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1、病料的采取方法 1.脓汁先将表面流水线,然后以灭菌注射器或吸管抽取深部的浓汁;若是开口化脓灶或皮肤,粘膜表面化脓,可用灭菌棉拭子浸沾脓汁后,放入试管中. 2.内脏器官采取心,肺,肝,脾,肾等有病变的组织及其淋巴结,无病变时也要采取,无菌剪取1-2cm大的方块,分别装入灭菌容器内. 3.血液要全血时,无菌采取血液10m,立即注入盛有含0.5%肝素溶液0.1ml或5%柠檬酸钠液1ml的灭菌试管内,并立即混合均匀.要分离血清时,将无菌采取的血液直接注入灭菌试管,待血液自然凝固后分离血清.从尸体采取血液
2、时,可用灭菌注射器或吸管从右心房抽取. 4.皮肤和粘膜采取病变局部的皮肤和粘膜及其所属淋巴结,放入甘油盐水溶液中. 5.脑和脊髓无菌采取脑的脊髓约1-2cm大的方块,放入甘油盐水溶液中. 6.胆汁用灭菌注射器抽出后放入灭菌试管中. 7.肠和胃剪取有病变的部位一段或一块.也可将肠管一段(约6-8cm)用线扎紧两端后剪下送往实验室. 8.粪便可用棉拭子插入肛门沾取,或扑杀病畜后由肠管采取,立即放低温条件下保存. 9.乳汁先用消毒药液洗净乳头及其附近,弃去最初挤出的几滴乳汁,然后采取乳汁约10m
3、l放入灭菌试管内. 10.流产胎儿可将整个胎儿用塑料薄膜包紧,装入箱中送检. 11.小动物,禽和鱼等可按上述流产胎儿方式整体送检.在距离实验室很近,又有隔离运输条件时,也可将发病小动物直接送检. 病料的处理 采集的病料,在接种培养前,应对其性状进行观察,例如:是否脓性带血或腐败,有何异味,并作记录.各种病料在分离培养前均应制备一张涂片,作革兰氏染色,镜检,以了解细菌的形态,染色特性,并大致估计其含菌量.通过肉眼观察和显微镜下看到的结果,对病料中可能含有的病原菌作最初步的估价. 如果病料是病变组
4、织,又是用无菌方法采集的,在接种前一般无需作特别处理.但如果病料被杂菌污染严重,则需根据要分离的病原菌的特性,采用一些对病原菌无害,但对杂菌有杀灭或抑制作用的方法,以抑制杂菌生长.例如从粪便中分离沙门氏杆菌,可将粪合接种于亚硒酸钠肉汤中,作增菌处理.在这种培养基中,其它杂菌被抑制,而沙门氏杆菌则能自由繁殖.又如,分离布鲁氏杆菌,胎儿弯曲杆菌,炭疽杆菌,副结核杆菌可用选择性抗菌琼脂.分离链球菌和猪丹毒杆菌用叠氮钠结晶紫血琼脂等.如果从肠道内容物或从污染有不产生芽胞的杂菌培养物中分离能形成芽胞的细菌(如魏
5、氏梭菌,破伤风梭菌等),可将病料在80℃加热15分钟,以杀死不形成芽胞的杂菌,取此材料再接种培养基,即容易获得纯培养物.有些病料(如奶,尿等)含菌太少,则应先作集菌处理,然后接种,以提高检出率,其集菌方法有离心法和过滤法.离心法取沉淀物作培养物;过滤后取沉积于滤板上表面的病料作培养.还有些细菌往往在细胞浆内集结成团,在它们所形成的病灶中含菌较少,遇到这种情况,可将病料组织磨碎,制成乳剂,加入酶,酸或碱,消化组织,使菌团散开,然后离心,收集沉淀物作培养(如从肠粘膜分离副结核杆菌即用此法).病原性细菌致病
6、能力的强弱程度称为毒力.通常病原菌的毒力越大,其致病性就越强.同一种病原菌,因菌株数不同,致病力大小也不相同,它的毒力也有强毒,弱毒和无毒株之分.侵袭力和毒素构成细菌毒力,其物质基础是细菌的菌体结构和代谢产物。包括菌体表面的黏附结构,比如纤毛,外膜,水解酶,毒性代谢产物,包括脂多糖,蛋白质之类的,等等猪大肠杆菌病是由病原性大肠杆菌引起的仔猪一组肠道传染性疾病。常见的有仔猪黄痢、仔猪白痢和仔猪水肿病三种,以发生肠炎、肠毒血症为特征临床症状:仔猪黄痢治疗出现症状时再治疗,往往效果不佳。在发现1头病猪后,立
7、即对与病猪接触过的未发病仔猪进行药物预防,疗效较好。大肠杆菌易产生抗药菌株,宜交替用药,如果条件允许,最好先做药敏性试验后再选择用药。普美仙,肌肉注射,每天1次,连用3-5天。药物预防:仔猪出生后1天、7天、14天可用远征公司生产的普美仙或奥克米先注射0.5ml、1ml、1.5ml。综合性防疫卫生措施预防本病的关键是加强饲养管理,母猪分娩时专人守护,所产仔猪放在有干净垫草萝筐内,待产仔完毕后用0.1%高锰酸钾溶液清洗乳头。圈舍用生石灰消毒,注意保持猪舍环境清洁、干燥,尽可能安排母猪在春季或秋天天气温暖
8、干燥时产仔,以减少发病。产前母猪48h内用奥克米先10-15mL,分点肌肉注射,1d1次,或氧氟沙星0.3-0.4mg/kg肌肉注射,每天两次,连续给药两天进行预防。近年来在我国兴起的微生态制剂,如含无致病性嗜氧芽胞杆菌的康大宝,通过调节仔猪肠道内微生物区系的平衡,抑制有害大肠杆菌的繁殖而达到预防和治疗的目的。据近年来在江苏一些地区的试用情况来看,效果很好,值得进一步试用。另外,注意保持猪舍环境的清洁、干燥,尽可能安排在春、秋天气温暖干燥的季节产仔,可减