大肠菌群检测方法

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1、厦门富竑工贸有限公司大肠菌群测定方法文件编号：起草人年月日颁发部门：品管部审核人年月日生效日期：年月日批准人年月日分发部门：各部门起草原因：□新订□修订说明：一.检验范围本标准适用于出口食品及其原料。二.设备和材料1.超净工作台：琼脂平板在工作台上暴露15min,每平板不得超过15个菌落。2.恒温培养箱：36±1℃。3.恒温水浴箱：45±1℃。4.吸管：1mL、10mL，具0.1mL刻度。5.稀释瓶：300mL三角锥形瓶。6.显微镜。7.试管：150x150，18x180mm三.培养基和试剂1.月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（LST）2.煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）3.8.5

2、‰生理盐水四.样品制备（以上述平板菌落制备的样品为测定大肠菌群的样品匀液）五.大肠菌群的测定1.大肠菌群MPN值的测定（1）对每个样品，选择适宜的三个连续稀释度的样品稀释液。1：10稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管10ml；1：100和1：1000稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管1ml。（2）将接种管置于36±1℃培养48±2h。（1）观察试管的产气情况：检查导管内是否有气泡产生，如所有LST肉汤管均未产气，则可报告为大肠菌群阴性；如有产气者，则进一步作证实试验。2.大肠菌群的证实试验（1）将所有产气管用直径为3mm的接种环移

3、种到煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤管中。（2）置BGLB肉汤管于36±1℃培养48±2h。（3）记录所有BGLB肉汤管的产气管数。（4）结果报告：按BGLB肉汤管产气管数，查MPN表报告每克（毫升）样品大肠菌群的MPN值。六.MPN检索表阳性管数MPN100m（g）阳性管数MPN100m（g）1ml（g）×30.1ml（g）×30.01ml（g）×31ml（g）×30.1ml（g）×30.01ml（g）×3000001002003010011012013020021022023030031032033100101102103110111112113120121122123

4、130131132133〈30306090306192120629312016094130160190367211015073110150190110150200240160200240290200201202203210211212213220221222223230231232233300301302303310311312313320321322323330331332333911402002601502002703402102803504202903604405302303906409504307501200160093015002100290024004600

5、11000〉11000注：1.本表采用3个稀释度1ml（g），0.1ml（g），0.01ml（g），每稀释度3管。2.表内所列检样量如改用10ml（g），1ml（g），0.1ml（g）时，表内数字应相应降低10倍；如改用0.1ml（g），0.01ml（g），0.001ml（g）时，表内数字应相应增加10倍；其余可类推。