ova-cdte-znse核壳量子点探针制备及其应用

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1、OVA-CdTe/ZnSe核壳量子点探针制备及其应用[摘要]目的：制备CdTe/ZnSe核壳量子点标记卵清白蛋白（OVA）探针OVA-CdTe/ZnSe，并检测其特异性荧光示踪作用。方法：将CdTe/ZnSe核壳量子点与OVA偶联制备荧光探针，通过凝胶电泳和光谱分析鉴定偶联效果；然后示踪OVA致敏的小鼠外周血嗜碱粒细胞（BASO）表面IgE高亲和力受体FcεRI。结果：偶联OVA后的量子点分子量增加，荧光增强且荧光峰位从628nm红移至635nm。通过激光共聚焦显微镜能清晰观测到OVA-CdTe/ZnSe探针对BASO表面IgE-FcεRI复合物的荧光标记。结论：OVA-CdT

2、e/ZnSe探针能示踪OVA特异性IgE-FcεRI复合物，此探针在OVA致敏动物模型的特异性IgE检测中具有一定应用价值。[关键词]CdTe/ZnSe核壳量子点；免疫荧光标记；鸡卵清白蛋白；IgE[中图分类号]R392-3[文献标识码]A[文章编号]1673-7210（2011）11（c）-019-03Preparationandfluorescence-imagingapplicationofOVA-CdTe/ZnSecore/shellquantumdotsNIBin,HUHuajun*10DepartmentofPharmacy,CollegeofLifeScience

3、,ChinaJiliangUniversity,ZhejiangProvince,Hangzhou310018,China[Abstract]Objective:ToestablishamethodtodetecttheIgE-FcεRIonBASOcellsbyusingCdTe/ZnSecore/shellquantumdots(QDs)immuno-fluorescencelabelingtechnology.Methods:CdTe/ZnSecore/shellQDswerecoupledtotheOVAwithN-hydroxysuccinimide(NHS).Aft

4、erconfirmationbyagarosegelelectrophoresismethodandspectraanalysis,thecoupledproduct(OVA-CdTe/Znse)wasusedtodetecttheIgE-FcεRIonBASOcells.Results:SpectraanalysisshowedthatthefluorescenceintensityofOVA-CdTe/Znsewasenhancedandtheemissionpeakunderwentared-shiftfrom628nmto635nm.Confocalfluorescen

5、cemicroscopyfurthershowedthatOVA-IgE-FcεRIonBASOcellscharacterizedbytheredfluorescence.Conclusion:OVA-CdTe/ZnsefluorescenceprobescaneffectivelyrecognizeIgE-FcεRIonBASOcells,whichcanbeusedinallergicanimalmodelfordetectingOVAspecific10IgE.[Keywords]CdTe/ZnSecore/shellquantumdots;Immuno-fluores

6、cencelabeling;OVA;IgE支气管哮喘（bronchialasthma，简称哮喘）属于过敏性疾病的一种，其发病机制复杂，目前全球约有3亿哮喘患者，被WHO列为四大顽症之一。鉴于人体试验的局限性，对哮喘的干预研究往往通过建立与人相似症状的动物模型来进行。常用的哮喘动物（大鼠、小鼠、豚鼠）模型都存在不足之处。如豚鼠致敏后的变态反应与人类的不同，其更多由IgG介导；大鼠、小鼠制作的哮喘模型能产生特异性IgE，可临床指征不明显[1]。因此有必要寻找和开发新的哮喘动物模型。但哮喘新模型的开发还面临一个具体问题，即除大鼠、小鼠、豚鼠外的其他实验动物在卵清白蛋白（OVA）致敏后

7、，因缺乏血清OVA特异性IgE的检测试剂，使致敏效果难以判断，这也阻碍了新模型的开发[2]。根据外周血嗜碱粒细胞（BASO）表面的IgE高亲和力受体FcεRI的密度与血清IgE水平有较好的相关性[3]。可研制一种OVA荧光探针，用于对OVA致敏动物的外周血BASO细胞表面IgE高亲和力受体FcεRI进行荧光标记，通过其荧光示踪可知该动物的致敏效果。量子点（quantum10dots，QDs）荧光标记技术是近些年发展起来的一项新型荧光示踪技术。本研究利用巯基丁二酸为表面修饰剂合成的水溶性CdT