抗菌性生物碱 壮实鹿角珊瑚生物碱的体外抗菌活性

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1、抗菌性生物碱壮实鹿角珊瑚生物碱的体外抗菌活性一２５０一　江苏农业科学２０１４年第４２卷第１期　刘海青，刘富平，胡文婷．壮实鹿角珊瑚生物碱的体外抗菌活性［Ｊ］．江苏农业科学，２０１４，４２（１）：２５０—２５１　壮实鹿角珊瑚生物碱的体外抗菌活性　刘海青　，刘富平　，胡文婷　，　（１．20海南大学海洋学院热带生物资源教育部重点实验室，海南海口５７０２２８；２．海南大学海洋学院海洋生物实验教学中心，海南海口５７０２２８）　摘要：为获得低毒廉价新型鱼药，采用牛津杯法和试管二倍稀释法分别测定壮实鹿角珊瑚生物碱对溶珊瑚弧菌、　塔氏弧菌、鲨鱼弧菌的敏感性、最小抑菌浓度（ＭＩＣ）和

2、最小杀菌浓度（ＭＢＣ），并与对照环丙沙星进行比较。结果表明，　壮实鹿角珊瑚生物碱对３种弧菌的体外抗菌活性与环丙沙星相近。　关键词：壮实鹿角珊瑚；生物碱；病原性海洋弧菌；体外抗菌活性　中图分类号：￥４８２．２　９２　文献标志码：Ａ　文章编号：１００２—１３０２（２０１４）Ｏ１—０２５０—０２　病原性海洋弧菌是一群在海洋环境中最常见的条件致病　菌。霍乱弧菌和副溶血弧菌是引起人类细菌性食物中毒的首　１．１受试20菌种　溶珊瑚弧菌（Ｖｉｂｒｉｏ　ｃｏｒａｌｌｉｉｌｙｔｉｃｕｓ）、塔氏弧菌（Ｖｉｂｒｉｏ　ｔｕｂｉ—　要食源性致病菌…，大部分鱼类易患的弧菌病一般由溶藻弧　菌所引

3、起　，溶珊瑚弧菌则会导致杂色鲍幼苗急性死亡脱落　症大规模暴发，其毒性比溶藻弧菌更强　。为了预防水产动　物疾病，大量抗生素类药物被用作水产药物，但长期过度使用　又使得菌株的耐药性和抗生素残留问题日益突出。来源于自　ａｓｈｉｉ）、鲨鱼弧菌（Ｖｉｂｒｉｏ　ｃａｒｃｈａｒｉａｅ）由中国水产科学研究院南　海水产研究所提供。壮实鹿角珊瑚（Ａｃｒｏｐｏｒａ　ｒｏｂｕｓｔａ）采自海　南岛蜈支洲海域。　１．２培养基的制备　液体培养基：蛋白胨５　ｇ、酵母浸出膏１　ｇ－，磷酸铁０．０１　ｇ、　过滤陈海水１　０００　ｍＬ，ｐＨ值为７．６—７．８，１２20１　高压蒸汽灭　菌２０　ｍｉｎ备用。

4、　然界的生物碱类化合物资源丰富、抗菌谱广，对包括耐药菌在　内的菌株抗菌效果良好。经研究发现，珊瑚所处环境虽艰难　恶劣却极少被鱼类或其他生物捕食，而且能够排斥海藻生长，　固体培养基：蛋白胨５　ｇ、酵母浸出膏１　ｇ、磷酸铁０．Ｏ１　ｇ、　琼脂粉ｌ８　ｇ、过滤陈海水１　０００　ｍＬ，ｐＨ值为７．６～７．８，１２１℃　高压蒸汽灭菌２０　ｍｉｎ，置４℃冰箱保存备用。　１．３药液的制备　防止其他生物栖息，具有自身产生的各种次生代谢产物构建　的防御体系　Ｊ。所以，本研究以海南岛蜈支洲海域壮实鹿角　珊瑚为试验材料，提取生物碱及其他含氮杂环，以对水产品危　害较大的致病弧菌为受试菌种进

5、行抗菌活性筛选，希望获得　低毒廉价的抗菌活性良好的化合物，应用于弧菌病害的防治。20　１材料与方法　１．３．１体外抑菌试验药液的配制准确称取适量的药品，用　无菌蒸馏水分别配制成浓度为５００、１　０００￣ｇ／ｍＬ的药液各　１００　ｍＬ，经０．２２　ｍ的微孔滤膜过滤除菌后分装，使用前　配制。　１．３．２抗生素后效应（ＰＡＥ）药液的配制收稿日期：２０１３—０５—３０　用上述方法配制　１００、２００、４００倍的ＭＩＣ（最小抑菌浓度）的各种药液，１２１　ｏ20Ｃ高　基金项目：长江学者和创新团队发展计划（编号：ＩＲＴ１１２３）；海南省教　育厅高等学校科学研究资助（编号：Ｈｊｋｊ

6、）；海南大学青年基金（编　号：ｑｎｊｊｌｌ５１）。　压蒸汽灭菌２０ａｒｉｎ，一２０℃贮存备用，临用前稀释到所需要的　倍数。　１．４鹿角珊瑚生物碱的提取　作者简介：刘海青（１９７１一），女，山西大同人，硕士研究生，副教授，从　事天然产物活性研究。Ｔｅｌ：（０８９８）６６２８９５６７；Ｅ—ｍａｉｌ：８９２０３５８９２　＠ｑｑ．ｅｏｍ。　称取湿重壮实鹿角珊瑚４　ｋｇ的样品，粉碎，分为４份，每　份１　ｋｇ，分别加入珊瑚样品１０倍量的１％ＨＣ１、３０％乙醇、20　通信作者：刘富平（１９７４一），男，山西榆次人，博士，副教授，从事微生　物制药研究。Ｔｅｌ：（０８９８）６６２８９

7、５６７；Ｅ—ｍａｉｌ：８９２０３５８９２＠ｑｑ．ｃｏｍ。　７０％乙醇、９０％乙醇，回流提取１　ｈ。记录每份提取液的体积，　采用ＨＰＬＣ法测定珊瑚生物碱含量，以珊瑚生物碱含量作为　考察指标，结果表明，以７０％乙醇提取的珊瑚生物碱含量较　ｏｆ　ｃｉｔｒｕｓ　ｌｆａｖｏｎｏｉｄｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎｌａ　ｏｆ　Ａ　ｃｕｌｔｕｒａｌ　ｎｄａ　Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍｉｓｔｙ，ｒ　１９９７，４５（１２）：４５０５—４５１５．　［３］陈文娟，陈丽娇．大黄鱼鱼卵磷脂提取及磷脂成分分析［Ｊ］．福　建农林大学学报：自然科学版，２０１２，４１（４）：４９８—５０２．　［４］夏树林，潘燕龙．