生物化学试验指导书(任)

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1、生物化学实验指导适用专业：农学、植物保护、园艺、农产品质量与安全、中草药栽培与鉴定贵州大学农学院生化与分子生物学教研室2007年8月目录生物化学实验室规则1实验记录及实验报告2实验一植物DNA的提取与测定3实验二蛋白质的两性性质及等电点测定7实验三温度、pH及酶的激活剂、抑制剂对酶活性的影响9实验四还原糖和总糖的测定—3,5-二硝基水杨酸比色法12实验五糖的颜色反应和定性鉴定14实验六双缩脲法测定蛋白质含量19附录21附录1生物化学实验基本操作21附录2实验样品的制备25附录3常用试剂的配制26附录4市售常用酸、碱的浓度26附录

2、5一般化学试剂的分级27附录6易变质及需特殊方法保存的试剂27附录7标准缓冲液的配制28附录8常用缓冲液的配制方法29附录9干燥剂36附录10硫酸铵饱和度的常用表37附录11离心机转数(r/min)与相对离心力(RCF)的换算38生物化学实验室规则1．每个同学都应该自觉遵守课堂纪律，维护课堂秩序，不迟到，不早退，不大声谈笑。2．实验前必须认真预习，熟悉本次实验的目的、原理、操作步骤，懂得每一操作步骤的意义和了解所用仪器的使用方法，否则不能开始实验。3．实验过程中要听从教师的指导，严肃认真地按操作规程进行实验，并把实验结果和数据及

3、时、如实记录在实验记录本上，文字要简练、准确。完成实验后经教师检查同意，方可离开实验室。4．实验台面应随时保持整洁，仪器、药品摆放整齐。公用试剂用完后，应立即盖严放回原处。勿使试剂、药品洒在实验台面和地上。实验完毕，仪器洗净放好，将实验台面抹拭干净，才能离开实验室。5．使用仪器、药品、试剂和各物品必须注意节约。洗涤和使用仪器时，应小心仔细，防止损坏仪器。使用贵重精密仪器时，应严格遵守操作规程，发现故障须立即报告教师，不得擅自动手检修。6．实验室内严禁吸烟！加热用的电炉应随用随关，严格做到：人在炉火在，人走炉火关。乙醇、丙酮、乙醚

4、等易燃品不能直接加热，并要远离火源操作和放置。实验完毕，应立即拨去电炉开关和关好水笼头，拉下电闸。离开实验室以前应认真、负责地进行检查水电，严防发生安全事故。7．废液体可倒入水槽内，同时放水冲走。强酸、强碱溶液必须先用水稀释。废纸屑及其他固体废物和带渣滓的废物倒入废品缸内；不能倒入水槽或到处乱扔。8．要精心使用和爱护仪器，如使用分光光度计时，不能将比色杯直接置于分光光度计上，并注意拿放比色杯时，不要打碎。仪器损坏时，应如实向教师报告，并填写损坏仪器登记表，然后补领。9．实验室内一切物品，未经本室负责教师批准，严禁带出室外，借物必

5、须办理登记手续。10．每次实验课由班长或课代表负责安排值日生。值日生的职责是负责当天实验室的卫生、安全和一切服务性的工作。27实验记录及实验报告每次实验要做到课前认真预习，实验操作中仔细观察并如实记录实验现象与数据，课后及时完成实验报告。一、课前预习实验课前要将实验名称、目的和要求、实验内容与原理、操作方法和步骤等简单扼要地写在记录本中，做到心中有数。二、实验记录从实验课开始就要培养严谨科学作风，养成良好习惯。实验条件下观察到的现象应仔细地记录下来，实验中观测的每个结果和数据都应及时如实地直接记在记录本上，记录时必须使用钢笔或圆

6、珠笔，并做到原始记录准确、简练、详尽、清楚。如称量试材样品的重量、滴定管的读数、分光光度计的读数等，都应设计一定的表格准确记下正确的读数，并根据仪器的精确度准确记录有效数字。例如，光密度值为0.050，不应写成0.05。每一个结果至少要重复观测两次以上，当符合实验要求并确知仪器工作正常后再写在记录本上。另外，实验中使用仪器的类型、编号以及试剂的规格、化学式、分子量、准确的浓度等，都应记录清楚，以便总结实验完成报告时进行核对和作为查找成败原因的参考依据。如果发现记录的结果有怀疑、遗漏、丢失等，都必须重做实验。三、实验报告实验结束后

7、，应及时整理和总结实验结果，写出实验报告。按照实验内容可分为定性和定量两大类，实验报告的格式：实验序号，实验名称；（1）目的和要求（2）内容与原理（3）主要仪器及试剂配制（4）操作方法与实验步骤（5）结果与讨论定性实验报告中的实验名称和目的要求是针对该次实验课的全部内容而必须达到的目的和要求。在完成实验报告时，可以按照实验内容分别写原理、操作方法、结果与讨论等。原理部分应简述基本原理。操作方法（或步骤）可以流程简图的方式或自行设计的表格来表示。结果与讨论包括实验结果及观察现象的小结、对实验课遇到的问题和思考题进行探讨以及对实验的

8、改进意见等。定量实验报告中，目的和要求、原理以及操作方法部分应简单扼要的叙述，但是对于实验条件（试剂配制及仪器）和操作的关键环节必须写清楚。对于实验结果部分，应根据实验课的要求将一定实验条件下获得的实验结果和数据进行整理、归纳、分析和对比，并尽量总结成各种图表，