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《无血清专用培养基体外快速培养临床级树突状细胞的实验探讨》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、无血清专用培养基体外快速培养临床级树突状细胞的实验探讨2006年第33卷第l1期中国肿瘤临床无血清专用培养基体外快速培养临床级树突状细胞的实验探讨术摘要目的:探讨采用无血清专用培养基从肺癌患者外周血单核细胞快速培养树突状细胞(DCs)的方法.方法:将l0例肺癌患者外周血单核细胞同时采用含人AB型血清培养基和无血清DCs专用培养基(DCMedium)培养.5例于第7天加入促成熟细胞因子组合,第9一l0天收获成熟DCs,另5例于第5天加入促成熟细胞因子组合.且TNF—oL剂量加大5倍.第7天收获成熟DCs.结果:DCMedium培养的DCs形态变化快,细胞出现突起的时问早
2、;9～l0天收获的两种培养基培养的DCs性能无差异;7天收获的DCs中.DCMedium培养的DCs得率和纯度,共刺激分子表达水平,刺激T细胞增殖能力均优于含血清培养基.结论:无血清DCs专用培养基可以在体外快速培养临床级DCs.为肿瘤免疫治疗奠定基础.关键词树突状细胞无血清培养基免疫治疗中图分类号:I订34.2文献标识码:A文章编号:1000—8179(2OO6)l1一o6o5_o4RapidInVitroGenerationofClinicalGradeDendriticCellsinSerum—freeMediulnZhouQingWuYilongGuoAili
3、netalDepartmentofThoracicSurgery,the3rdHospitalAffiliatedtoSunYat-senUniversity,CancerCenter,GuangdongProvincialPeopleHospital,LungCancerResearchInstitute;GuangzhouAbstractObjective:Toexplorerapidgenerationofmaturedendriticcellsfromperipheralbloodmononuclearcells(PBMC)inserum-freemedium
4、.Methods:ThePBMCoflOpatientswithlungcan—cerwereculturedinDCmediumcontaining5%ABhumanserumandinserum-fleeDCmedium.Cy—tokineswereaddedonthefifthdayortheseventhdaytopromotematuration,andthe7一dayculturesshowedincreasedlevelsoftiNF-or.Results:PBMCchangedtoDCsrapidlyinDCmedium.Inthe9to10一dayc
5、ultures.therewasnodifferencebetweenthetwomedia.Inthe7一daycultures.DCsculturedinDCmediumalonehadhigheryield,higherpurity,higherlevelsofcostimulatorymolecules,andhigheractivitythanthoseculturedinDCmediumwithABhumanserum.Conclusion:ClinicalgradeDCscanbeculturedrapidlyinserum—freeDCmediuman
6、dcanbeusedintumorimmunotherapy.KeywordsDendriticCellsSerum—freemediumImmunotherapy树突状细胞(Dendriticcells,DCs)是近十年来研究得最为深入的抗原提呈细胞,以DCs为基础构建肿瘤疫苗是最有希望的肿瘤疫苗.在目前建立的多种体外培养DCs的方法中.最经典的是在含胎牛血清的培养基中添加细胞因子从外周血单核细胞诱导DCs,为了减少异种血清的不良反应,我们已将该本文课题受卫生部科学研究基金(编号:98—2—377);广东省科技厅重点基金资助(编号:99M04903G.2KM0440
7、2S)(肿瘤中心通讯作者:吴一龙gzyilong@hotmail.corn中国肿瘤临床20al6年第33卷第ll期方法改良为采用含人AB型血清的培养基….然而,血清在为DCs的生长提供必要营养成分的同时,复杂的蛋白及抗原成分也会影响DCs的功能,其I临床应用安全性也一直受到质疑.本研究探讨了无血清DCs专用培养基体外培养I临床级DCs的方法.1材料与方法1.1材料RPMI一1640购自Gibco公司:人重组细胞因子购自PeproTechEC公司.检测DCs表型的单抗购自Pharmingen公司;M1Tr和DMSO为Sigma公司产品:淋巴细胞分离液购
