实验4：果汁中的果胶和果胶酶

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1、实验4果汁中的果胶和果胶酶第二部分:酶的应用实验目的:1.探究制作果汁的最佳条件2.检测果胶酶的活性酶普遍存在于动、植物和微生物中，将酶从生物组织或细胞以及发酵液中提取出来，可加工成具有一定纯度标准的生化酶制剂。１.酶在生物体内的存在(或分布)部位？酶是在生物体活细胞中合成的。多数酶在细胞内直接参与生物化学反应，少数的酶要分泌到细胞外发挥作用。2．酶是怎样提取出来的？如果提取存在于细胞内的酶，需要破碎生物组织细胞，可用破碎仪、研磨器或匀浆器等机械将组织细胞破碎，使酶从活细胞中释放出来，进入细胞外的溶液中，经过滤、离心

2、制备成粗酶液。对于唾液淀粉酶、胰蛋白酶等分泌到细胞外的酶，可以直接从动物分泌物或细胞外的组织间隙中提取。3．酶的活性是指什么?是指酶催化一定化学反应的能力。5.影响酶活性的主要因素有哪些?温度、pH和酶的抑制剂等条件都会影响酶的活性．其高低可以用在一定条件下，酶所催化的某一化学反应的反应速度来表示。酶反应速度：用单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量来表示。4.酶活性的高低一般用什么指标表示？〖资料〗果胶是植物细胞壁的以及胞间层的主要成分之一，由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯组成。下面是果胶的结构式：山楂的果

3、实中果胶含量最多，果胶是很好的凝固剂，用煮沸的山楂泥可制成山楂糕，就是由于果胶的作用。果胶起着将植物细胞粘合在一起的作用，去掉果胶，就会使植物组织变得松散。果胶不溶于乙醇，故可用酒精沉淀法提取果胶，这是鉴别果胶的一种简易方法。果胶酶在果汁生产中的应用果胶+水果胶+酒精果胶的应用浓缩水果饮料糖果产品牛奶制品果酱制品果胶酶和果胶甲酯酶可水解果胶，瓦解植物的细胞壁和胞间层。使榨取果汁更容易，而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得浑浊的果汁变得澄清。有些微生物，如黑曲霉、苹果青霉等都可用于生产果胶酶。在果汁生产中应用果胶酶可

4、以提高出汁率(果汁量）和澄清度.在果汁加工中，果胶不仅会影响出汁率，还会使果汁浑浊。果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶脂酶等。果胶酶功能能完全降解果汁中的果胶质，使果汁迅速澄清能裂解果蔬细胞壁，提高果蔬汁得率；能降低果汁粘度，提高过滤速度；能有效预防产品的后浑浊，延长果汁保质期。用量添加量一般为20～100ml/吨果汁（浆），对于果胶含量高的浆果类用量在100～300ml/吨果浆产品特点PH值特性：作用PH：2.5-6.0，最适作用PH3.5;温度特性：作用温度

5、为15-55℃左右。最适作用温度为50℃。贮存最佳贮藏条件为4-15℃，一般为室温贮藏，避免阳光直射。果汁的制作过程：1、先用匀浆器将果实捣成匀浆。2、加入果胶酶降低匀浆液的黏稠度，使细胞分散，减少固形物。3、过滤，收集滤液4、浓缩保存5、制作产品时，稀释后加入混浊剂。如果不加果胶酶，则不易过滤，且含有的有效成分减少，口感差。根据上述资料回答以下问题：１．果胶的主要存在部位？果胶的组成？果胶的作用？２．鉴别果胶的一种简易方法？３．果胶酶的作用原理？４．果胶酶主要存在于哪些生物中？植物、霉菌、酵母菌和细菌均能产生果胶酶

6、。一般可用黑曲霉、苹果青霉来生产果胶酶。分解果胶，使植物组织变得松散加乙醇，出现果胶沉淀细胞壁，胞间层的主要成分之一半乳糖醛酸+半乳糖醛酸甲酯作为凝固剂，将植物细胞粘合在一起〖设备用品〗1．匀浆机(图9)2．小刀3．100ml的烧杯4．沸水浴或酒精灯5．试管6．移液器7．量筒8.过滤器〖材料〗1．山楂或苹果，每组10g。2．黑曲霉提取液或果胶酶溶液。3．95％的乙醇。实验材料用具:实验流程——具体操作步骤苹果或山楂果实去种切成小块，用匀浆机加入少量水制成匀浆（果泥）配置2%果胶酶:用电子天平称取2克果胶酶溶解在98毫

7、升的蒸馏水中。或用黑曲霉提取液50g新鲜水果或蔬菜+10%NaCl（激活剂）剪碎研磨（冷）成匀浆收集滤液离心取上清液0.1mol/L冰醋酸调节pH，0~4℃保存制备果胶酶5g匀浆+10mL果胶酶溶液AB5g匀浆+10mL蒸馏水间歇搅拌20～30min，使酶与底物充分接触并发生化学反应与酶反应后过滤果汁ABAB烧杯号试管号处理加酒精前现象加酒精后现象A（含酶）1加热2不加热B（不含酶）3加热4不加热取4支试管，编号1～4。将A烧杯中的混合物放入1和2号试管中，每管放入4mL。3和4号试管分别加入4mLB烧杯中的混合物。

8、将1和3号试管水浴加热，2和4号试管不加热，观察有何现象发生？AB实验步骤：1.去种切块加水，制作匀浆;2.分组编号,加入等量底物匀浆液;3.添加变量(酶的有无及是否加热)4.加入等量的乙醇,观察试管变化.烧杯号试管号处理加酒精前现象加酒精后现象A(有酶）1加热2不加热B(无酶）3加热4不加热浑浊浑浊浑浊浑浊澄清较澄清沉淀沉淀【实验结论】1．1