生物技术开
6、发公司。每例标本连续切片4张备用，分别作HE染体和nm23、CD44v6免疫组化标记。采用免疫组化染色SP法，严格按试剂盒操作说明书进行，直接煮沸法抗原修复37℃温箱孵育，用PBS代替一抗做阴性对照，用已知胃癌阳性切片做阳性对照。 13结果判断12 免疫组化染色阳性反应为黄棕色颗粒且明显高于背景染色。nm23定位于细胞浆，在核及膜上也有少量表达，CD44v6主要以细胞膜染色为主，少数可见胞浆着色。两人双盲法观察切片，结合文献［4］具体标准如下：计数5个高倍视野或1000个以上细胞，按染色强度计分：0分为无色，1分为淡黄色，2分为棕黄色
7、。按阳性细胞所占百分比计分：0分为阴，1分为阳性细胞≤10%，2分为阳性细胞11%～50%，3分为阳性细胞51%～75%，4分为阳性细胞＞75%。染色强度与阳性细胞所占百分比乘积1～3分记为（+），4～6分为（++），8分为（+++）。 14统计学处理 率的统计学差异显著性用卡方检验计算法，两者之间的相关性用列联表资料相关分析χ2检验，所有数据均在SPSS11.3软件上进行。 2结果 21CD44v6在异型增生腺体及胃癌组织的表达12 CD44v6阳性物质主要见于癌细胞的细胞膜，少数见于胞浆内，在异性增生腺体及癌组织内的阳性率分
8、别为20%及64.3%，与在胃癌的表达差异有显著性（P＜0.01）。在高、中、低分化不同分化程度的胃癌组织的表达情况见表1。CD44v6表达的差异在高、低分化程度的胃癌组织中差异有显著性（P＜
