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1、%B3%A8射液对吸烟致大鼠肺气肿模型肺内VEGF...新中医2008年2月第40卷第2期JOURNALO「NEWCH}NESEMED}C}NEFEBRUARY2008Vol.40N0.2实验研究[文章编号]0256一7415(2008)02一0095一02丹参注射液对吸烟致大鼠肺气肿模型肺内VEGF表达的影响许银姬，林琳，周明娟广东省中医院，广东广州510120[摘要」目的:观察丹参注射液对吸烟致大鼠肺气肿模型肺内血管内皮生长因子(vEGF)表达的影响。方法:建立吸烟致大鼠肺气肿模型，观察丹参注射液对肺气肿大鼠血清、肺组织匀浆中VEGF含量及肺组织内VEGF表达的影响。结果:

2、丹参注射液可减轻吸烟致肺气肿大鼠模型血清及肺组织匀浆中VEGF含量的降低，增强肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞中丫EGF的表达结论:丹参注射液可能通过调节VEGF的表达而阻抑吸烟致肺气肿的发生。!关键词」丹参注射液;肺气肿;血管内皮生长因子类;疾病模型，动物;大鼠l中图分类号}R285.5:R259.633;R一332!文献标识码]A肺气肿是现今严重影响人类健康的重大疾病之一。吸烟是鼠VEGF试剂盒为晶美公司产品，认真按说明书进行操作，测肺气肿最主要的病因，而血管内皮生长因子(vascula:en(lothe一定结果在酶标仪(波长450nm)读光密度值，绘制标准曲线，求lialgr

3、owthfactor，vEcF)与肺气肿的发生有关，但是关于得血清VEGF的相对含量。③肺组织匀浆vEGF含量测定。取VEGF在吸烟相关肺气肿发病过程中的作用研究尚未深人。丹左肺组织称重后，于预冷的100%甲醇液中进行匀浆、离心、参可抑制多种细胞vEGF的表达或抑制vEGF引起的血管通透取上清液备测。检测方法同血清VEGF含量测定。④肺组织性的增加，但是对吸烟相关肺气肿肺组织中VEGF的表达的影VEGF免疫组化染色。组织切片常规染色、水化;PBS冲洗3响研究尚少。故笔者进行了丹参注射液对吸烟致大鼠肺气肿模次，每次3分钟;3%过氧化氢室温孵育10~巧分钟，消除内型肺内vEGF表达

4、影响的实验研究，结果报道如下。源性过氧化氢酶;PBS冲洗3次，每次2分钟;在抗原修复液1材料与方法中高压1.5分钟，自然冷却;加一抗孵育，室温60分钟;缓，.1动物分组和处理37只sD大鼠，SPF级，体重120~冲液洗3次，每次3分钟;加二抗孵育，室温30分钟;缓冲巧鲍，由广州中医药大学实验动物中心提供(合格证号液洗3次，每次3分钟;选择DAB显色;复染、封片。0004773)。随机分为空白组(14只)、模型组(10只)、丹参组1.3统计学处理采用SPSSI1.0软件包，计量资料以(无士(13只)。空白组置于室内正常喂养模型组参照李红梅法川、)表示，各组之间比较用单因素方差分析

5、;等级资料采用秩和建立大鼠肺气肿模型放人吸烟箱中，每次燃烧10支香烟(红检验。双喜牌，广州卷烟二厂生产)，约0.5小时，每天2次，每周2结果5天，连续l月并在第l、14天经气管注入11雌/mL内毒素2.1血清vEGF含量比较见表1。血清vEGF含量，空白200协L。丹参组造模方法同模型组，并于每次吸烟前腹腔注射组最高，丹参组次之，模型组最低，3组间比较，差异均有非丹参注射液Zml·kg一’(广东永康药业股份有限公司生产，批号常显著性意义(尸<0.01)。703058)。2.2肺组织匀浆VEGF含量比较见表2。肺组织匀浆1.2标本采集及检测①光镜观察。以2%戊巴比妥钠vEGF含量

6、，丹参组最高，空白组次之，模型组最低，3组间50mg·kg一’腹腔注射麻醉大鼠后，气管插管，完整取下右比较，差异均有非常显著性意义(尸<0.01)。肺，向气管内灌注4%多聚甲醛内固定备用。取材时再放人2.3肺组织病理学改变比较光镜下模型组大鼠气管赫膜下4%多聚甲醛中固定24小时，常规石蜡包埋、切片模型组、腺体增生肥大，淋巴细胞、浆细胞等炎细胞浸润，支气管纤毛丹参组的病理切片，若镜下见肺泡壁破坏明显，甚至融合，肺柱状上皮层增厚，皱褶高耸，纤毛脱落，杯状上皮细胞化生;气肿形成，则为造模成功分别观察丹参组与模型组肺组织在呼吸细支气管、肺泡道、肺泡腔扩大，形成小叶中央性肺气光镜下的病理

7、改变。②血清vEGF含量测定。所有大鼠均静脉肿。丹参组大鼠支气管壁出现以淋巴细胞为主的炎症细胞浸采血ZmL，分离出血清备测采用双抗体夹心ELIsA法，大润，纤毛脱落及杯状上皮细胞化生较模型组轻;仅少量肺泡壁【收稿日期12007一09一21[基金项目]广东省中医药管理局课题资助项目f编号:103002)[作者简介]许银姬(197】一)，女，副主任医师，主要从事中西结合诊治呼吸系统疾病的临床研究。新中医2008年2月第40卷第2期JOURNALOFNEWCH!NESEMED}C}NEFEBRUA