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《反义寡聚脱氧核糖核苷酸对猪促卵泡刺激素受体表达的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、反义寡聚脱氧核糖核苷酸对猪促卵泡刺激素受体表达的影响第6卷第3期Vol.6No.3中华男科学2000年9月Sep.2000NationalJournalofAndrology?论著?反义寡聚脱氧核糖核苷酸Ξ对猪促卵泡刺激素受体表达的影响朱长虹,熊忠明,肖慧珠()同济医科大学计划生育研究所,武汉430030()()摘要:目的:本研究旨在评价反义寡聚脱氧核糖核苷酸ODN对促卵泡刺激素受体FSHRmRNA表达的调节作用。方法:转染FSHR的CHO细胞系的mRNA水平用反转录2竞争性PCR方法进行定量测定。结果
2、:结果显示μμ用10mol/L反义ODN可导致mRNA表达显著上升,24h后mRNA水平从0189?0106pg/g总RNA升至1164?μμμ()0108pg/g总RNAP<0105。用0133mol/L反义ODN进行脂转染也得到相同结果,mRNA水平从0195?0108pg/gμ总RNA升高至1153?0107pg/g总RNA。这可能是由于FSHR蛋白翻译被抑制后上行调节mRNA合成所致,无义ODN对FSHRmRNA的表达没有任何作用。结论:本文结果提示针对猪FSHR翻译起始位点的反义ODN能上行调
3、节猪FSHRmRNA的表达水平。关键词:促卵泡刺激素受体;竞争性PCR;反义寡聚脱氧核糖核苷酸()中图分类号:Q523文献标识码:A文章编号:10082383920000320146204EffectofAntisenseOligodeoxynucleotideonExpressionofPorcineF2osltliicmleulatingHorRmecoenpet1orChang2HongZHU,Zhong2MingXIONG,Hui2ZhuXIAO()FamilyPlanningResearchI
4、nstitute,TongjiMedicalUniversity,Wuhan430030,ChinaAbstract:Objectives:ToassesstheroleofantisenseoligodeoxynucleotideinregulatingexpressionofFSHRgene1Methods:Porcinefol2licle2stimulatinghormonereceptormessengerribonucleicacidwasdeterminedbyreversetranscri
5、ption2competitivepolymerasechainreaction1μμResults:Theresultsshowedthatdirectculturewith10mol/LantisenseODNcausedaparadoxicalincreaseofmRNAfrom0189?0106pg/μμ()gtotalRNAto1164?0108pg/gtotalRNAP<01051Transfectionwithlipofectamineand0133mol/LantisenseODNcau
6、sedanin2μμcreaseofmRNAfrom0195?0108pg/gtotalRNAto1153?0107pg/gtotalRNA1ThiswasprobablyduetoupregulationofmRNAsynthesisresultingfrominhibitionofporcineFSHRproteintranslation1ThenonsenseODNhadnoeffectonporcineFSHRmRNA1Conclusions:Theseresultsindicatethatan
7、antisenseODNcorrespondingtotheregionofthetranslationstartsiteoftheporcineFSHRcDNAcanupregulatetheexpressionofporcineFSHRmessengerribonucleicacids1Keywords:Follicle2stimulatinghormonereceptor;Competitivepolymerasechainreaction;Antisenseoligodeoxynucleotid
8、e()人工合成的寡聚脱氧核糖核苷酸ODN作为一选择性阻断某一特异基因表达,从而阻止mRNA翻译1种新型的工具广泛地应用于细胞、组织和整体的生理蛋白质。尽管反义ODN作用的范围仍不能完全确2学机理研究。理想的反义ODN通过特异的序列杂交定,但杂交后抑制翻译过程是非常明显的。其干扰到RNA或者DNA,在不改变其他基因表达的情况下,蛋白合成可通过不同途径实现,与结合靶mRNA部位Ξ收稿日期:2000204225;修回日期:2000205226()
