青医现代生化技术复习题——详细答案,可以自行省略

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1、2011年现代生化复习题1、简述天平的种类、电子天平的使用方法及注意事项1、天平的种类:台秤（感量1000mg,称实验动物体重）托盘天平（感量100mg,粗称固体试剂）电子天平（感量1mg,0.1mg，0.01mg称固体试剂）按精度分可分为两类①粗天平：（感量）十分之一（100mg）（感量）百分之一（10mg）粗天平主要用来称取较多样品或用于配制浓度要求不高的试剂称量。②分析天平：（感量）千分之一（1mg）万分之一（0.1mg）十万分之一（0.01mg）分析天平则用于基准物的称量和配制标准溶液及少量样品的称量。2、电子天平的使用（1）电子天平使用方法①核实天平是否处于水平状态；

2、②开机预热；③取称量纸一张，对折后方天平称量台上；④按去皿键，使天平显示值为0.00g；⑤轻轻叩打试剂瓶，徐徐倒入试剂；⑥取除过量的试剂弃掉；⑦ 关闭电源；⑧清理称量台及天平周围。（2）使用电子天平几个注意事项：①将天平置于稳定的工作台上避免振动、气流及阳光照射。②在使用前调整水平仪气泡至中间位置。③电子天平应按说明书的要求进行预热。④称量易挥发和具有腐蚀性的物品时，要盛放在密闭的容器中，以免腐蚀和损坏电子天平。⑤经常对电子天平进行自校或定期外校，保证其处于最佳状态。⑥如果电子天平出现故障应及时检修，不可带“病”工作。⑦ 操作天平不可过载使用以免损坏天平。⑧若长期不用电子天平时

3、应暂时收藏为好。2、简述微量移液器的使用及注意事项微量移液器的握法：手掌握住器液器，拇指按压。微量移液器的使用：（1）设定容量：调节体积至所需的刻度。（不允许超出额定范围调整）（2）吸液:①接上Tip头。连续按压数次，以调节空气。②按下控制钮至第一档；③将移液器吸嘴垂直进入液面下1-6mm（视移液器容量大小而定）；④为使测量准确可将吸嘴预洗3次，即反复吸排液体3次。⑤使控制钮缓慢滑回原位；⑥移液器移出液面前略等待1-3秒；缓慢取出吸嘴，确保吸嘴外壁无液体。（3）排液:①Tip头贴住容器内壁；②平稳地把按钮压至第一停点，1秒钟后再压至第二停点；③将剩余液体排净；松开控制钮；④然后

4、按压弹射键弹射出吸嘴。（4）养护：①如液体不小心进入活塞室应及时清除污染物；②移液器使用完毕后，把移液器量程调至最上线，垂直放置在移液器架上；③根据使用频率所有的移液器应定期用肥皂水清洗或用60％的异丙醇消毒，再用双蒸水清洗并晾干；④避免放在温度较高处以防变形致漏液或不准；发现问题及时找专业人员处理。5）注意事项：①垂直吸液、慢吸慢放；②选择合适的量程范围，不能超过量程使用；③选择与移液器匹配的枪头，安装枪头时不要用力太猛；④移液器每日用完后，应旋到最大刻度。⑤当移液器吸嘴有液体时切勿将移液器水平或倒置放置，以防液体流入活塞室腐蚀移液器活塞；⑥需要高温消毒的移液器应首先查阅所使

5、用的移液器是否适合高温消毒后再行处理。1、分光光度技术的理论依据是什么？如何用分光光度法测定被测物质的浓度？分光光度技术（分光光度法）是利用物质对某种波长的光具有选择性吸收的特性建立起来的鉴别物质或测定其含量的一项技术。其理论依据是Lambert和Beer定律。一、光吸收基本定律——Lambert-Beer定律当一束单色光通过溶液时，一部分被吸收，一部分则透过溶液。设入射光强度为I0，透射光强度为I，I和I0之比称为透光度（Transmittance，T）：T=I/Io透光度的负对数称为吸光度（Absorbance，A）或光密度(O.D.)则可表示为A=-lgT。根据Lambe

6、rt-Beer定律，吸光度与溶液的浓度成正比，与光束通过溶液的距离(即光程)成正比，用数学表达式表示为：    A=KCL    式中C代表该物质的浓度，L代表光程，一般以cm表示。当C的单位用mol·L－1，L为1cm时，常数K用ε表示，其单位为L·mol－1·cm－1，ε称为摩尔吸光系数，此时上式变为：A=εCL摩尔吸光系数ε:是待测物质浓度C为1mol·L－1，液层厚度为1cm时，在特定波长下所具有的吸光度。摩尔吸光系数是物质对某波长的光的吸收能力的量度。ε越大，吸收光的能力越强，相应的分光度法测定的灵敏度就越高。根据比尔定律，物质在一定波长处的吸光度与浓度之间有线性关系

7、。因此，只要选择一定的波长测定溶液的吸光度，即可求出浓度。标准曲线：配制一系列不同浓度的标准溶液,按测定管方法进行吸光度测定。以吸光度为纵坐标，以标准液浓度为横坐标，绘出一条曲线，此曲线即称为标准曲线又叫做校正曲线或工作曲线。在相同条件下测出样品溶液的吸光度，从标准曲线上查出浓度。2、简述分光光度计的使用及注意事项仪器的使用时应注意：      1、预热仪器：l打开电源开关，使仪器预热20min。l为了防止光电管疲劳，预热仪器时和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开，使光路切断。2、选定波长：根据