鸦胆子不同药材及部位中鸦胆子苦醇含量分析

《鸦胆子不同药材及部位中鸦胆子苦醇含量分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、鸦胆子不同药材及部位中鸦胆子苦醇含量分析刘丽摘要：建立中药鸦胆子苦醇的高效液相色谱检测方法，测定鸦胆子不同药材及同一药材不同部位中鸦胆子苦醇的含量。采用SepaxSapphireC18色谱柱（250mm×4.6mm，5µm），乙腈—水溶液（体积比为40:60）为流动相，流速为1.0mL·min-1，检测波长235nm，柱温30℃。鸦胆子苦醇在质量浓度为61.6～1060µg·mL-1呈良好的线性关系，平均回收率为100.87%，RSD为2.01%。同一药材不同部位，仁中鸦胆子苦醇最高，壳中最少；对不同药材，大药材中的鸦胆子苦醇是小药材中的2.6倍。结果表明鸦胆子同一药材不同部位及

2、不同质量的药材中，鸦胆子苦醇含量差异比较大。关键词：鸦胆子；鸦胆子苦醇；不同部位；HPLC中图分类号：TS201.1文献标识码：A鸦胆子（Bruceajavanica(L.)Merr.），又名鸭蛋子、老鸭胆、苦参子、苦榛子等，属苦木科鸦胆子属植物，为常绿大灌木或小乔木[1]。在我国，鸦胆子主要生长在沿海热带和亚热带的福建、海南、广东、广西和云南等地。作为传统中药，性苦寒，鸦胆子具有清热解毒、止痢疾、治鸡眼等功效[2]。鸦胆子的主要成分包括鸦胆子苦素、鸦胆子苦内酯、鸦胆子苦醇、生物碱、糖甙、鸦胆子油等。目前关于鸦胆子中非极性化合物功效的研究较多，例如李英、孙波、李福星等人的研究[3

3、,4,5]。鸦胆子极性部分主要为具有抗肿瘤活性的四环三萜苦木内脂类化合物，包括鸦胆子苦醇、鸦胆因、鸦胆子苦素、双氢鸦胆子苦醇等。杨正奇等证实鸦胆子苦醇对黑色素瘤L1210和P388等瘤株具有显著抑制效果[6]，林隆泽等研究发现鸦胆子苦醇对S180瘤株有边缘活性[7]，此外鸦胆子苦醇还有抗白血病、抗胰腺癌等功效[8,9]。目前的研究主要集中在利用HPLC单一地检测鸦胆子中苦木内酯的含量[10,11]，而利用高效液相色谱对鸦胆子大小药材以及大药材各个部位中鸦胆子苦醇进行含量测定及比较分析的研究，并未见报道。1仪器与材料1.1仪器创新通恒LC3000高效液相色谱仪（UV3000紫外检测

4、器，P3000高压输液泵）；KH5200E超声波清洗器（超声频率40KHz,功率200w，昆山禾创）；JF1004型万分之一电子天平（余姚金诺）；小型粉碎机。1.2材料鸦胆子苦醇标准品（HPLC纯度不低于98%）；甲醇（色谱纯）；乙腈（色谱纯）；蒸馏水；鸦胆子大药材和鸦胆子小药材，购自四川成都药材市场，经四川大学生命科学学院药用天然产物实验室鉴定为植物鸦胆子的干燥果实。大药材圆润饱满，小药材颗粒较小且仁少。2方法和结果2.1色谱条件SepaxSapphireC18色谱柱（250mm×4.6mm，5µm）；流动相：乙腈—水溶液（体积比为40:60）；流速1.0mL·min-1；检测

5、波长235nm；柱温30℃；理论塔板数不低于5000。按上述色谱条件，分别精密吸鸦胆子苦醇取供试品及对照品溶液，进样检测。两者在相应位置，有相同保留时间的色谱峰。鸦胆子苦醇的高效液相色图见图1。图1对照品HPLC图注：1：鸦胆子苦醇Fig.1HPLCchromatogramsofreferencesubstanceNote:1:brusatol2.2对照品溶液的制备精密称取鸦胆子苦醇对照品，于10mL容量瓶中加甲醇溶解完全并定容至刻度线，得到对照品溶液。精密吸取对照品溶液，加甲醇分别稀释成溶度为1060、636、308、154、61.6µg·mL-1。2.3供试品溶液的制备鸦胆子

6、大药材壳、仁分离，将鸦胆子大药材壳、鸦胆子大药材、鸦胆子大药材仁、鸦胆子小药材碾碎。分别称取四种药材各5.0012g于100mL锥形瓶，加入20mL甲醇，称定质量。常温放置过夜后超声30min，静置后再称定质量，加甲醇补足减少部分并摇匀。经0.45µm微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试样品。2.4标准曲线的绘制精密吸取质量浓度为1060、636、308、154、61.6µg·mL-1对照品溶液各10µL，按“2.1”色谱条件进样检测。以对照品浓度（X）为横坐标，峰面积（Y）为纵坐标，绘制标准曲线[11]。结果表明，鸦胆子苦醇在质量浓度为61.6～1060µg·mL-1之间与峰面积有良

7、好的线性关系，得到的回归方程为Y=10796X-16952（r=0.9994，n=5）。2.5精密度试验吸取同一苦醇对照品溶液10µL，按“2.1”色谱条件重复进样5次，结果显示峰面积RSD为1.4%，表明仪器精密度良好。2.6重复性试验按“2.3”供试品溶液制备的方法，同时制备三份质量浓度相同的鸦胆子大药材仁供试品溶液，在“2.1”色谱条件下，RSD为2.5%，表明该方法重复性良好。2.7稳定性试验精确吸取“2.3”鸦胆子大药材仁供试样品15µL，按“2.1”色谱条件，分别在制