谷物中赖氨酸的含量

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1、11不同品种豆类赖氨酸含量研究1引言1.1国外研究概况赖氨酸的研究始于国外，1889年德莱赛尔首先用酸水解法从酪蛋白水解物中分离出赖氨酸和精氨酸混合物。1891年弗雪及德莱赛尔分别从上述混合物中分离到纯的赖氨酸。1902年弗雪与韦特用合成法制成赖氨酸并确定了赖氨酸的化学结构。1957年加拿大理查德等人从600株霉菌中筛选得到两株黑粉菌，这两株黑粉菌能发酵生成0.2～0.3g/l赖氨酸；同时都伦纳用同一菌进行培养研究，使赖氨酸生成量提高至0.7～0.8g/l；其后,汉斯肯又将生成量提高1.95g/l，这是最早有关发酵法生成赖氨酸的研究。虽然赖氨酸被发现的

2、很早，但是赖氨酸的工业生产却是在半个多世纪以后，1958年日本的木下祝郎、中山清等采用紫外线照射谷氨酸棒杆菌得到了一株高丝氨酸（或苏氨酸＋蛋氨酸）的营养缺型变异株，使赖氨酸生成量达到工业生产水平。既然赖氨酸被应用到工业生产中那么就不得不面临一个问题：即怎样测定一种物质中是否含有赖氨酸，含有多少，是否值得工业生产。那么赖氨酸含量的测定作为一个新课题开始被科学家们所重视。如：Sanger(1945)首倡，Roach等(1976)改进的氟二硝基甲苯法(FDNB)，该法的主要误差来源于待测样中碳水化合物的干扰，对热处理的影响也不够敏感，所以只适用于专门的对比试

3、验参考。由Carpenter和Roach(1967)首倡，Kakade和Liener（1969）改进的三硝基苯磺酸(TNBS)试剂测定有效赖氨酸的分析程序，此后十年间此法被多次提到并应用，该法利用蛋白质中的赖氨酸残基的ε氨基与TNBS的磺酸基发生特异性不可逆取代反应，形成三硝基苯（TNP）复合物，在367nm和420nm波长处有特征光吸收，以此测定蛋白中自由氨基含量，但是,此法操作很复杂,要求条件较高。随后Tsai（1972）提出了2-氯-3，5-二硝基吡啶（CDNP）法测定赖氨酸含量，比之前的方法简便一些但还是很复杂。直到Hurrell(197619

4、78)提出染料结合法（DBL）法测定谷物中有效赖氨酸，此法不需要复杂的水解过程，测定时间也比之前的几种方法短很多。在此之后科学家们又提出了2，4，6-三硝基苯-1-磺酸法，此法是TNBS法的改进法，此法最初用来测定玉米种子中赖氨酸含量，改进的方法经济、准确和快速,可以用来测定大量玉米谷物中的有效赖氨酸。此后越来越多的测定赖氨酸的方法被提出，如高效液相色谱(HPLC)法、氨基酸分析仪法等，这些方法大多都是以前的方法改进而来的，向更简单准确的方向发展。1.2国内研究概况国内对此研究的比较晚，但进展很快，取得的成果也很骄人。我国比较早比较成熟的方法是赵铁男等

5、（1982）提出的染料结合法（DBL）法，此法是他们在借鉴了国外的技术后提出的更简单更准确的方法，而且他们制定的标准11不同品种豆类赖氨酸含量研究曲线后来人也一直在用。此外他们还在对实验结果进行分析后发现温度是DBL法测定稻米赖氨酸含量的主要影响因子，并通过实验证明,在室温范围内以18—34℃为最佳测定温度,低于18℃测定结果明显比仪器值偏低；金承泽（1988）提出用非水电位滴定法测定赖氨酸含量，此法按非水滴定原理使用自动电位滴定计能够准确简便地测定其含量。张书贤（1996）提出了用旋光仪检测添加剂中赖氨酸含量的方法。现在又有一些的研究方法如：近红外光

6、谱分析（NILS）法、生物传感器法等，可见国内赖氨酸测定方法已经很成熟，而且更准确方便。1.3研究背景及意义蛋白质是构成人体细胞的主要成份，食物中的蛋白质进入人体后经过消化先分解成氨基酸，然后人体又利用这些氨基酸再合成新的人体蛋白质，如免疫抗体、消化酶、血浆蛋白、生长激素等都是合成后的人体蛋白质。在合成蛋白质的各种氨基酸中，赖氨酸（Lys）是最重要的一种，少了它，其它氨基酸就受到限制或得不到利用，所以它被称为是人体第一必需氨基酸。赖氨酸学名二氨基己酸，化学结构简式为H2NCH2CH2CH2CH2CH(NH2)COOH，含有2个氨基(-NH2)和1个羧基

7、(-COOH)，是一种具有明显碱性的氨基羧酸。按光学活性分,赖氨酸有L型（左旋）、D型（右旋）和DL型(消旋)3种构型。只有L型才能为生物所利用，通常所说的赖氨酸均指L型。L型赖氨酸呈针状晶体，在210℃变暗，在224.5℃下分解,易溶于水,微溶于醇，不溶于醚。除了是第一必需氨基酸外赖氨酸还可以调节人体代谢平衡，往食物中添加少量的赖氨酸，可以刺激胃蛋白酶与胃酸的分泌，提高胃液分泌功效，起到增进食欲、促进幼儿生长与发育的作用。赖氨酸为合成肉碱提供结构组分，肉碱负责将一些不饱和脂肪酸转化为能量，还有助于降低胆固醇水平。在身体中赖氨酸还有其他功效。它和其他营

8、养一起形成胶原蛋白。胶原蛋白在结缔组织，骨骼，肌肉，肌腱和关节软骨中扮演了重要角色。此外，赖氨