实训 动物传染病病料采取、保存与动物尸体的处理

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1、实训传染病病料的采取、保存、运送及尸体的处理一、实训内容1、病料的采取、保存与运送2、传染病动物尸体的处理二、实训目标1、初步掌握传染病病料采取、保存和运送的方法。2、初步掌握传染病动物尸体的处理方法。三、材料准备1、器材:剪刀、镊子、手术刀、注射器、酒精灯、酒精棉、碘酊棉、灭菌棉签、标签、胶布、手套、无菌样品容器(小瓶、平皿等)、载玻片2、药品:消毒液、生理盐水、30%甘油盐水缓冲液、50%甘油盐水缓冲液、10%甲醛3、动物:新鲜的动物尸体四、方法、步骤病料的采取送检病料的记录与包装保存与运送传染病动物

2、尸体的处理(一)病料的采取1、注意事项根据不同的疫病或检验目的,采取相应的病料。进行流行病学调查、抗体检测等情况下,样品的数量应满足统计学的要求。无法确认病因时,应系统采集病料。采取内脏病料时,应尽快采集。器具和容器必须无菌。作好人身防护。怀疑炭疽的动物,严禁解剖。2、使用器械的消毒刀、剪、镊子等用具煮沸消毒30min,使用前用酒精擦拭,用时进行火焰消毒。器皿(玻制、陶制等)经103kPa高压30min,或经160℃干烤2h灭菌。注射器和针头放于清洁水中煮沸30min。一般要求使用“一次性”针头和注射器采

3、取一种病料。采过病料的用具应先消毒后清洗。3、活体采样①呼吸道应用灭菌的棉拭子采集鼻腔、咽喉或气管内的分泌物,蘸取分泌物后立即将拭子浸人保存液中。常用的保存液:pH7.2-7.1的灭菌肉汤或30%甘油盐水缓冲液,如准备将待检标本接种组织培养,则保存于50%甘油盐水缓冲液。②生殖道可采集阴道或包皮冲洗液,或者采用合适的拭子,有时也可用尿道拭子采集。③乳汁乳房先用消毒药水洗净(取乳者的手亦应事先消毒),并把乳房附近的毛刷湿,最初所挤的3-4把乳汁弃去,然后再采集10ml左右乳汁于灭菌试管中。进行血清学检验的乳

4、汁不应冻结、加热或强烈震动。④精液精液样品用人工方法采集,所采样品应包括“富精”部分,并避免加人防腐剂。⑤尿液的采集在动物排尿时,用洁净的容器直接接取。也可使用塑料袋,固定在雌畜外阴部或雄畜的阴茎下接取尿液。采取尿液,宜早晨进行。⑥脓汁用灭菌注射器无菌操作,抽取未破溃的脓肿深部的脓汁,置灭菌试管中。若为开口的化脓灶或鼻腔时,则用无菌棉签浸蘸后,放在灭菌试管中。⑦血液采血部位:猪可选用耳静脉或前腔静脉采血;禽类通常选择翅静脉采血,也可通过心脏采血。全血:采血时直接将血液滴入抗凝剂中,并立即充分混合。血清:采

5、取血液,置室温下静置至血液凝固,或低速离心分离。4、病料的取材操作解剖前检查→配制0.1%新洁尔灭→手术刀、剪、镊子等用具可浸泡消毒20分钟→剖检场地喷洒消毒→操作人员戴口罩、手套→用消毒液清洗病死动物尸体的污物及消毒→无菌操作有次序解剖→各个系统组织脏器的取材→病料取材完毕→病畜尸体的无害化处理→手术刀、剪、镊子等用过的工具浸泡消毒→场地消毒清洗干净。5、各种脏器及组织材料的选取操作(1)一般组织病原分离样品:(1)将淋巴结、肺、肝、脾及肾等有病变的部位,各采取1~2立方厘米的小方块,分别置于灭菌试管或

6、平皿中。组织病理学检查样品:将淋巴结、肺、肝、脾及肾等有病健交界的部位,各采取1~2立方厘米的小方块,分别置于10%福尔马林广口瓶中。(2)肠:用烧红刀片将欲采取的肠表面烙烫后穿一小孔,持灭菌棉签插入肠内,采取肠管粘膜或内容物;亦可用线扎紧一段肠道(约6厘米)两端,将两端以外切断,置于灭菌器皿内。(3)拭子样品:用灭菌棉拭子采集鼻腔、咽喉或气管的分泌物、泄殖腔的内容物。(5)皮肤:取大小约1.0×1.0平方厘米的皮肤一块。(6)胎儿:将流产后的整个胎儿,用塑料薄膜、油布或数层不透水的油纸包装,装入木箱内,

7、立即送往实验室。(7)骨:剔除表面肉、韧带,表面洒上食盐,然后用浸有5%石炭酸或0.1%升汞的纱布包扎,装入木箱或其他容器内。(8)脑、脊髓:浸入30%甘油盐水缓冲液中,或将整个头部割下包入浸过消毒液的纱布中,装入不透水的容器中。(9)胆汁或脓汁:先用烧红的刀片或铁片烙烫采样部位表面,再用灭菌吸管或注射器从烫烙部位刺入,吸取内部液体材料,盛于灭菌试管中。(10)小家畜及家禽:将整个尸体包入不透水塑料薄膜、油纸或油布中,装入木箱内,送往实验室。(11)抹片:每份病料2-4张,自然干燥后,彼此中间垫以火柴或纸

8、片,重叠后用线缠住,用纸包好。(二)病料的保存、包装和运送保存细菌检验病料:通常保存在灭菌液体石蜡、30%甘油缓冲盐水或饱。病毒检验病料:通常用50%甘油缓冲盐水或加有青、链霉素的磷酸缓冲盐水中或培养病毒用的维持液中保存、送检。血清学检验病料:如为固形病料(肝、脾、肾、皮肤、小块胃肠等),可用硼酸或食盐处理后包扎运检;液体病料(血清、渗出液)可在每毫升中加入3%~5%石炭酸液1~2滴,包装好后运送。长期保存的样品应-70℃超低

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