ahl分子荧光法检测质粒的构建

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1、---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------AHL分子荧光法检测质粒的构建摘要：群体感应是细菌生长到一定密度时相互感应，并进行基因表达及调控产生的独特、多样的群体行为现象。N-酰基高丝氨酸内酯（N-acyl-homoserinelactones，AHL）类化合物是革兰阴性菌群体感应中最重要的一类信号分子，调控许多生理特性基因的表达。快速

2、、简便、有效地检测细菌能否产生AHL或产生何种信号分子，成为深入研究和了解细菌群体感应的重要手段。本论文试图构建一个含有绿色荧光蛋白基因的生物传感器，通过该生物传感器在含AHL的培养液中的荧光产生情况来检测环境中的AHL是否达到值域。试验方法主要使用pLuxGFPuv2和pLuxR两种质粒通过PCR扩增，酶切和拼接等操作构建含有GFP基因的检测质粒并转化宿主，观察biosensor在含AHL的培养基中的产荧光情况。4509关键词：群体感应；AHL信号分子；生物传感器；检测Constructionofaplasmidfordetecti

3、ng31/31---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------Acyl-homoserinelactonesAbstract:Quorumsensingistheunique,diversegroupbehaviorphenomenonoccurredwhenthebacteriumgrowstoacertaindensityandresp

4、onsesmutually,anditisresponsibleforthegeneexpressionandtheregulation.Manygram-negativebacteriaareknowntouseacylhomoserinelactones(acyl-HSLs)asintercellularsignals,calledautoinducers,indensitydependentgeneexpression,autoinducersathighcelldensitiescanachievecriticalconcen

5、trationandactivatetheexpressionofspecificgenes.Rapid,simpleandefficientdetectionofbacteriawethercanproducesignalmoleculesAHLorotherkindsofsignalmolecules,becomeimportantmeansofin-depthstudyandunderstandofbacteriumquorumsensing.Biosensormethodwasusedinthispaperattemptedt

6、odetectwhetherthesignalconcentrationreachesathresholdlevel.WechoseplasmidpLuxGFPuv2andplasmid31/31---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------pLuxR,usingwaysofPCR,enzymedigestionandligationto

7、constructanovellasmidwhichcontainsGFP.Theplasmidwasthantransformedintoahostandthecaseofthebiosensorproducingfluorescencecanbewatched.不同的细菌在繁殖过程中分泌不同的信号分子来调控基因的表达，这种信号分子利用信号分子在细胞间扩散，来感知自身和周围环境中其他菌群的数量变化，当信号分子浓度达到一定阈值时就启动菌体相关基因表达，调控相关生物学功能[5]。如产生毒素、形成生物膜、产生抗生素、生成孢子、产生荧光等，

8、以适应环境的变化，我们将这一现象称为群体感应调节（quorumsensing，QS）。这一感应现象只有在细菌密度达到一定阈值后才会发生，所以也有人将这一现象称为细胞密度依赖的基因表达（celldensityde-pend