高效液相色谱法分离测定废水中的苯和甲苯

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1、高效液相色谱法分离测定废水中的苯和甲苯一、实验目的?1、了解LC-20AT高效液相色谱仪的流路和电路，学会仪器的基本操作；?2、掌握高效液相色谱基本的定性定量方法；?3、了解色谱参数N、K、R的意义和计算方法。二、原理与技术方法简介：高效液相色谱是色谱分析的一个重要分支，是在经典液相色谱的基础上发展起来的一种现代仪器分析方法方法特点：高压、高效、高速、高灵敏度分析对象：高沸点、热不稳定有机及生化、环境试样等根据流动相和固定相的相对极性不同可以将高效液相色谱分为正相色谱和反相色谱。正相色谱：流动相极性小，常为非极性的烷烃；固定相极性大，通常为硅

2、胶、纤维素等；反相色谱：流动相极性大，通常为水-甲醇溶液、水-乙腈溶液等；固定通常为键合的C18、C8、C4、Phenyl等，极性较弱。?反相高效液相色谱的应用相对较广泛。定性依据：保留值定性、峰高增量法定性、与其它方法联用。定量参数：峰高、峰面积、相对峰高、相对峰面积等。定量方法：外标法、内标法、归一化法分配系数K在色谱法中，当样品加入后，样品中各组分在固定相和流动相间发生的吸附、脱附，或溶解、挥发的过程叫做分配过程。在一定温度下，组分在两相间分配达到平衡时的浓度比，称为分配系数，用K表示。如果各组分在固定相中的分配系数不同，它们就有可能达

3、到分离。1.一定温度下，组分的分配系数K越大，出峰越慢；2.试样一定时，K主要取决于固定相性质；3.每个组份在各种固定相上的分配系数K不同；4.选择适宜的固定相可改善分离效果；5.试样中的各组分具有不同的K值是分离的基础；6.某组分的K=0时，即不被固定相保留，最先流出。分离度分离条件的选择主要是提高“难分离物质对”的分离度三、实验用品LC-20AT高效液相色谱仪超声波清洗器微孔过滤装置2、试剂：甲醇（AR）、苯（AR）、甲苯（AR）、二次蒸馏水四、操作步骤1、液相色谱分析条件检测器：二极管阵列检测器流动相：甲醇-水（体积比）=9：1流速：1

4、mL/min检测波长：254nm进样量：20μL2、准备工作3、方法的编辑4、运行样品5、注意事项五、数据处理采用LC-20AT高效液相色谱仪化学工作站数据处理程序处理数据。1、用外标直接比较法计算各物质的含量；2、定性分析；