食用菌栽培技术复习题 第三章

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1、食用菌栽培技术复习题第三章第三章菌种的生产与保藏一、菌种培育技术人工培育的菌种有母种、原种和栽培种之分。母种（一级菌种）：用孢子分离或组织分离等培育的菌丝体称为母种。原种（二级菌种）：把母种扩大到木屑、棉籽壳等为主的培养料上的菌种称为原种。栽培种（三级菌种）：由原种扩大培养成为生产上使用的菌种称为裁培种。菌种：实质上就是经过人工培养并进一步繁殖的食用菌的纯菌丝体。制种程序：孢子分离种菇组织分离——→母种（一级）↓接种——→原种（二级）↓接种——→栽培种（三级）经过这样三级培养，食用菌菌丝数量大大增加。一般每支试管可繁殖4~6瓶原种，

2、每瓶原种又可扩大繁殖60~100瓶栽培种。㈠、菌种生产常用的设备和用具1、接种设备：⑴接种室；⑵接种箱；⑶超净工作台2、灭菌设备：高压蒸气灭菌锅；2）常压菌锅3、培养设备：⑴培养室；⑵恒温箱4、培养菌种的容器母种：试管原种、栽培种：菌种瓶，菌种袋等。5、接种工具：接种针、环、刀、钩、铲、锄、枪等；6、消毒药品常用的消毒药品有：⑴70%酒精：一般用于手、种菇表面消毒；⑵0.1%升汞：常用于玻璃器皿、非金属器械及种菇表面消毒；⑶0.1%KMnO4：一般用于用具、器皿消毒；⑷5%石炭酸：喷洒墙壁、地面及擦洗桌面等，也可用来苏尔代替；⑸2%

3、来苏尔：（用法同上）⑹甲醛（福尔马林）：用于菇房和接种箱空间消毒；方法：关闭门窗消毒，自行气化；用量：10ml甲醛＋5gKMnO4／ｍ３。㈡、母种生产技术1、母种培养基⑴配方（马铃薯葡萄糖琼脂培养基，PDA）马铃薯200g、葡萄糖（或蔗糖）20g、琼脂20g、H2O1000ml、pH6.5；⑵配制方法（以PDA为例）马铃薯（去皮、去芽眼）→切成片→称取200g＋1000mlH2O→煮沸————→双层纱布过滤→取滤液并补足1000ml＋琼脂→熔化＋其它营养物质→调节pH（HCl或NaOH）→分装试管→灭菌（高压蒸气灭菌20—30min

4、）→制成斜面→检查灭菌效果（即28~30℃培养2~3d）2、母种分离母种分离方法主要有：孢子分离，组织分离，基质分离⑴孢子分离法：利用孢子在适宜培养基上形成菌丝来获得纯菌种的方法。A单孢子分离法：培养基上只接种1个担子孢子，使它萌发成菌丝体而获得纯菌种的方法。如：双孢蘑菇、草菇单个孢子分离得到菌丝便能结实。B多孢子分离法：许多孢子接种于同一培养基上，使它们萌发自由交配来获得纯菌种的方法。如：香菇、平菇、金针菇、毛木耳等。担子菌亚门中，约10%菌类属同宗结合，90%以上是异宗配合，所以单孢子分离对大多数食用菌不适用，只有育种时才采用。

5、多孢子分离简单易行，生产上经常采用。⑵组织分离法组织分离：指通过菇体组织分离纯种。优点：操作简便、取材广泛、不易变异，保持原菌种优良种性。方法：①选择种菇（出菇早、无病虫害、柄短、肉厚、大小适中、5~6分成熟）②组织分离选择种菇→表面消毒（75%酒精或0.1%升汞）→撕成两半→取菌柄菌盖交界处→小块菌肉→移入PDA→培养→观察→转管→纯种。上述分离物在25℃下，经3~5d可看到分离物表面长出白色绒毛状丝，每隔1~2d检查1次，随时淘汰霉菌、细菌污染的培养物，培养10~15d，再作1次转管即得到纯种。注：⑴取组织块不要贪大，因组织块小

6、易定植；⑵有些食用菌不易用组织分离法获纯种；如：红菇、乳菇等，因它们菇体细胞体细胞已泡束化，再生能力极弱；又如银耳和木耳等胶质菌，子实体中菌丝含量极少，组织分离法不易成功。而只能取其生长的基质即菇木、耳木。⑶基内菌丝分离法（基质分离法）：（常用于银耳及木耳）由菇木、耳木、培养料等食用菌生长基质中的菌丝分离培养而成。这是利用潜在于寄主组织内的菌丝体获得纯种的方法。方法：取1~2cm厚菇木、耳木（子实体着生部位）→去皮→消毒（75%酒精或0.1%升汞浸泡1min）→切去四周木块→切成火柴杆粗细，0.5cm长的小木梗→取1根放入试管斜面上

7、→培养→取菌丝→转管纯化3、菌种提纯与扩大繁殖⑴提纯：选稀疏单菌落→边缘取菌→接种试管斜面（3~5支）→培养→纯菌种⑵扩大繁殖：提纯的母种或从有关单位引进的母种，数量均很少，应扩大繁殖后再用。注：在母种扩大繁殖时，最好一次多移些，不易多次转管，以免影响出菇率，降低产量和质量。4、质量检验：对分离、引进或转管扩大的菌种，应经过质量鉴定，选优去劣，方可使用。⑴检验方法：①外观鉴定：优良菌种：菌丝浓白、粗壮、富有弹性，则生命力强。老化菌种：菌种已收缩、干燥或菌丝体自溶产生了大量红褐色液体，说明生活力弱，不可使用。㈢、原种和栽培种的生产技术

8、1、常用培养料的配方和配制方法木屑—米糠培养料：木生菇类，如：木耳、银耳、香菇；培养料草茎或草粪—厩肥培养料：草生菇类，如：蘑菇、草菇；棉籽壳—米糠培养料：多种菇类。2、培养基（料）配制原则⑴掌握碳氮比例：菌丝体生长阶段：C／Ｎ=20