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时间:2018-07-26
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1、厦门富竑工贸有限公司大肠菌群测定方法文件编号:起草人年月日颁发部门:品管部审核人年月日生效日期:年月日批准人年月日分发部门:各部门起草原因:□新订□修订说明:一.检验范围本标准适用于出口食品及其原料。二.设备和材料1.超净工作台:琼脂平板在工作台上暴露15min,每平板不得超过15个菌落。2.恒温培养箱:36±1℃。3.恒温水浴箱:45±1℃。4.吸管:1mL、10mL,具0.1mL刻度。5.稀释瓶:300mL三角锥形瓶。6.显微镜。7.试管:150x150,18x180mm三.培养基和试剂1.月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST)2.煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLB)3.8.5
2、‰生理盐水四.样品制备(以上述平板菌落制备的样品为测定大肠菌群的样品匀液)五.大肠菌群的测定1.大肠菌群MPN值的测定(1)对每个样品,选择适宜的三个连续稀释度的样品稀释液。1:10稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤,每管10ml;1:100和1:1000稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤,每管1ml。(2)将接种管置于36±1℃培养48±2h。(1)观察试管的产气情况:检查导管内是否有气泡产生,如所有LST肉汤管均未产气,则可报告为大肠菌群阴性;如有产气者,则进一步作证实试验。2.大肠菌群的证实试验(1)将所有产气管用直径为3mm的接种环移
3、种到煌绿乳糖胆盐(BGLB)肉汤管中。(2)置BGLB肉汤管于36±1℃培养48±2h。(3)记录所有BGLB肉汤管的产气管数。(4)结果报告:按BGLB肉汤管产气管数,查MPN表报告每克(毫升)样品大肠菌群的MPN值。六.MPN检索表阳性管数MPN100m(g)阳性管数MPN100m(g)1ml(g)×30.1ml(g)×30.01ml(g)×31ml(g)×30.1ml(g)×30.01ml(g)×3000001002003010011012013020021022023030031032033100101102103110111112113120121122123
4、130131132133〈30306090306192120629312016094130160190367211015073110150190110150200240160200240290200201202203210211212213220221222223230231232233300301302303310311312313320321322323330331332333911402002601502002703402102803504202903604405302303906409504307501200160093015002100290024004600
5、11000〉11000注:1.本表采用3个稀释度1ml(g),0.1ml(g),0.01ml(g),每稀释度3管。2.表内所列检样量如改用10ml(g),1ml(g),0.1ml(g)时,表内数字应相应降低10倍;如改用0.1ml(g),0.01ml(g),0.001ml(g)时,表内数字应相应增加10倍;其余可类推。
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