微生物学笔记(武汉大学)3

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1、微生物学笔记(武汉大学)3微生物学笔记(武汉大学)3第七章1939年，MaxDelbruck&EmoryEllis对噬菌体（E.coli/bacteriopage）生长特征的测定：1、用噬菌体的稀释液感染高浓度的宿主细胞；2、数分钟后，加入抗噬菌体的抗血清（中和未吸附的噬菌体）；3、将上述混合物大量稀释，终止抗血清的作用和防止新释放的噬菌体感染其它细胞；4、保温培养并定期检测培养物中的噬菌体效价（对噬菌体含量进行计数）；5、以感染时间为横坐标，病毒的感染效价为纵坐标，绘制出病毒特征性的繁殖曲线；有尾噬菌体：注射方式将噬菌体核酸注入细胞1）通

2、过尾部刺突固着于细胞；2）尾部的酶水解细胞壁的肽聚糖，使细胞壁产生小孔；3）尾鞘收缩，核酸通过中空的尾管压入胞内，蛋白质外壳留在胞外；λ噬菌体的的溶源性反应：1）早期基因表达，产生gpcII，gpcro及gpcIII，后者可防止宿主的裂解酶对gpcII的降解。2）gpcII的积累促使阻遏蛋白cI的表达3）阻遏蛋白cI的积累导致噬菌体基因转录的终止，形成原噬菌体。3）早期表达的gpcro与cI的竞争最终确定λ噬菌体是进入溶源状态，还是进入裂解循环。4）（gpcro表达得早，但与基因组的结合能力较cI弱）5）阻遏蛋白cI的同样可以抑制其它新侵入

3、的λ噬菌体的表达，从而使溶源性细菌具有“免疫性”6）阻遏蛋白cI在一般情况下通过自身的转录激活保持低水平的表达，但有时种种原因转录水平下降，会偶尔导致溶源性噬菌体进入裂解循环（10-5~10-2）。7）外界因素如紫外线可引起宿主的染色体的破坏，宿主产生应急反应合成具有DNA重组活性的RecA蛋白，导致cI的被降解，噬菌体进入裂解循环。8）诱发裂解是检查是否存在溶原性细菌的有效方法第八章遗传型：是指生物所携带的全部遗传因子及基因，是遗传的物质基础；表型（表现型）：具有一定遗传型的个体，在特定环境条件下通过生长发育所表现出来的形态等生物学特征的

4、总和。表型饰变：同样遗传型的生物，在不同的外界条件下，会呈现不同的表型，但这种表型的差异只与环境有关，表现为暂时性和不可遗传性，并且表现为全部个体的行为！遗传型变异（基因变异、基因突变）：由于环境因素等的影响，导致遗传物质改变，导致生物特性改变，与表型的饰变相比，这种变异是可以遗传的，而由于遗传物质的变异的频率一般很低，所以这种变异也常常表现为群体中极少数个体的行为（突变频率通常10-6-10-9）。基因组（genome）一个物种的单倍体的所有染色体及其所包含的遗传信息的总称。微生物基因组结构的特点：1、原核生物（细菌、古生菌）的基因组1）

5、双链环状的DNA分子（单倍体），2）基因组上遗传信息具有连续性，大肠杆菌和其它原核生物中基因数基本接近由它的基因组大小所估计的基因数；一般不含内含子，遗传信息是连续的而不是中断的。3）功能相关的结构基因组成操纵子结构操纵子（operon）：功能相关的几个基因前后相连，再加上一个共同的调节基因和一组共同的控制位点（启动子、操作子等）在基因转录时协同动作。4）结构基因的单拷贝及rRNA基因的多拷贝，5）.基因组的重复序列少而短；古生菌的基因组在结构上类似于细菌。但是信息传递系统(复制、转录和翻译)则与细菌不同而类似于真核生物。具体内容在微生物遗

6、传学中学习2、真核微生物（啤酒酵母）的基因组1）典型的染色体结构该基因大小为13.5×106bp，分布在16条染色体中。象所有其它的真核细胞一样，酵母菌的DNA也是与四种主要的组蛋白(H2A、H2B、H3和H4)结合构成染色质(chromatin)的14bp核小体核心DNA；染色体DNA上有着丝粒(centromere)和端粒(telomere)，2）没有明显的操纵子结构，3）有间隔区（即非编码区）和内含子序列。而原核生物中非编码区或内含子均非常少，而人类基因组测序后发现了大量的非编码区，被称为基因组上的荒漠，估计只有5-10%用于编码基

7、因。4）重复序列多质粒的检测：a）　提取所有胞内DNA后电镜观察；b）　根据质粒的分子大小和结构特征，通过超速离心或琼脂糖凝胶电泳可将质粒与染色体DNA分开c）　对于常用菌，可用质粒所带的某些特点，如抗药性初步判断。（一般将菌点在相应的抗性平板上，若抗性还在，证明质粒可能还在，否则则可能质粒已经丢失，在实验中经常采用这种方法对含质粒的菌株进行初步检测）d）但这种方法并不保险，因为质粒可能会整和到染色体上，或者细菌由于某种突变而产生抗药性等。产细菌素的质粒（Bacteriocinproductionplasmid）抗生素抑制或杀死近缘，甚至同

8、种不同株的细菌较广的抗菌谱通过核糖体直接合成的多肽类物质一般是次级代谢产物编码细菌素的结构基因及相关的基因一般位于质粒或转座子上一般无直接的结构基因，相关酶的基因多在染色体上很多