gleevec诱导顺铂耐药卵巢癌细胞coc1凋亡的形态学研究

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1、Gleevec诱导顺铂耐药卵巢癌细胞COC1凋亡的形态学研究【摘要】目的探讨Gleevec对顺铂耐药卵巢癌细胞COC1的诱导凋亡作用。方法用Gleevec处理COC1细胞，采用MTT法检测Gleevec联合顺铂对细胞增殖的影响。HE染色显微镜下观察细胞，电镜下观察细胞形态学的变化。结果Gleevec显著提高了COC1/DDP对顺铂的敏感性(P<0．05)；2.5～10μg／ml顺铂与1.0μmol/LGleevec合用表现为协同作用,2.5～10μg／ml顺铂与2.5～10μmol/LGleeve

2、c合用表现为相加作用。在Gleevec的作用下COC1细胞呈现明显的凋亡改变，形成凋亡小体。结论Gleevec能够诱导顺铂耐药卵巢癌细胞COC1的凋亡。　【关键词】Gleevec顺铂卵巢癌耐药StudyandInvestigationabouttheeffectofGleeveconinductionofapoptosisinOvarianCancercellZHENGYi,etal.HarbinMedicalUniveristy,Harbin,Heilongjiang150086China【Ab

3、stract】ObjectiveThestudywasdesignedtoinvestigatetheeffectofGleeveconinductionofapoptosisinOvarianCancercell.MethodsMTTassaywasusedtoanalyzeinhibitoryeffectofGleevecandwithDDPonCOC1cell.ThechangesofapoptosiswereobservedwithHEstaininginvertmicroscopeand

4、transmissionelectronmicroscope.ResultsGleevecenhancedCOC1/DDPcellssensitivitytoDDPsignificiantly(P<0.05);2.5～10μg/mlDDPwith1.0μmol/LGleevecperformancedthefunctionofconjunction,2.5～10μg/mlDDPwith2.5～10μmol/LConclusionsTheGleeveccaninducethe

5、apoptosisofdrug-resistantovariantumorcellenhancetheapoptosisofdrug-resistantovariancarcinomacellinducedbyDDP.【Keywords】GleevecDDPOvarycancerDrugresistance细胞凋亡是一种与细胞坏死具有不同形态及生化特征且受基因调控的主动性细胞死亡。恶性变是肿瘤细胞丧失自发凋亡反应能力的最终结果,和耐药与凋亡减少有关。因此诱导耐药肿瘤细胞产生凋亡更有价值。本研究以卵

6、巢癌细胞系COC1的耐铂类亚株COC1/DDP为研究对象来探讨Gleevec诱导卵巢癌耐药细胞凋亡的作用机制。为临床提高耐药卵巢癌的治疗效果提供实验依据。1材料与方法1．1材料COC1/DDP细胞株购自武汉大学中国典型培养物保藏中心,由中国医学科学院肿瘤研究所建株;Gleevec购自瑞士诺华公司;DDP购自江苏豪森制药厂;四甲基偶氮哇蓝(MTT)、二甲基亚砜(DMSO)均为Sigma公司产品;PRMI-1640培养基购自GIBCO公司；电镜（EM208S荷兰飞利蒲）。1．2方法1．2．1细胞培养及

7、实验分组COC1/DDP细胞株在含有10%胎牛血清、100U/ml青霉素、100U/ml链霉素、0.5μg/mlDDP的RPMI-1640培养基中,37℃、5%CO2混合气体的培养箱中培养。细胞换液为24～48h,取对数生长期细胞进行实验。1．2．2顺铂、Gleevec联合用药对COC1细胞增殖的影响收集对数生长的细胞，细胞计数密度为1.5×106/ml,以100μl/孔接种于96孔培养板，37℃、5%CO2培养箱培养12h，以1500转/min离心10min,弃去培养液，

8、加入含不同浓度的药物的培养基200μl，顺铂选取0、1.25、2.5、5.0、10μg/ml5个浓度，Gleevec选取0、0.5、1.0、2.5、5.0、10μmol/L6个浓度，设对照、单药、联合共30种组合，每组设3个复孔。加药后继续培养72h，每孔加入MTT(5mg／ml)20μl，继续培养4h后以1500转/min离心10min，弃培养液，每孔加入DMSO200μl，振荡10min,全自动酶标仪测570nm吸光度（A570）。用以下公式计算两