微生物学实验指导

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1、塔里木大学微生物学实验指导适用专业：汉族本科制定单位：生命科学学院微生物学教研室主编：张利莉龚明福编者（以姓氏笔画为序）张利莉张琴赵小亮贺江舟范君华龚明福2007年4月68目录一、课程的性质和任务2二、教学要求与教学方法3三实验内容及课时安排4实验一油镜的使用及细菌显微形态的观察5实验二培养基的制备及灭菌8实验三环境中微生物的检测14实验四细菌的简单染色与革兰氏染色19实验五细菌特殊形态观察23实验六放线菌的形态观察28实验七真菌形态观察31实验八土壤微生物的分离与计数35实验九微生物大小的测定40实验十环境因素对微生物生长的影响45实

2、验十一阿拉尔地区饮用水水质的微生物学检测51实验十二塔里木盆地荒漠土微生物区系分析54实验十三生物防治微生物的分离和筛选56四附录58Ⅰ染色液的配制58Ⅱ常用培养基的配方6368一、课程的性质和任务课程性质：微生物学实验是一门大学本科的基础课实验。微生物学实验的技术和方法已广泛渗透到生命科学的各分支领域,不断发挥其独特的作用。特别是随着分子生物学的发展与拓宽，微生物学方法与技术显得尤为重要。此外，医学、农学、林学等学科，甚至地质学、太空学等也需要微生物的方法与技术。因此，熟悉掌握微生物学方法与技术，对其它学科的发展有直接的影响。课程任务

3、：1.微生物学实验主要任务是使学生掌握研究与应用微生物的主要方法与技术，包括经典的、常规的、以及现代的方法与技术，使学生具有从事相关学科的基础理论研究与实际生产应用的微生物学实验技能。2.与微生物学基础理论课紧密结合，使学生将理性知识与感性认识有机地结合，将书本知识用于实验，在实验中更深地理解基础理论，提高学生的综合能力与创新意识。3.提高学生分析问题和解决问题的能力。根据本学科的特点，逐步使学生认识微生物的基本特性，比较它们与其它生物的相似和不同之处，知道如何研究微生物以及对研究中所出现的问题进行分析，并加以解决。68二、教学要求与教

4、学方法1.教学要求1) 注重微生物学基础实验技能的掌握与提高，克服盲目追求新颖而忽视基础的倾向；2) 实验课前要预习，明确每次实验的目的与基本步骤；3) 在实验中要有严紧的科学态度，尊重事实与实验结果，要善于发现新现象；4) 树立密切合作的风气，包括学生与老师、班与班、组与组、组长与组员之间的紧密配合。2.教学方法1) 以学生自己动手为主，老师在适当时间予以提示；2)对实验中所出现的一些现象多向学生提出问题，使它们学会分析结果，并与理论知识有机结合；3) 根据实验的进行程度，引导学生更深入思考，逐步树立他们的创新意识；4)严格要求使操作

5、规范化，老师作示范，强调要点，学生自行练习。68三实验内容及课时安排编号实验名称实验类型课时1实验一油镜的使用及细菌显微形态的观察验证性32实验二培养基的制备与灭菌验证性33实验三环境中微生物的检测验证性24实验四细菌的简单染色、革兰氏染色验证性35实验五细菌特殊结构观察验证性36实验六放线菌的形态观察验证性27实验七真菌形态观察验证性38实验八土壤微生物的分离与计数验证性39实验九微生物大小的测定验证性210实验十环境因素对微生物生长的影响验证性211实验十一阿拉尔地区饮用水水质的微生物学检测综合性412实验十二塔里木盆地荒漠土微生物

6、区系分析综合性613实验十三生物防治微生物的分离与筛选设计性10合计4668实验一油镜的使用及细菌显微形态的观察一、目的要求1、理解显微镜油镜的使用原理，掌握显微镜油镜的使用方法；2、了解细菌形态多样性。二、基本原理油镜，即油浸接物镜。当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时，由于空气与玻片的密度不同，使光线发生折射或全反射，降低了视野的照明度。若中间的介质是一层油（其折射率与玻片的相近），则几乎不发生折射，增加了视野的进光量，从而使物象更加清晰。油浸物镜的工作距离（指物镜前透镜的表面到被检物体之间的距离）很短，一般在0.2mm以内，再

7、加上一般光学显微镜的油浸物镜没有“弹簧装置”，因此使用油浸物镜时要特别细心，避免由于“调焦”不慎而压碎标本片并使物镜受损。图1干燥物镜与油浸系统镜光线通路三、实验器材1、菌株68单杆菌、链杆菌、双球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌、螺旋菌等。2、仪器及其他显微镜、擦镜纸、液体石蜡、乙醚、酒精四、实验内容以制备的各种细菌标本片包括杆菌（单杆菌、链杆菌）、球菌（双球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌）、螺旋菌为材料观察细菌形态。五、方法与步骤油镜的使用（1）先用粗调节旋钮将镜筒提升（或将载物台下降）约2cm，并将高倍镜转出；（2）在玻片标本的

8、镜检部位加一滴液体石蜡；（3）从侧面注视，用粗调节旋钮将载物台缓缓地上升（或镜筒下降），使油浸物镜浸入液体石蜡中，使镜头几乎与标本接触；（4）从接目镜内观察，放大视场光阑及聚光镜上的虹彩光圈（带视场光阑油镜