10-0尼龙线携载tgfβ2反义寡核苷酸的实验研究

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1、10-0尼龙线携载TGFβ2反义寡核苷酸的实验研究【摘要】目的：探讨10-0尼龙线携载TGFβ2反义寡核苷酸的的可能性。方法：将10-0尼龙线反复浸泡于TGFβ2反义寡核苷酸溶液中24h、48h、72h，溴化已锭(EB)标记后紫外透射分析仪下观察其吸附TGFβ2反义寡核苷酸情况，并将浸泡的缝线置于生理盐水中水浴，在不同的时间点取溶液用紫外分光光度计测其吸光度A值，进一步观察缝线携载TGFβ2反义寡核苷酸情况。结果：浸泡于TGFβ2反义寡核苷酸溶液中的10-0尼龙线经溴化已锭标记后紫外透射分析仪下不显色，各时间点缝线的水浴液A值与对照组差异无显著性。结论：

2、10-0尼龙线不能携载TGFβ2反义寡核苷酸。　　【关键词】缝线；反义寡核苷酸；瘢痕　　TheStudyof10-0nylonCarryingTGFβ2AntisenseOligodeoxynucleotide　　　　Abstract：ObjectiveToinvestigatethepossibilityof10-0nylonsuturecarryingTGFβ2antisenseoligodeoxynucleotide.MethodsThe10-0nylonsutureweresoakedinTGFβ2antisenseoligodeoxynucle

3、otidesolution6repeatedlyfor24h、48h、72h.ThenthesoakedsuturewerelabeledwithEBsolutionandobservedunderanultravioletlamp;thesoaked10-0nylonsuturewereemergedinnormalsalineandthevalueofabsorbance(A)wasmeasuredbyultravioletspectrophotometeratdifferenttimepoints.ResultsThesuturelabeledwithEBdi

4、dnotshowcolor.Thevalueofabsorbance(A)ofsoakedsuturehadnodifferencewithcontrolgroup.ConclusionThe10-0nylonsuturecannotcarryTGFβ2antisenseoligodeoxynucleotide.　　　　keywords：Suture;Antisenseoligodeoxynucleotide;Scar　　青光眼是一种常见的致盲眼病，目前仍以手术治疗为主，但青光眼滤过术后常常由于滤过通道瘢痕化而导致手术失败。据报道，青光眼滤过术后2年内复发率为

5、15%～30%［1］。如何减少青光眼术后滤过通道的瘢痕化是提高手术成功率的有效途径，目前从分子水平上抑制滤过通道的瘢痕化表现出良好的应用前景，但反义寡核苷酸治疗的关键是如何提高转染效率和避免全身副作用［2］。曲乐丰等［3］研究发现8青光眼是一种常见的致盲眼病，目前仍以手术治疗为主，但青光眼滤过术80薇乔缝线可携载c6myc反义基因，因眼科临床多用10-0尼龙线，若10-0尼龙线能携载反义基因片断，可为眼科术后减少瘢痕提供一个新的思路。本研究旨在探讨10-0尼龙线携载TGFβ2反义寡核苷酸的的可能性，现将结果报告如下。　　1材料和方法　　1.1主要试剂和器材1

6、0-0尼龙线：美国强生公司提供；TGFβ2反义寡核苷酸：根据兔TGFβ2mRNA序列(Genbank号AY429466)，由上海生工生物技术有限公司合成，21bp(序列为：3‘AGAAGTTGGCATTATACCCTT'5)，2端各4个碱基硫代磷酸化修饰；溴化已锭(EB)和TB溶液：由上海生工生物技术有限公司提供；紫外透射分析仪和紫外分光光度仪：均购自上海精密科学仪器有限公司。　　1.2缝线的准备和分组分为实验组(A组，10-0尼龙线组)、实验对照组(B组)、空白对照组(C组)。A、B组又分为三小组，A1组：将10-0尼龙线2.0cm浸于浓度为330g/L的TG

7、Fβ2反义寡核苷酸溶液中24h；A2组：A1组缝线晾干后再浸泡24h，共48h；A3组：A2组缝线晾干后再浸泡24h，共72h。B1、B2、B3组与A1、A2、A3组相同，只是TB溶液代替TGFβ2反义寡核苷酸溶液。C组的缝线不用特殊处理。　　1.3制备的缝线紫外线灯下检测A组、B组、C组的10-0尼龙线浸于EB溶液中1s后，置于紫外线灯下观察。6　　1.4制备的缝线紫外分光光度仪检测A组3根缝线经过以上处理后，置于0.5ml生理盐水中水浴震荡后，分别于1h、2h、3h取其溶液在紫外分光光度仪220nm和280nm处检测A值。　　2结果　　　　A组、B组、C